Orientadora : Profª Drª Ivan Roque de Barros Filho / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias. Defesa: Curitiba, 30/03/2015 / Inclui referências : f. 132-159 / Área de concentração : Ciências Veterinárias / Resumo: Apesar de atualmente a Encefalopatia Espongiforme Bovina (EEB) estar sob controle, outras formas da doença foram relatadas inicialmente na Europa, e ainda pouco se sabe sobre seus impactos em Saúde Pública . Por ser uma doença importante no comércio internacional, e ser uma zoonose fatal, a Organização Mundial da Saúde Animal preconiza ações que visam a mitigação do risco de sua difusão pelo mundo. O Brasil e os Estados Unidos da América são países com grand es rebanhos bovinos comerciais, e em ambos só houve a ocorrência de casos atípicos autóctones de EEB. Nesta dissertação foram analisados os sistemas de vigilância da EEB nestes países e foi relatado o primeiro caso de EEB no Brasil, ocorrido no Paraná. Ver ificou - se que ambos atendem as diretrizes da Organização Mundial de Saúde Animal. Contudo, esta mesma Organização não preconiza ações de prevenção ou controle que tratem especificamente das EEB atípicas, pois o alvo da vigilância são ruminantes com a apres entação do quadro clássico da doença. Neste sentido, há necessidade de um redimensionamento de prioridades e importância para as demais categorias de vigilância (animais mais velhos e caídos). Em relação ao sistema de vigilância brasileiro, pode - se conclui r que há necessidade de alterações profundas no sistema de acondicionamento de amostras e exames laboratoriais, pois o atual sistema está voltado para o diagnóstico da forma clássica da EEB, além da inclusão do gânglio trigêmeo, do processo transverso da c oluna vertebral e o gânglio da raiz dorsal na lista de materiais de risco específico. Foi possível concluir que o sistema de vigilância da EEB no Brasil é mais voltado para a saúde animal, enquanto o sistema estadunidense visa a proteção do consumidor. As adequações apontadas nesse trabalho são necessárias para que sistema do Brasil atinja um grau de excelência e que forneça mais garantia aos consumidores dos produtos cárneos brasileiros. Palavras - chave: EEB. Atípicas. Sistema de Vigilância. Mitigação de risco. / Abstract: Although the Bovine Spongiform Encephalopathy (BSE) is under control, other forms of the disease have been reported, inicially in Europe, and the knowledge about their impact on public health remains uncertain. In compliance with this importance in international trade, the World Animal Health Organization recommends actions aimed at mitigating the risk of spread the BSE around th e world. Brazil and the United States are countries with large commercial cattle herds, and in both there was only the occurrence of atypical BSE indigenous cases. In this dissertation, the BSE monitoring systems were analyzed in these countries and the de scription of the first BSE case reported in Brazil, occurred in Paraná State. We found ed that both systems meet the guidelines of the World Organization for Animal Health. However, this same organization does not call for actions to prevent or control that specifically address the atypical BSE, as the target of the surveillance are ruminants with the presentation of the classic picture of the disease. In this sense, is necessary the reassessment of priorities and give more importance to all other surveillan ce categories (older and fallen animals). Regarding the Brazilian surveillance system, it can be concluded that there is need for profound changes in the packaging system samples and laboratory tests, because the current system is focused on the diagnosis of classical form of BSE, besides adding the trigeminal ganglion, the transverse process of the spine and dorsal root ganglion in the list of specified risk material. We concluded that the BSE monitoring system in Brazil is more focused on animal health, w hile the US system is aimed the meat consumer protection. The adjustments identified in this work are needed for Brazil ian system reaches a level of excellence and to provide more security for consumers of Brazilian meat products. Keywords: BSE. Atypical. Surveillance System. Risk mitigation.

Orientadora : Profª Drª Simone Tostes de Oliveira Stedile / Co-orientadora : Profª Drª Carla Forte Maiolino Molento / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias. Defesa: Curitiba, 24/03/2015 / Inclui referências / Área de concentração : Ciências veterinárias / Resumo: O uso de métodos alternativos para o treinamento de procedimentos clínicos na Medicina Veterinária constitui uma possibilidade de superar dois grandes problemas atuais: um de ordem ética, que é a utilização de animais vivos como recursos didáticos, e outro de ordem técnica, que é a oportunidade limitada de os estudantes desenvolverem e exercitarem suas capacidades clínicas. Simultaneamente, o desenvolvimento de métodos alternativos possibilita a implementação do princípio ético dos 3Rs, substituição, redução e refinamento do uso de animais no ensino. Considerando-se as vantagens do uso de métodos alternativos, desenvolveu-se um simulador de paciente canino que permitiu aos estudantes o treinamento da técnica de palpação prostática. O uso de métodos alternativos para o treinamento clínico ainda é um assunto negligenciado em muitos cursos de Medicina Veterinária, o que motivou a segunda parte deste trabalho, a elaboração de um guia para a realização de uma oficina sobre métodos alternativos com o intuito de expandir o conhecimento ético e técnico dos participantes. A oficina resultou em um notável envolvimento dos participantes com o tema e na criação de quatro modelos alternativos para o treino de procedimentos clínicos. Palavras-chave: educação humanitária, substituição, aprendizado prático, métodos alternativos, ética. / Abstract: The use of alternative methods for clinical training in veterinary medicine is an opportunity to overcome two major issues in contemporary practice: an ethical one, which is the use of live animals as teaching resources, and a technical one, which is the limited opportunity for students to develop and exercise their clinical skills. Simultaneously, the development of alternative methods enables the implementation of the ethical principle of the 3Rs, replacement, reduction and refinement of animal use in teaching. Considering the advantages of using alternative methods, we developed a canine patient simulator that allowed students to train the prostate palpation technique. The use of alternative methods for the clinical training is still a neglected subject in many veterinary medicine courses, which led us to the second part of this work, the development of a guide for conducting a workshop on alternative methods in order to expand ethical and technical knowledge of the participants. The workshop resulted in a notable participant involvement with the topic and the creation of four alternative models for training of clinical procedures. Keywords: humane education, replacement, practical learning, alternative methods, ethics.

Orientadora : Profª Drª Tilde Rodrigues Froes / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias. Defesa: Curitiba, 31/03/2015 / Inclui referências / Área de concentração : Ciências veterinárias / Resumo: A presente pesquisa buscou contribuir com informações sobre avaliação ultrassonográfica pré-natal no terço final da gestação em cadelas, particularmente às características fetais que devem ser ponderadas rotineiramente pelo médico veterinário imaginologista nesse período. Para tanto, o trabalho foi subdividido em três capítulos independentes. No primeiro capítulo o enfoque da pesquisa foi avaliar e descrever as acelerações e desacelerações transitórias na frequência cardíaca fetal, acompanhadas pela ultrassonografia e provocadas pelas contrações uterinas; à semelhança do que ocorre em fetos humanos, proporcionando o planejamento da cesariana. Esse trabalho demonstrou que tais oscilações na frequência cardíaca fetal pré-parto acontecem em fetos caninos e devem ser utilizadas para prever com precisão o momento do parto iminente. Em cães a identificação do sexo fetal pode estar relacionada ao fator econômico, no entanto, para os proprietários esse fato pode estar correlacionado a questões emocionais. Por esse motivo, o segundo capítulo discorre sobre a descrição do método que determina o sexo fetal canino intrauterino pelo exame ultrassonográfico, indicando a melhor idade gestacional e definindo a acurácia do exame ultrassonográfico para esse fim, de acordo com o tamanho da ninhada. O terceiro capítulo refere-se ao acompanhamento na visualização das alças intestinais fetais pelo exame ultrassonográfico, pois acreditamos que com a evolução dos aparelhos de ultrassonografia agora com alta resolução, esse órgão é observado antes da idade gestacional descrita previamente na literatura. Descrevemos nesse capítulo o desenvolvimento ultrassonográfico das alças intestinais fetais, relacionada a idade gestacional, associado a avaliação da presença de peristaltismo intestinal e se essa característica tem importância no planejamento da cesariana. Conseguimos provar que a visualização do peristaltismo intestinal fetal não deve ser utilizada como parâmetro ultrassonográfico único para programar uma cesariana. Portanto, apresento três estudos inéditos cujos achados e conclusões são de grande importância para a reprodução e o diagnóstico por imagem veterinário. Palavras-chaves: cão, gestação, ultrassonografia fetal, sexagem fetal, ultrassonografia intestinal fetal, maturação fetal / Abstract: The main of this research was to contribute with information about prenatal evaluation at the end of gestation in dogs, particularly the foetal characteristics that should be considered routinely by veterinary radiologist in this period. Therefore, the study was divided into three independent chapters. In the first chapter, the focus of the research was to assess and describe the transient accelerations and decelerations in the foetal heart rate monitored by ultrasound and caused by uterine contractions; similar to what occurs in the human foetus, providing planning caesarean section. In dogs, identification of foetal sex could be related to economic factor, however, for owners this fact probably is correlated to emotional issues. For this reason, the second chapter discusses description of method that determines foetal sex canine intrauterine by ultrasonography, indicating the best gestational age and setting accuracy of ultrasonography for this purpose, according to size of litter. The third chapter deals with visualization of foetal bowel by ultrasonography, because we believe that, with evolution of ultrasound equipment with high resolution, this organ is observed before the gestational age previously described in literature. Herein we describe the development of ultrasound foetal bowel, related to gestational age, combined with evaluation of the presence of intestinal peristalsis and if its importance in planning of caesarean section. We managed to prove that visualization of fetal intestinal peristalsis should not be used alone as sufficient ultrasound parameter to schedule a caesarean section. Therefore, present three unpublished studies whose findings and conclusions are great importance for the veterinary reproduction. Keywords: dog, pregnancy, foetal ultrasound, foetal sex determination, foetal intestinal ultrasound, foetal maturation

Orientador : Prof. Dr. Fabiano Montiani-Ferreira / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias. Defesa: Curitiba, 24/03/2015 / Inclui referências : f. 18-19;72-74;75-79 / Área de concentração : Ciências veterinárias / Resumo: A presente dissertação está dividida em quatro capítulos. O primeiro capítulo introduz brevemente o leitor à história natural dos morcegos, apresentando esses animais e diferenciando-os em megaquirópteros e microquirópteros, tendo em vista que este animal será abordado nos dois capítulos seguintes. O Capítulo 2 descreve a presença da espinha óptica do alisfenóide em duas espécies de microquirópteros. A referida estrutura anatômica havia sido descrita somente no morcego-das-frutas (Artibeus lituratus). Poucos são os dados disponíveis na literatura no que diz respeito à oftalmologia de morcegos. Assim, o terceiro capítulo apresenta valores para produção lacrimal, tonometria e comprimento horizontal da fenda palpebral para as espécies Artibeus lituratus e Anoura caudifer. Esses dados poderão servir de valores de referência para pesquisas futuras nessa ordem dos mamíferos. Já o Capítulo 4 apresenta o levantamento de casos diagnosticados histopatologicamente pelo Laboratório de Oftalmologia Comparada (LABOCO) da Universidade Federal do Paraná. Dentre eles estão bulbos oculares e pálpebras de cães, gatos, cavalos e diferentes espécies de animais selvagens. Palavras-chave: Oftalmologia comparada, morcegos, patologia ocular. / Abstract: The present study is divided in four chapters. The first one briefly introduces the reader to the natural history of bats, showing these animals and differentiating them in megachiroptera and microchiroptera, since bats will be adressed in the next two chapters. Chapter 2 describes the presence of optic spine of the alisphenoid bone in two species of microbats. This anatomic structure had only been described in the large fruit-eating bat (Artibeus lituratus). There are very few studies available in the literature concerning bat ophthalmology. Thus, the third chapter provides values for tear production, tonometry and measurement of the horizontal length of the palpebral fissure for two species of microbats: Artibeus lituratus and Anoura caudifer. These data may serve as reference values for future research in this order of mammals. Chapter 4 presents the survey of eye diseases histopathologically diagnosed by Comparative Ophthalmology Laboratory (LABOCO) of the Federal University of Paraná. These include eyeballs and eyelids of dogs, cats, horses and different species of wildlife. Key-words: Comparative ophthalmology, bats, ocular patology

Orientadora : Profa. Dra. Aline de Marco Viott / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias. Defesa: Palotina, 20/02/2017 / Inclui referências : f. 64-73 / Resumo: A diarreia é um sinal clínico comum a diversas doenças, sejam de origem bacteriana, viral, ou parasitária. O diagnóstico correto da causa se torna fundamental para o tratamento adequado de potros. A Lawsonia intracellularis é um patógeno muito estudado em suínos, porém nos equinos os primeiros relatos começaram a surgir na década de 1980, e ainda são poucos os casos relatados na literatura veterinária. O rotavírus vem sendo relatado na literatura como causador de diarreias em diversas espécies animais. Em potros, seu relato é atualmente escasso. Foi pesquisada a frequência de L. intracellularis e de rotavírus em equinos com idades entre um mês e cinco anos criados no oeste do estado do Paraná. Os equinos eram provenientes de 15 propriedades oriundos de cinco cidades da região oeste do Paraná. Dos animais utilizados no experimento, 80 (53,69%) eram fêmeas e 69 (46,31%) eram machos. Foram coletadas amostras de sangue e de fezes de 149 animais No exame sorológico de imunoperoxidase em monocamada de células (IPMC), 4,69% dos animais se apresentaram positivos, provenientes de seis propriedades distintas, dentre as 15 pesquisadas. Esses animais apresentavam idades entre seis meses e cinco anos, e títulos sorológicos de 1:60, 1:240 e 1:480. Para a pesquisa de rotavírus foi utilizada a eletroforese em gel de agarose. Não houveram animais positivos para a eliminação de partículas virais nas fezes. Palavras-chave: Enteropatia proliferativa equina; estudo de frequência; diarreia; cavalos. / Abstract: Diarrhea is a common clinical sign of several diseases, of bacterial, viral, or parasitic origin. Correct diagnosis of the cause is essential for proper treatment of foals. Lawsonia intracellularis is a very well know pathogen in swine, however, in foals the first reports dates on 1980, and since then rare cases were report in the veterinary literature. Rotavirus has been describe in the literature as causing diarrhea in several animals. In foals, rotavirus occurrence is currently scarce. The frequency of L. intracellularis and rotavirus was investigated in horses aged between one month and five years old raised in the western state of Paraná. The horses came from 15 farms from the five cities of western Paraná. Of animals used in this research, 80 (53.69%) were females and 69 (46.31%) were males. In serological test using immunoperoxidase performed on cell monolayers (IPMC), 4.69% of animals were positive totalizing six of fifteen farms analyzed. These animals had between six months and five years, and the serological titers varied of 1:60, 1: 240 and 1: 480. For an investigation of rotavirus agarose gel electrophoresis was perform. No one animal was positive for rotavirus in faeces. Key words: Equine proliferative enteropathy; Frequency study; diarrhea; Horses.

Orientador : Prof. Dr. Rafael Felipe da Costa Vieira / Coorientador : Prof. Dr. Alexandre Welker Biondo / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias. Defesa: Curitiba, 09/12/2016 / Inclui referências : f. 15-19;45-54;62-64;67-70;72-86;97-101;105-108 / Área de concentração : Ciências veterinárias / Resumo: Os micoplasmas hemotrópicos (hemoplasmas) são bactérias distribuídas mundialmente que afetam animais domésticos e animais selvagens além dos seres humanos. Eles ainda permanecem incultiváveis in vitro. Os hemoplasmas tem sido descritos como potenciais causadores de anemia hemolítica em mamíferos domésticos e selvagens. O objetivo deste estudo foi detectar por intermédio de métodos moleculares a presença de micoplasmas hemotrópicos em mamíferos selvagens nativos e exóticos. Esta tese de doutorado apresenta três artigos. O primeiro artigo é de revisão sistemática e meta-análise sobre a detecção molecular de hemoplasmas em mamíferos selvagens, utilizando-se os artigos indexados no MEDLINE e SCIELO, no periodo de dezembro de 1967 a outubro 2016. Um total de 45/1235 artigos (3,64%) relacionaram-se à identificação molecular de hemoplasmas em mamíferos selvagens, e 78 espécies de mamíferos selvagens foram relatadas como infectadas. A metanálise foi realizada utilizando um modelo de efeitos aleatórios para comparação dos dados de prevalência disponíveis para mamíferos selvagens em cativeiro e em vida livre e entre as ordens. Uma árvore filogenética com base em sequencias do gene 16S rRNA foi construída, comparada e discutida. Hemoplasmas estão distribuídos em mamíferos selvagens em todo o mundo, com prevalencia de 29,92% (IC 24,53 - 33,74) para todos os animais, sendo 31,00% (IC 24,97 - 37,76, I² p<0,001) para animais em vida livre e 22,33% (IC 17,20 - 28,47, I² p<0,001) para animais em cativeiro. O segundo artigo refere-se a pesquisa de micoplasmas hemotrópicos em morcegos, sendo este o primeiro estudo com micoplasmas hemotrópicos em morcegos no Brasil. Foram colhidas amostras de sangue (n = 10) de oito morcegos hematófagos: seis machos, morcego-vampiro comum (Desmodus rotundus, família Phyllostomidae), dois machos, morcego-vampiro de patas peludas (Diphylla ecaudata, família Phyllostomidae); e duas fêmeas não-hematófagas, morcego-de-Pallas (Molossus sp., Família Molossidae), na região de Curitiba, Estado do Paraná, sul do Brasil. Para a anestesia, as gaiola com os morcegos foram colocadas dentro de um recipiente de plástico e o isoflurano foi infundido com uma máquina com oxigênio. A manutenção da sedação foi realizada utilizando máscara de inalação. A punção intracardíaca foi realizada para se obter o sangue, sequencialmente, os morcegos foram submetidos a eutanasia com dose letal de cloreto de potássio intracardíaco. Os esfregaços sanguíneos de dois Desmodus rotundus, preparados imediatamente após a colheita de sangue, foram corados com May-Grünwald-Giemsa e examinados por microscopia de luz com ampliação de 1000x para a presença de hemoplasma. O DNA foi extraído de 200 ?L de sangue utilizando um kit comercialmente disponível de acordo com as instruções do fabricante. A PCR para o gene desidrogenase gliceraldeído-3-fosfato (GAPDH), foi realizada para garantir a extração bem sucedida do DNA. Em seguida, as amostras foram rastreadas por PCR pan-hemoplasma convencional direcionando para as regiões 16S rDNA específicas para hemoplasmas. Utilizando-se iniciadores universais para o 16S rRNA (Referência), amostras de 2 morcegos da espécie Desmodus rotundus que testaram positivo para Mycoplasma sp na primeira reação de PCR, foram amplificados. Os produtos de PCR de 745 pb foram purificados a partir do gel de agarose a 1,5% e sequenciados. As sequências nucleotídicas dos isolados de hemoplasmas de morcegos foram submetidas à base de dados GenBank sob o número de acesso KX722541. Foi construída uma árvore filogenética baseada em sequências de genes 16S rRNA. Em geral, 8/10 (80,0%) morcegos testaram positivos para Mycoplasma sp. incluindo 5/6 (83,3%) Desmodus rotundus, 2/2 (100%) Diphylla ecaudata e 1/2 (50,0%) Molossus sp. As análises da seqüência parcial do gene 16S rRNA identificaram potencialmente uma nova espécie de hemoplasma infectando morcegos na região de Curitiba, Estado do Paraná, Sul do Brasil. No terceiro artigo, o objetivo do estudo foi aplicar um protocolo PCR de Mycoplasma ovis em 12 aoudads (Ammotragus lervia) de cativeiro do Zoológico de Curitiba, sul do Brasil. Foi utilizado um total de 12 amostras de sangue com EDTA, previamente pesquisadas para outros patógenos. O DNA foi extraído e um protocolo para PCR do gene desidrogenase gliceraldeído-3-fosfato (GAPDH) foi realizado em todas as amostras para garantir DNA amplificável. Em seguida, todas as amostras foram testadas e resultaram negativas em protocolo de PCR específico para a detecção e amplificação de M. ovis. Em anexo estão dois artigos, o primeiro anexo trata-se de uma revisão sobre patógenos em aoudads, com artigos publicados entre setembro de 1959 e outubro de 2016, identificados por meio de busca informatizada nas bases de dados eletrônicas PubMed e SciELO. Alguns patógenos detectados em aoudads, como Mycobacterium tuberculosis e Toxoplasma gondii, também podem infectar animais domésticos e seres humanos. O segundo anexo refere-se a pesquisa de Plasmodium sp. em cervídeos no Brasil. Foi avaliado um rebanho cativo de 22 veado-bororó (Mazama nana), quatro veado-mateiro (Mazama americana) e seis cervo-do-Pantanal (Blastocerus dichotomus) do Sul do Brasil; utilizando microscopia de luz e abordagens moleculares. Os testes microscópico e molecular utilizados não indicaram a presença do parasita nas amostras. Palavras-chave: Micoplasma Hemotrópico, Hemoplasma, Mamíferos Selvagens, PCR, Patógenos, Plasmodium sp. / Abstract: Hemotropic mycoplasmas (hemoplasmas) are worldwide distributed bacteria affecting domestic and wildlife animals besides human beings. They still remain uncultivated in vitro. Hemoplasms have been described as potential causes of hemolytic anemia in domestic and wild mammals. The objective of this study was to detect by molecular methods the presence of hemotropic mycoplasmas in native and exotic wild mammals. This doctoral thesis presents three articles. The first article is of systematic review and meta-analysis on the molecular detection of hemoplasms in wild mammals, using articles indexed in MEDLINE and SCIELO, from December 1967 to October 2016. A total of 45/1235 articles (3.64%) related to molecular identification of hemoplasmas in wild mammals, and 78 wild mammal species were reported to be infected. The meta-analysis was performed using a random-effects model to compare the prevalence data available for wild mammals in capitivity and in free ranging between orders. A phylogenetic tree based on 16S rRNA gene sequences was constructed, compared and discussed. Hemoplasmas are distributed in wild mammals throughout the world, with prevalence of 29.92% (CI 24.53 - 33.74) for all reported animals: 31.00% (CI 24.97 - 37.76, I² p < 0.001) for wild animals and 22.33% (CI 17.20 - 28.47, I² p < 0.001) for captive animals. The second article refers to the research of hemotropic mycoplasmas in bats, being this the first study with hemotropic mycoplasmas in bats in Brazil. Blood samples (n=10) were taken from eight hematophagous bats: six males common vampire bat (Desmodus rotundus; Family Phyllostomidae), two males hairy-legged vampire bat (Diphylla ecaudata; Family Phyllostomidae); and two no-hematophagous females Pallas's mastiff bat (Molossus sp.; Family Molossidae), at Curitiba's region, Parana State, southern Brazil. For anesthesia, bat cages were put inside a plastic container and isoflurane was infused with a machine with oxygen. Sedation maintenance was performed using inhalation mask. Intracardiac puncture was performed to obtain blood, sequentially, the bats were euthanized with lethal dose of intracardiac potassium chloride. Blood smears of two Desmodus rotundus, prepared immediately after blood collection, were stained with May-Grünwald-Giemsa and examined using light microscopy at 1,000x magnification for the presence of hemoplasma. DNA was extracted from 200 ?L blood using a commercially available kit according to the manufacturer's instructions. A PCR for the housekeeping gene, glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase GAPDH), was performed to ensure successful DNA extraction. Thereafter, samples were screened by conventional pan-hemoplasma PCR targeting the 16S rDNA regions specific for hemoplasmas. 'Candidatus M. haemovis'-positive goat blood sample and nuclease-free water were used as positive and negative control, respectively. Using universal primers for the 16S rRNA (Reference), samples from two bats of the species Desmodus rotundus that tested positive for Mycoplasma sp in the first PCR reaction, were amplified. The PCR products of 745 bp were purified from the 1.5% agarose gel and sequenced. The nucleotide sequences of the hemoplasmas isolates from bats were submitted to the GenBank database under the accession number KX722541. A phylogenetic tree based on 16S rRNA gene sequences was constructed. In overall, 8/10 (80.0%) bats tested positive to Mycoplasma sp. including 5/6 (83.3%) Desmodus rotundus, 2/2 (100%) Diphylla ecaudata and 1/2 (50.0%) Molossus sp. The analyses of the partial sequence of 16S rRNA gene have identified a potentially novel hemoplasma species infecting bats at Curitiba's region, Parana State, Southern Brazil. In the third article, the objective of the study was to apply a PCR protocol of Mycoplasma ovis in 12 captive Barbary sheep (Ammotragus lervia) at Curitiba Zoo, in southern Brazil. A total of 12 blood samples with EDTA, previously searched for other pathogens were used. DNA extracted and a PCR protocol for the glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) gene was performed on all samples to ensure amplifiable DNA. Subsequently, all the samples were tested and found to be negative using a specific PCR protocol for M. ovis detection and amplification. In the supplement are two articles, the first supplement is a review of pathogens in aoudads, with articles published between September 1959 and October 2016, identified through a computerized search in the electronic databases PubMed and SciELO. Some pathogens detected in aoudads, such as Mycobacterium tuberculosis and Toxoplasma gondii, can also infect domestic animals and humans. The second supplement refers to the research of Plasmodium sp. in cervidae in Brazil. A captive herd of 22 deer-bororó (Mazama nana), four deer-mateiro (Mazama americana) and six marsh deer (Blastocerus dichotomus) from southern Brazil were evaluated using light microscopy and molecular approaches. Microscopic and molecular analyses were both negative for parasite presence. Keywords: Hemotropic Mycoplasma, Hemoplasma, Wild Mammals, PCR, Pathogens, Plasmodium sp.

Orientador : Prof. Dr. Alex Maiorka / Coorientador : Prof. Dr. Everton Luís Krabbe / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias. Defesa: Curitiba, 23/02/2017 / Inclui referências : f. 59-83;103-109;120-124;142-145;164-169;172-208 / Área de concentração: Ciências Veterinárias / Resumo: O desmame de suínos nas condições comerciais modernas causa estresse (ambiental, nutricional, psicológico/social) e está associado com alterações marcantes na fisiologia, microbiologia e imunologia do trato gastrointestinal, sendo um período geralmente caracterizado por crescimento abaixo do ideal, eficiência alimentar prejudicada, elevada incidência de perturbações intestinais e mortalidade elevada. Dessa forma, o objetivo desta tese foi avaliar o uso de estratégias para melhorar o desempenho de leitões desmamados, abordando o uso de antibióticos promotores do crescimento (APC), bem como o processamento e forma física da dieta como alternativa ao seu uso. Para isso, a tese foi dividida em cinco capítulos. O capítulo 1 abrange uma revisão de literatura sobre o uso de APC e sobre o processamento da dieta para leitões desmamados. No capítulo 2 foi demonstrado que a colistina e tilosina, utilizados como APC para leitões desmamados, aumentaram significativamente o consumo de ração, resultando em maior peso corporal, além de promoverem redução significativa na incidência de diarreia e modularem a resposta imune. No capítulo 3 foi avaliado o uso da lincomicina como APC para leitões desmamados, a qual promoveu redução na incidência de diarreia dos leitões, mas não apresentou efeito sobre os parâmetros de desempenho avaliados. No capítulo 4 foi avaliada a influência de diferentes tipos de processamento e forma física da ração sobre o desempenho de leitões desmamados e sobre a digestibilidade da dieta. Não foram observados efeitos do processamento e forma física da ração sobre o ganho de peso e consumo de ração em leitões desmamados, mas verificou-se que a peletização a 2,5 mm proporcionou melhor conversão alimentar em comparação às dietas farelada e farelada condicionada, o que pode ser atribuído ao maior coeficiente de digestibilidade do extrato etéreo das dietas peletizadas. Não foi observado efeito do tamanho do pelete sobre os parâmetros de desempenho avaliados. No capítulo 5 foi avaliado o efeito de diferentes formas de processamento e forma física da dieta sobre a preferência alimentar de leitões desmamados e verificou-se que os mesmos influenciam a preferência alimentar dos animais. Leitões desmamados preferem dietas submetidas a algum tipo de processamento em comparação à dieta farelada simples, bem como preferem dietas peletizadas à fareladas, peletes de 2,5 mm em comparação à peletes de 4,75 mm (intactos ou triturados), e peletes de 4,75 mm triturados em comparação à peletes de 4,75 mm intactos, demonstrando que dietas processadas termicamente são mais palatáveis. No entanto, a preferência pela dieta peletizada não se refletiu em maior consumo da mesma em relação à farelada, provavelmente por fatores pós ingestivos, como mecanismos de retroalimentação. Estes resultados demonstram que o processamento térmico pode tornar a dieta mais atrativa e aumentar a digestibilidade de alguns nutrientes, o que pode reduzir o período de jejum pós-desmame e auxiliar na manutenção da função intestinal, podendo ser uma alternativa ao uso dos APC. Palavras-chave: Aditivos. Desmame. Peletização. Resistência bacteriana. Suínos. / Abstract: Weaning pigs under modern commercial conditions causes stress (environmental, nutritional, psychological/social) and is associated with marked changes in physiology, microbiology and immunology of the gastrointestinal tract, being a period generally characterized by growth below ideal, impaired food efficiency, high incidence of intestinal disturbances and high mortality. Thus, the objective of this thesis was to evaluate the use of strategies to improve the performance of weaned piglets, addressing the use of antibiotic growth promoters (AGP), as well as the processing and physical form of the diet as an alternative to its use. For this, the thesis was divided into five chapters. Chapter 1 covers a literature review on the use of AGP and on diet processing for weaned piglets. In Chapter 2, it was demonstrated that colistin and tylosin, used as AGP for weaned piglets, significantly increased feed intake, resulting in a higher body weight, besides promoting a significant reduction in diarrhea incidence and modulation in the immune system. In Chapter 3, the use of lincomycin as an AGP for weaned piglets was evaluated, and this antibiotic promoted a reduction in the diarrhea incidence, but did not show any effect on the performance parameters evaluated. In Chapter 4 the influence of different types of processing and physical form of the diet on weaned piglets performance and on the diet digestibility, were evaluated. No effects of processing and physical form of the diet on weight gain and feed intake were observed in weaned piglets, but it was found that 2.5 mm pelleting resulted in better feed conversion compared to the mash and conditioned mash diets, which can be attributed to the higher digestibility coefficient of the ethereal extract of the pelleted diets. No effect of the pellet size was observed on the evaluated performance parameters. In Chapter 5 the effect of different forms of processing and physical form of the diet on the feeding preference of weanling piglets were evaluated, and it was verified that they influence the animals feeding preference. Weaned piglets prefer diets subjected to some sort of processing compared to simple mash diets, as well as prefer pelleted diets to mash diets, 2.5 mm pellets compared to 4.75 mm pellets (intact or crumbled), and crumbled pellets of 4.75 mm compared to intact pellets of 4.75 mm, demonstrating that thermally processed diets are more palatable. However, the preference for the pelleted diet was not reflected in the higher intake of the same in relation to the meal diet, probably by post ingestive factors, as feedback mechanisms. These results demonstrate that thermal processing may make the diet more attractive and increase the digestibility of some nutrients, which may reduce the postweaning fasting period and help maintain intestinal function, and may be an alternative to AGP use. Key-words: Additives. Bacterial resistance. Pelletizing. Swine. Weaning.

Orientador : Prof. Dr. Marson Bruck Warpechowski / Co-orientadora : Profª. Drª. Ana Rosalia Mendes / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias. Defesa: Curitiba, 27/03/2015 / Inclui referências / Área de concentração : Nutrição e alimentação animal / Resumo: A dissertação baseia-se em um trabalho experimental com o objetivo de avaliar o uso de zero, 0,4% e 0,8% de uma mistura comercial de ácidos parcialmente protegida com gordura saturada (NeoAcid PIG®), sobre a digestibilidade ileal (CDI) e fecal (CDF) em leitões desmamados alimentados com dois tipos de dietas, simples (farinha de carne) e complexa (concentrado de proteina de soja, plasma sanguíneo e leite em pó desnatado). O Capítulo 1 apresenta uma revisão sobre o funcionamento do trato gastrointestinal e a utilização de acidificante na dieta de leitões no pós-desmame. No Capítulo 2 avaliou-se o efeito do acidificante sobre a digestibilidade ileal das frações do alimento, com uso de indicador e abate para colheita de amostra, enquanto que no Capítulo 3 avaliou-se o efeito das dietas acidificadas sobre a digestibilidade fecal, pelo método da colheita total. Foram utilizados 48 leitões machos castrados LWLD. O delineamento experimental usado foi em blocos ao acaso, com seis dietas (tratamentos), e oito unidades experimentais (animais) por dieta distribuídos em dois períodos experimentais (repetição no tempo, Bloco). Os pesos médios iniciais dos animais foram 7,06 ± 0,76 kg e 7,40 ± 0,69 kg para cada período, respectivamente. Foi usada ANOVA com arranjo fatorial e contrastes ortogonais linear e quadrático, seguida de regressão polinomial. O efeito da inclusão do acidificante foi diferente para cada dieta (P<0,01). Para a dieta complexa, a adição de acidificante aumentou de forma quadrática-platô a digestibilidade da proteína bruta (P<0,01), sem efeito significativo sobre nenhuma das outras frações alimentares estudadas (P>0,12). Para a dieta simples, houve diminuição linear (P<0,01, R2>0,80) nos CDI e CDF da matéria seca, energia bruta e matéria orgânica. Nessa dieta o efeito foi quadrático negativo sobre os CDI e CDF da proteína bruta (P<0,01), enquanto que o efeito para CDI e CDF do resíduo mineral foi inverso, positivo quadrático desacelerado (P<0,01), com as maiores medias com o nível de 0,8% de acidificante (67,77 e 73,36%, respectivamente). O mesmo comportamento (P<0,01) foi observado para os CDF do cálcio e do fósforo, com as maiores médias no nível mais alto de acidificante (75,85; 76,96%, respectivamente). Também houve efeito quadrático (P<0,01) sobre CDF da fibra bruta, da fibra detergente ácido e fibra detergente neutro para a dieta simples, mas com as maiores médias no nível intermediário de acidificante (61,56, 63,56 e 63,59%, respectivamente). Os efeitos da inclusão de acidificante foram diferentes de acordo com a dieta utilizada e a fração nutricional considerada. PALAVRAS-CHAVE: acidificantes, proteína láctea, taxa linear de tamponamento, suínos. / Abstract: The dissertation is based on an experimental study in order to evaluate the use of zero, 0.4% and 0.8% of a commercial mixture of acids partially protected with saturated fat (NeoAcid PIG®), on the ileal digestibility (IDC) and faecal (FDC) in piglets fed diets with two types of simple (meat) and complex (soy protein concentrate, plasma and skimmed milk powder). Chapter 1 presents an overview of the functioning of the gastrointestinal tract and the use of acid in the diet of pigs in the post-weaning. In Chapter 2 was evaluated the effect of acidifying on the ileal digestibility of feed fractions, using indicator and the slaughter-technic for digest sampling, while in Chapter 3 evaluated the effect of acidified diets on faecal digestibility, using the total collection technic. Forty-eigth weaned male LDLW piglets were used. The Randomized Bloc Design was used, with six diets (treatments), and eight experimental units (piglets) by diet, ditributed in two experimental periods (Blocs). The average initial weights of the animals were 7.06 ± 0.76 kg and 7.40 ± 0.69 kg for each period, respectively. ANOVA was used with factorial arrangement and orthogonal linear and quadratic contrasts, followed by polynomial regression. The effect of adding the acidifier is different for each diet (P<0.01). For complex diet, adding acidifying increased in a quadratic-plateau form the digestibility of crude protein (P<0.01), with no significant effect on any of the other studied food fractions (P>0.12). For simple diet, there was a linear decrease (P<0.01, R2>0.80) in CDI and CDF of dry matter, crude energy and organic matter. In this diet quadratic effect was observed on the negative CDI and CDF crude protein (P <0.01), while the effect to the CDI and CDF mineral residue reverse, decelerated positive quadratic (P<0.01), with the highest average at the highest level of acidifying (67.77 and 73.36%, respectively). The same behavior (P<0.01) was observed for calcium and phosphorus CDF, with the highest average at the highest level of acidifying (75.85; 76.96%, respectively). There was also a quadratic effect (P <0.01) on the CDF crude fiber, acid detergent fiber and neutral detergent fiber for the simple diet, but with the highest average in the intermediate level of acidifying (61.56, 63.56 and 63 59%, respectively). The effects of adding acidifying were different according to the nutritional diet used and fraction considered. KEY WORDS: acidifying, milk protein, linear buffering rate, piglets.

Orientadora : Profª. Drª. Rosângela Locatelli Dittrich / Coorientadora : Profª. Drª. Ananda Portella Felix / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias. Defesa: Curitiba, 27/03/2017 / Inclui referências ao final de cada capítulo / Resumo: Nas últimas décadas foram crescentes os estudos em humanos a respeito da concentração sérica da vitamina D na saúde sistêmica. No entanto, na medicina veterinária ainda há pouco conhecimento sobre isso e não há um consenso em relação aos seus valores de referência. Estudos em cães associam a deficiência de vitamina D a maior predisposição para o desenvolvimento de neoplasias, em humanos os resultados sãos mais consistentes e já relacionam essa deficiência ao pior prognóstico e menor sobrevida. Porém, não existe nenhum estudo em cães que relacione as concentrações séricas de 25(OH)D como fator de risco para neoplasia mamária. A presente dissertação está dividida em uma breve descrição e atualização sobre a vitamina D e em dois capítulos. O capítulo I determina valores de referência para 25(OH)D em cães saudáveis e avalia as concentrações séricas de 25(OH)D em relação ao sexo, a faixa etária (adultos e filhotes) e ao tipo de dieta. Foram selecionados 59 cães saudáveis, população total (G), dividido em dois grupos: Grupo 1 (G1): Beagles, faixas etárias distintas (adultos e filhotes), dieta padronizada e Grupo 2 (G2): raças variadas, mesma faixa etária (adultos) e dietas variadas. O intervalo de referência obtido na população total (G) tem limite inferior de 12,2 ng/ml e superior de 74,4 ng/ml. Não foi observada diferença nos níveis séricos de 25(OH)D entre machos e fêmeas. No G1 os filhotes apresentaram uma concentração de 25(OH)D mediana (30,6 ng/ml) inferior aos adultos (34,9 ng/ml). No G2 não foi observada diferença significativa entre os cães que recebiam diferentes tipos de dieta. A ausência de correlação significativa entre a ingestão de vitamina D por quilograma de peso corporal e a concentração de 25(OH)D (G1) sugere que outros fatores podem influenciar nessa relação. O capítulo II aborda a relação entre os níveis séricos de 25(OH)D e o risco de desenvolvimento de neoplasia mamária em cadelas, o prognóstico e a sobrevida. Os cães foram separados em grupo controle (GC) e grupo com neoplasia mamária (GN). Para o GC foram selecionadas 78 cadelas adultas, saudáveis. No GN foram incluídas 65 cadelas, adultas, diagnosticadas com tumor mamário. As cadelas do GN apresentaram níveis significativamente inferiores de 25(OH)D (24,9 ng/ml) em relação ao GC (43,7 ng/ml). As cadelas com valores séricos de 25(OH)D menores que 26,2 ng/ml apresentaram um risco 6,2 vezes maior de desenvolver neoplasia mamária. Fatores prognósticos como malignidade, grau histológico do tumor, presença de metástase não apresentaram relação significativa com as concentrações séricas de 25(OH)D. Porém em cadelas com níveis séricos inferiores a 26,2 ng/ml o risco de mortalidade aumentou em mais de 5 vezes e a curva de sobrevivência foi significativamente menor. Ainda não é possível definir quais os níveis séricos de 25(OH)D são considerados adequados para cães, mas a deficiência de vitamina D pode ser um fator de risco para neoplasia mamária em cadelas e estar relacionada uma menor sobrevida. Palavras-chave: vitamina D, cão, dieta, valor de referência, tumor de mama, mortalidade, sobrevida. / Abstract: In recent decades there has been a growing number of studies in humans regarding serum vitamin D concentration in systemic health. However, in veterinary medicine there is still not much data about this and there is no consensus regarding its reference values. Studies in dogs associate vitamin D deficiency with a greater predisposition to the development of neoplasias. In humans results are more consistent and have already related this deficiency to worse prognosis and lower survival. However, there is no study in dogs that correlates serum concentrations of 25(OH)D as a risk factor for breast cancer. This dissertation is divided in a brief description and update about vitamin D and in two chapters. The chapter I determines reference values for 25(OH)D in healthy dogs, and evaluates serum 25(OH)D levels in relation to gender, age (adult and pups), and type of diet. A total of 59 healthy dogs were selected, divided into two groups: Group 1 (G1): Beagles, different age groups (adults and puppies), standardized diet and Group 2 (G2): varied breeds, same age group (adults) and various diets. The reference range obtained in the total population (G) has a lower limit of 12.2 ng/mL and higher of 74.4 ng/mL. No difference was observed in the serum levels of 25(OH)D between males and females. In G1 puppies had a mean 25(OH)D concentration (30.6 ng/mL) lower than adults (34.9 ng/mL). In G2, no significant difference was observed between dogs receiving different types of diet. The absence of a significant correlation between vitamin D intake per kilogram of body weight and the concentration of 25(OH)D (G1) suggests that other factors may influence this relation. Chapter II discusses the relationship between serum 25(OH)D levels and the risk of developing breast cancer in bitches, prognosis and survival. The dogs were separated in control group (CG) and group with mammary neoplasia (GN). For GC, 78 adult, healthy bitches were selected. In GN 65 adult bitches diagnosed with breast tumor were included. In GN bitches showed significantly lower levels of 25(OH)D (24.9 ng/mL) than GC (43.7 ng/mL). Bitches with serum values of 25(OH)D lower than 26.2 ng/ mL had a 6.2-fold higher risk of developing breast cancer. Prognostic factors such as malignancy, histological grade of the tumor, presence of metastasis did not show significant relation with the serum concentrations of 25(OH)D. However, in bitches with serum levels below 26.2 ng/mL the risk of mortality increased more than five fold and the survival curve was significantly lower. It is not yet possible to determine which serum levels of 25(OH)D are considered suitable in dogs, but vitamin D deficiency may be a risk factor for breast cancer in bitches and may be associated with decreased survival. Keywords: Vitamin D, dog, diet, reference value, breast tumor, mortality, survival

Orientador : Prof. Dr. Fabiano Montiani-Ferreira / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias. Defesa: Curitiba, 31/03/2017 / Inclui referências ao final de cada capítulo / Resumo:Os estudos, investigações e publicações sobre as alterações clínicas e histopatológicas das doenças que afetam as pálpebras de cães são muito escassos. Isso provavelmente se deve ao fato de as pálpebras serem estruturas que pertencem à área de atuação comum a duas especialidades médicas: a dermatologia e a oftalmologia, não se encaixando completamente em nenhuma delas. Tanto os dermatologistas não se sentem confortáveis em tratar de uma área que pertence ao olho; quanto os oftalmologistas, hesitam em abordar uma região tão ligada à dermatologia. Certamente o diagnóstico e consequente tratamento exitoso das afecções palpebrais exige conhecimentos sólidos de cada umas dessas especialidades. Assim sendo, estudos mais aprofundados e específicos das alterações patológicas palpebrais e que incluam conhecimentos e experiências das duas especialidades têm grande relevância no desenvolvimento da clínica veterinária de pequenos animais. Além disso, é importante que aqueles responsáveis pelo diagnóstico histopatológicos das alterações palpebrais, os patologistas, sejam apresentados a essa área de intersecção de especialidades e, uma vez habituados e conhecedores dela, tornem-se aliados dos oftalmologistas e dermatologistas no diagnóstico das afecções palpebrais. A presente tese de doutorado está dividida em dois capítulos. O primeiro capítulo trata-se de um estudo retrospectivo de 290 casos de adenomas e epiteliomas da glândula tarsal em cães. Nele determina-se a frequência destas neoplasias palpebrais em dois laboratórios de Patologia Veterinária que recebem amostras de todo o Brasil. Além disso, discutem-se os aspectos histopatológicos dessas duas neoplasias e propõe-se uma nova forma de diferenciação entre elas. Este estudo deu origem a um artigo publicado no periódico Brazilian Journal of Veterinary Pathology. O segundo capítulo avalia os achados histopatológicos e imuno-histoquímicos das lesões despigmentantes das pálpebras de cães. O estudo sugere que a despigmentação palpebral acompanhada do padrão histopatológico de dermatite de interface é uma manifestação localizada do lúpus eritematoso discoide. Além disso, o demonstra que o lúpus eritematoso discoide localizado pode ser restrito às pálpebras de cães e propõe o termo blefarite lupoide para essa manifestação. O estudo também avaliou a expressão da proteína p53 nas pálpebras despigmentadas com dermatite de interface. A correlação entre a expressão da proteína p53 com a presença de dermatite de interface em pálpebras despigmentadas pode ajudar no entendimento dos mecanismos das dermatopatias que levam à despigmentação, resultando em diagnósticos e prognósticos mais precisos. Esse artigo será publicado em periódico direcionado a clínicos veterinários dermatologistas ou oftalmologistas. Palavras-chave: pálpebra, adenoma, epitelioma, dermatite de interface, blefarite lupoide, p53. / Abstract: Studies, investigations and publications about clinical and histopathological alterations of diseases affecting the eyelids in dogs are very scarce. This is probably because the eyelids are structures belonging to an area common to two medical fields: dermatology and ophthalmology, and do not totally fit into neither. Dermatologists usually do not feel confident to treat an area belonging to the eye; and ophthalmologists hesitate to approach an area so connected to dermatology. Certainly, the diagnosis and consequent successful treatment of palpebral conditions demand solid knowledge from each of these specialties. Therefore, it is clear the need of deeper and more specific studies of palpebral diseases including knowledge and experience from both specialties. Besides, it is important that the pathologists themselves should be more familiar with this intersection area of specialties and make the connection between ophthalmologists and dermatologists in the diagnosis of eyelid diseases. The present doctorate thesis was divided into two chapters. The first one is about a retrospective study of 290 cases of adenomas and epitheliomas of the tarsal gland in dogs. In this chapter, the frequency of these eyelid neoplasias was determined in two Veterinary Pathology laboratories that receive samples from all over Brazil. Besides, the histopathological aspects of both neoplasias have been discussed and a new form of differentiation between them has been proposed. This study gave origin to an article published in the Brazilian Journal of Veterinary Pathology. The second chapter evaluates the histopathological and immunohistochemical findings on the depigmenting lesions in eyelids of dogs. The study suggests that depigmented eyelids with interface dermatitis are, in fact, a clinical manifestation of localized discoid lupus erythematosus. Besides, the study demonstrates that localized discoid lupus erythematosus can be restricted to the eyelids of dogs and proposes the term lupoid blepharitis for those cases. The expression of p53 protein in depigmented eyelids with interface dermatitis also was investigated. The results of this study may help to better understanding of the mechanisms behind the disorders that lead to depigmentation, resulting in more precise diagnosis and prognosis. The manuscript will be published in a periodical with the focus directed to veterinary clinicians specialized in dermatology or ophthalmology. Keywords: eyelids, adenoma, epithelioma, interface dermatitis, lupoid blepharitis, p53.