El carcinoma medul•lar de tiroide (CMT) és un tumor maligne, poc freqüent, que mostra diferenciació de cèl•lules C. La meitat dels carcinomes esporàdics no porten mutacions de RET. Sprouty(Spry) és antagonista de RET. En el diagnòstic diferencial destaca el paraganglioma tiroïdal (PT). Les alteracions en diversos gens involucrats en CMT, juguen un paper important en la progressió tumoral i en el diagnòstic diferencial. Els tres estudis de la tesi, relacionats amb el CMT, s’han realitzat mitjançant immunohistoquímica i tissue-arrays. En el primer, les proteïnes NF-kB estan activades freqüentment en el CMT, així com, els gens diana FLIP y BcL-xL. En el segon, un grup de ratolins, amb delecció selectiva de Spry1, van desenvolupar hiperplasia de cèl•lules C en els animals adults joves. En el tercer, es proposa una bateria immunohistoquímica de set proteïnes, preceptiva pel diagnòstic diferencial del CMT i els paragangliomes de cap i coll, comprovant la seva valides en quatre exemples de PT / El carcinoma medular de tiroides (CMT) es un tumor maligno, poco frecuente, que muestra diferenciación de células C. La mitad de los carcinomas esporádicos no muestra mutaciones de RET. Sprouty(Spry) es antagonista de RET. En el diagnóstico diferencial destaca el paraganglioma tiroideo (PT). Las alteraciones en diversos genes involucrados en CMT, juegan un papel importante en la progresión tumoral y en el diagnóstico diferencial. Los tres estudios presentados , relacionados con el CMT, se han realizado mediante inmunohistoquímica y tissue-arrays. En el primero, las proteínas NF-kB están activas frecuentemente, en el CMT ,así como, los genes diana FLIP y BcL-xL.El segundo muestra que un grupo de ratones, con delección selectiva de Spry1,desarrolló hiperplasia de células C en los animales adultos jóvenes. En el tercero, se propone una batería inmunohistoquímica de siete proteínas, preceptiva para el diagnóstico diferencial del CMT y los paragangliomas de cabeza y cuello, comprobando su fiabilidad en 4 ejemplos de PT. / Medullary Thyroid Carcinoma (MTC) is a relatively rare malignant tumour with C-cell differentiation. 50% of sporadic MTC cases do not exhibit RET mutations. Sprouty is a RET antagonist. Thyroid Paraganglioma (TP) is one of the tumours associated with differential diagnosis. Alterations to several of the genes involved in MTC play an important role in tumoural progression and differential diagnosis. Three MTC-related studies using immunohistochemistry and tissue-arrays were conducted. One of these showed that NF-kB proteins are frequently active in MTC, as are the target genes FLIP and BcL-xL. In a second, a group of young adult mice with selectively deleted spry1 developed C-cell hyperplasia. Following the third, we propose the mandatory use of an immunohistochemical battery of 7 proteins for differential diagnosis between MTC and neck and head paragangliomas, conducting reliability tests to check their reliability on 4 TP cases

Las metástasis ganglionares son un factor pronóstico clave en cáncer colorrectal, asociándose a una mayor recurrencia loco-regional así como una menor supervivencia a los 5 años. Entre los factores predictivos de respuesta se encuentran el estado mutacional de K-Ras (que selecciona los pacientes susceptibles de recibir tratamiento biológico adyuvante) y, en tumores de recto operados, la calidad resección del mesorrecto, la afectación del margen circunferencial y el grado de regresión en los casos tratados, variables que se relacionarán con recidivas y supervivencia. En 100 pacientes con cáncer de colon en estadio I-II hemos comprobado que el método OSNA (One-step Nucleic Acid Amplification) consigue un índice de supraestadificación del 25% de los casos, siendo un método fiable y reproducible, habiéndose diseñado un protocolo de identificación de ganglios centinela “ex vivo” con una alta especificidad. En 200 pacientes con cáncer colo-rectal metastático hemos constatado que las mutaciones 12Ser y 12Cys de K-Ras se asocian a una mayor mortalidad y que los tumores de alto grado o con una variedad histológica diferente al adenocarcinoma convencional ofrecen una peor supervivencia. En 200 piezas quirúrgicas de cáncer de recto, hay una asociación directa entre la calidad de resección de mesorrecto y la progresión de la enfermedad, así como la mortalidad de estos pacientes. / Les metàstasis ganglionars són un factor pronòstic clau en càncer colo-rrectal, associant-se a una major recurrència loco-regional i a una pitjor supervivència als 5 anys. Entre els factors predictius de resposta es troben l’estat mutacional de K-Ras (que selecciona els pacients susceptibles de rebre tractament biològic adjuvant) i, en tumors de recte operats, la qualitat de resecció del mesorrecte, l’afectació del marge circumferencial i el grau de regresió en els casos tractats, variables que es relacionaran amb recidives i supervivència. En 100 pacients amb càncer de colon en estadi I-II hem comprovat que el mètode OSNA (Onestep Nucleic Acid Amplification) aconsegueix un índex de supraestadificació del 25% dels casos, essent un mètode fiable i reproduïble, havent-ne dissenyat un protocol d’identificació de ganglis sentinella “ex vivo” amb una alta especificitat. En 200 pacients amb càncer colo-rectal metastàsic hem constatat que les mutacions 12Ser i 12Cys de K-Ras s’associen a una major mortalitat i que els tumors d’alt grau o amb una varietat histològica diferent al adenocarcinoma convencional presenten una pitjor supervivència. En 200 peces quirúrgiques de càncer de recte, hi ha una associació directa entre la qualitat de resecció del mesorrecte i la progressió de la malaltia, així com la mortalitat d’aquests pacients. / Lymph node metastasis is a key prognosis factor in colorectal carcinoma. It associates to local recurrence and to a low rate of survival in the first 5 years of follow-up. Among the predictive factors of tumor response are the K-Ras mutation, which if is it negative allows this patient to be treated with targeted antibodies, and, in rectal cancer, the quality of the mesorectal excision surgery, the involved circumferential margin and the tumor regression if is treated. These factors are related to recurrence and survival. In 100 colon cancer patients in stage I or II, the OSNA method (One-step Nucleic Acid Amplification) upstaged 25% of cases to stage III. OSNA is a feasible method and we have got an “ex vivo” protocol for identifying sentinel lymph nodes with a high rate of specificity. In 200 patients with metastatic colon cancer 12Ser and 12Cys mutations associate to higher level of mortality and either high grade tumors or variants of tumors other than conventional adenocarcinoma associate to poor survival rate. In 200 rectal cancer specimens there is an strong association between the quality of the mesorectal excision and cancer progression, and also with the survival rate.

Tumor residual macroscòpic persisteix després de la quimioteràpia neoadjuvant (QTN) ( 70% de pacients) tenen un risc de metàstasis del 35% (3 anys). Hem trobat una signatura predictiva de bona resposta de QTN (coeficient de determinació 55,6%; Odds-ratio 26,6; p=0,00004). Els tumores receptors hormonals (RH) negatius presenten Ciclina D1, Aldehíd deshidrogenasa-1, HER4, p-HER3 i p-AKt com a marcadors predictius de bona resposta a QTN. Els RH positius presenten Bcl-2 com a marcador de resistència. Els RH negatius presenten major expressió de p-AKt, EGFR1, HER2 i p-HER3 i menor expressió de p27 i Bcl-2 que els RH positius. Els tumors Triples negatius presenten menor expressió de 53BP1 i major expressió Captesina L nuclear. La majòria dels Triples Negatius són BRCA1 deficients i susceptibles a inhibidors de PARP. Els tumors BRCA1 deficients, poden restablir la recombinació homòloga i ser resistents al tratament, quan 53BP1 és degradada per Catepsina L nuclear, davant baixos nivells del receptor de la vitamina D. / Tumor residual macroscópico tras quimioterapia neoadyuvante (QTN) ( 70% de pacientes) tiene riesgo de metástasis del 35% (3 años). Hemos encontrado una firma predictiva de buena respuesta de QTN (coeficiente de determinación 55,6%, Odds-ratio 26,6; p=0,00004). Los tumores receptores hormonales (RH) negativos presentan Ciclina D1, Aldehído deshidrogenasa-1, HER4, p-HER3 y p-AKt como marcadores predictivos de buena respuesta a QTN. Los RH positivos presentan Bcl-2 como un marcador de resistencia. Los RH negativos presentan mayor expresión de p-AKt, EGFR1, HER2 y p-HER3 y menor expresión de p27 y Bcl-2 que lo RH positivos. Los tumores Triples Negativos presentan la menor expresión de 53BP1 y la mayor expresión Captesina L nuclear. La mayoría de los TNBC son BRCA1 deficientes y susceptibles a inhibidores de PARP. Los tumores BRCA1 deficientes, pueden restablecer la recombinación homóloga y ser resistentes al tratamiento, cuando 53BP1 es degradado por Catepsina L nuclear ante bajos níveles del receptor de la vitamina D. / Large (>1 cm) residual tumours are present after neoadjuvant chemotherapy (NCT) (70% from patients) will relapse 35% of patients (3 years). We have found a predictive signature of good response to NCT (determination coefficient 55.6%; Odds-ratio 26.6; p=0.00004). In tumors lacking hormone receptor (HR), CyclinD1, Aldehyde dehydrogenase isoform 1, HER4, p-HER3 and p-AKt are markers of good response. In tumors expressing HR, Bcl-2 is a marker of resistance. Tumors lacking HR expression have an increase of p-AKt, EGFR1, HER2 and p-HER3 and a decrease of p27 and Bcl-2 compared in HR positive tumors. TNBC tumors express the highest nuclear Cathepsin L causing the lowest 53BP1. The majority of TNBC are BRCA1 deficient and likely to receive treatment with PARP inhibitors. In tumors without BRCA1 and with 53BP1 out of the way due to high nuclear CTSL, the cells are able to resume homologous recombination and become resistant to treatment. The activity of nuclear Cathepsin L is blocked by high levels of vitamin D receptor.

El propòsit del nostre treball és valorar morfomètricament les diferències existents entre la Neoplàsia Intraepitelial Cervical (CIN) grau 2 i 3, així com el tipus de Virus del Papil·loma Humà (VPH) present, estudiat mitjançant Hibridació in situ.Hem estudiat 66 peces quirúrgiques d'exèresi del coll uterí de pacients amb diagnòstic histològic de CIN 2 i 82 de CIN 3. Hem demostrat amb el nostre estudi que la superfície afectada en el coll cervical per CIN 3 és significativament més gran que la de CIN 2, a la vegada que són lesions longitudinalment majors, amb major afectació glandular, major profunditat en l'afectació glandular i major índex mitòtic. També hem pogut demostrar que VPH 16/18 predomina en CIN 3. No hem trobat diferències significatives en quant a la presència de papil·les vasculars en ambdues lesions i tampoc hem trobat relació entre tipus de VPH i àrea afectada per CIN, així com entre tipus de VPH i edat de la pacient. / El propósito de nuestro trabajo es valorar morfométricamente las diferencias existentes entre la Neoplasia Intraepitelial Cervical (CIN) grado 2 y 3, así como el tipo de Virus del Papiloma Humano (VPH) presente, estudiado mediante Hibridación in Situ. Hemos estudiado 66 piezas quirúrgicas de exéresis del cuello cervical de pacientes con diagnóstico histológico de CIN 2 y 82 de CIN 3. Hemos demostrado con nuestro estudio que la superficie afectada en el cuello cervical por CIN 3 es significativamente mayor que la de CIN 2, a la vez que son lesiones longitudinalmente mayores, con mayor afectación glandular, mayor profundidad en la afectación glandular y mayor índice mitótico. También hemos podido demostrar que VPH 16/18 predomina en CIN 3. No hemos encontrado diferencias significativas en cuanto a la presencia de papilas vasculares en las dos lesiones y tampoco hemos encontrado relación entre tipo de VPH y área afectada por CIN, así como entre tipo de VPH y edad de la paciente.

Para la mayoría de tratamientos dentales, es efectiva la utilización de técnicas anestésicas de tipo infiltrativo, consiguiendo el bloqueo efectivo del estímulo doloroso en todos los dientes de la arcada superior y del grupo incisivo, canino y premolar de la arcada inferior. Sin embargo, en la zona posterior de la mandíbula, donde se presenta una cortical más gruesa y, además, el nervio alveolar inferior discurre incluido en el grosor del cuerpo de la mandíbula, la técnica anestésica infiltrativa resulta controvertida. En estos casos, el bloqueo del Nervio Alveolar Inferior de tipo troncular se convierte en una maniobra aconsejable para una correcta praxis odontológica. La técnica anestésica convencional se basa en la localización “probable” de la língula a partir de una serie de referencias intra y extraorales para poder ubicar, así, la zona perilocal al foramen mandibular –la más próxima a la entrada del nervio alveolar inferior al canal mandibular- donde se depositará la solución anestésica. Sin embargo, dada la variabilidad individual del foramen mandibular, a pesar de las referencias empleadas para localizar la zona de inoculación de la solución anestésica, el bloqueo puede fracasar o retardarse. Por ello, es importante disponer de métodos y técnicas que nos permitan determinar la ubicación del agujero mandibular de una forma “individualizada” y este ha sido el objetivo principal de nuestro estudio