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Analyse fonctionnelle des gènes WOX les plus conservés chez Arabidopsis thaliana / Fonctional analysis of the most conserved WOX genes in Arabidopsis thaliana.

Denis, Erwan 04 April 2012 (has links)
Chez les plantes supérieures, l’organogénèse est principalement post-embryonnaire et assurée par les méristèmes. Les familles de gènes CLE (CLAVATA3/ENDOSPERMSURROUNDING REGION related) et WOX (WUSCHEL-LIKE HOMEOBOX) sont des régulateurs majeurs de l’activité des méristèmes. Des analyses phylogénétiques des gènes WOX de différentes espèces ont identifié trois groupes d’orthologie, dont le groupe WOX13OG. Ce dernier contient le seul gène WOX d’Ostreococcus tauri, les trois gènes WOX de Physcomitrella patens, ainsi que trois des gènes WOX parmi les quinze que compte Arabidopsis thaliana. L’objectif de ma thèse a été de caractériser la fonction des gènes du groupe WOX13 OG chez A. thaliana.Parmi les mutants nuls identifiés pour ces gènes, seul le mutant wox14 présente des phénotypes forts, à savoir un retard de transition florale et des défauts de développement vasculaire. Ces résultats sont en accord avec l’induction de l’expression de WOX14 à la jonction des faisceaux vasculaires lors de la transition florale. Les résultats indiquent que WOX14 est impliqué dans le contrôle du nombre de faisceaux vasculaires initiés lors de cette dernière. La restauration conjointe de la transition florale et du nombre de faisceaux vasculaires, par complémentation du mutant wox14 ou application de gibbérellines (GA),suggère un lien direct entre ces deux processus. Cette étude nous a permis d’identifier le gène CLE46 comme étant dérégulé dans le mutant wox14. Son expression dans les cellules du xylème, associée à l’augmentation du nombre de faisceaux vasculaires chez wox14, suggèrent que CLE46 est un élément d’une voie de signalisation de contrôle du nombre de faisceaux vasculaires. L’importance des interactions WOX-CLE dans le développement vasculaire est soulignée par l’induction de WOX4 et WOX14 par le peptide CLE41. Les analyses du transcriptome du mutant wox14 révèlent que la signalisation des GA est déficiente. Ce qui confirme les résultats de la complémentation du phénotype wox14 par les GA. De plus, le gène GA3ox1 a été identifié comme une cible potentielle de régulation de la biosynthèse de GA par le gène WOX14. / Whilst primary meristems are initiated during embryogenesis, in higher plants additionalsecondary meristems initiate post-embryonically and contribute to the plant architecture andthe vascular strand development. Differentiation of the plant vascular cambium into xylemand phloem was shown to be regulated by cell to cell communication. The large CLE(CLAVATA3/ENDOSPERM SURROUNDING REGION related) signaling peptide familyand the WOX (WUSCHEL-LIKE HOMEOBOX) transcription factor family are thought to beconserved regulators of stem cell fate. In this thesis we report the presence of supernumeraryvascular bundles in the young inflorescence stem of the wox14 mutant. Our data indicate thatWOX14 prevents additional cambium cell to differentiate into vascular bundles during floraltransition. Moreover, the data suggest that vascular differentiation and floral transition arelinked. Consistently, WOX14 expression is induced within the connecting vascular strandduring floral transition. Furthermore, the application of gibberellins (GA) fully rescued boththe floral transition and the vascular bundle phenotype of the wox14 mutants. A detail analysisof GA biosynthesis and target genes showed that WOX14 controls the amount of bioactiveGA within the vasculature. However, WOX14 is also specifically expressed in the phloem ofthe inflorescence stem indicating a function in late vascular bundle development. We alsoshowed that not only WOX4 but also WOX14 are the target of the CLE41 peptide duringvascular development. Furthermore, the data indicate that another CLE gene, namely CLE46,is misregulated in the wox14 mutant. These results suggest that CLE46 might be the firstidentified CLE signal from the xylem that impacts vascular differentiation.
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Investigating the Molecular Framesworks of Phloem-Cap Fiber Development in Cotton (Gossypium hirsutum)

Kaur, Harmanpreet 12 1900 (has links)
The current study focuses on the vascular cambium and the reiterative formation of phloem fiber bundles in cotton stems. The role of the TDIF-PXY-WOX pathway was examined in regulating cambial activity and the differentiation of phloem fibers. A study was conducted to identify and characterize the cotton WOX family genes, focusing on WOX4 and WOX14, aiming to identify and analyze their phylogenetic relationships, tissue-specific expression profiles, functional roles, and metabolic consequences. Through a sequence analysis of the Gossypium hirsutum genome, 42 cotton loci were identified as WOX family members. GhWOX4 exhibited a close homology to 7 loci, while GhWOX14 displayed homology with 8 loci. Tissue-specific expression analysis revealed prominent expression patterns of GhWOX4 and GhWOX14 in cotton internodes and roots, suggesting their involvement in vascular tissue development. Functional studies utilizing VIGS (virus-induced gene silencing) demonstrated that the knockdown of GhWOX4 and GhWOX14 resulted in a significant reduction in stem diameter and bast fiber production. This result suggests that secondary phloem fiber development is regulated by GhWOX4 and GhWOX14 genes in cotton. Additionally, the metabolic profiling of VIGS plants revealed significant alterations in amino acids, organic acids, and sugars, with implications for primary metabolic pathways. These findings suggest that GhWOX4 and GhWOX14 play pivotal roles in cotton plant development, including vascular tissue growth and phloem fiber production, and metabolic regulation.

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