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Aplicação de células recombinantes da levedura Kluyveromyces marxianus em soro de queijoSOUZA JÚNIOR, Cláudio Galvão de January 2004 (has links)
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Previous issue date: 2004 / A levedura Kluyveromyces marxianus Hansen tem sido apontada como
sistema biológico para estudos genéticos e biotecnológicos baseado nas suas
vantagens fisiológicas e bioquímicas. Contudo, a ausência de plasmídios
naturais e o pouco conhecimento sobre sua genética e comportamento têm sido
os principais entraves para estudos mais aplicados. Sua capacidade de utilizar
lactose como fonte de carbono possibilita o uso do soro de queijo, atualmente
um importante poluente da indústria de laticínios, como matéria-prima para
outros processos industriais. Buscou-se, portanto, construir vetores plasmidiais
eficientes e compatíveis com a levedura K. marxianus para avaliar a
capacidade de linhagens recombinantes utilizarem o soro de queijo como meio
de crescimento de baixo custo no processo de expressão de genes de interesse
industrial, tais como enzimas extracelulares ou peptídeos antimicrobianos. Este
trabalho permitiu verificar que: um método simples e rápido de transformação
mediado por acetato de lítio permitiu um aumento da eficiência de
transformação de células de K. marxianus em 2,5 vezes em relação ao método
convencional; o crescimento de células de leveduras recombinantes
transformadas com pDblet ou seus derivados não foi afetado pela alta
concentração de lactose no soro de queijo, apresentando perfil de crescimento
similar ao de células parentais. Esses dados sugerem a possibilidade do uso de
linhagens recombinantes de Kluyveromyces marxianus portadoras de
plasmídios baseados no pDblet para processos biotecnológicos a partir do soro
de queijo advindo das indústrias de laticínios
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