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Isolamento, identificação e suscetibilidade in vitro de fungos causadores de onicomicose / Isolation, identification and in vitro susceptibility of fungi that cause onychomycosisATAÍDES, Fábio Silvestre 24 February 2010 (has links)
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Previous issue date: 2010-02-24 / Onychomycosis is the nail infection caused by a wide spectrum of fungi species, including
yeasts, dermatophyte and filamentous fungi nondermatophytes (FFND). In this work, patients
with lesions nails from Dermatology Department in Clinics Hospital of the Federal University
of Goiás were studied. These patients were submitted to mycologic tests and the etiologic
agents identified were evaluated on in vitro activity for systemic antifungal agents. During the
period of March 2008 to March 2009, 114 patients clinically suspected of having
onychomycosis were examinated. The nail samples collected were submitted to direct
examination with potassium hydroxide 20% and grown in dextrose Sabouraud agar and
specific fungal pathogens agar. The antifungal susceptibility test was performed according to
the method of broth microdilution, recommended by the Clinical Laboratory Standards
Institute (CLSI), through M38-A and M27-A2 documents. The onychomycosis diagnosis was
established in 83.3% (95/114) patients, of which most were women between 40 to 59 years
old. The isolated fungi were identified as yeasts in 54.6%; dermatophytes in 28.7%; and
filamentous fungi nondermatophytes in 16.7%. Among yeasts, Candida parapsilosis was the
most common etiologic agent (52.5%); among dermatophytes, Trichophyton rubrum was the
most found (74.2), and among the filamentous fungi nondermatophytes, Fusarium spp was
the most isolated genus (44.4%). Both distal and lateral subungual lesions were predominant
in cases of onychomycosis by all the agents identified, showing that there was no correlation
with the clinical presentation and etiology. Although most of the isolates have showed
susceptible to several antifungal agents studied, five Candida spp strains were resistant; one
to voriconazole, one species to itraconazole and three to amphotericin B. The in vitro
susceptibility testing profile for dermatophytes was similar for each antifungal agent
analyzed. The minimal inhibitory concentration (MIC) of itraconazole, ketoconazole and
griseofulvin for 50% of isolates were lower than 1 μg/mL, and terbinafine was extremely low,
with concentration 0.015 μg/mL for 90% of isolates. The MIC for itraconazole in 90%
isolates of FFND was 16 g/mL, while for amphotericin B and voriconazole was 8 g/mL. In
summary, this study showed a higher frequency of onychomycosis in women. Candida spp
and dermatophytes with FFND emergence, especially of the genus Fusarium, were the main
fungi involved. Besides, the presence of resistant fungi to some antifungal agents showed the
need of using susceptibility tests for these fungi. / Onicomicose é a infecção da unha causada por amplo espectro de espécies fúngicas, incluindo
leveduras, dermatófitos e fungos filamentosos não dermatofíticos (FFND). Neste trabalho,
foram estudados pacientes com lesões de unhas atendidos no Departamento de Dermatologia,
Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Goiás, os quais foram submetidos a exames
micológicos. Os agentes etiológicos identificados foram avaliados em testes de atividade in
vitro para agentes antifúngicos sistêmicos. Durante o período de março de 2008 a março de
2009, foram examinados 114 pacientes com suspeita clínica de onicomicose. As amostras de
unhas coletadas foram submetidas ao exame direto com hidróxido de potássio 20% e
cultivadas em ágar Sabouraud dextrose e ágar específico para fungos patogênicos. O teste de
suscetibilidade antifúngico foi realizado de acordo com o método de microdiluição em caldo,
preconizado pelo Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI), através dos documentos
M38-A e M27-A2. O diagnóstico de onicomicose foi estabelecido em 83,3% (95/114) dos
pacientes, dos quais a maioria era constituída por indivíduos do gênero feminino e com idade
entre 40-59 anos. Os fungos isolados foram identificados como leveduras em 54,6%,
dermatófitos em 28,7%, e FFND em 16,7%. Entre as leveduras, Candida parapsilosis
(52,5%) foi o agente etiológico mais comum; entre os dermatófitos, Trichophyton rubrum foi
o mais encontrado (74,2%) e, entre os FFND, Fusarium spp foi o gênero mais frequentemente
isolado (44,4%). Lesões subungueal distal e lateral foram predominantes nos casos de
onicomicose por todos os agentes identificados, mostrando que não havia correlação com a
clínica e a etiologia. Embora a maioria dos isolados tenha se mostrado suscetível aos
diferentes antifúngicos estudados, cinco isolados de Candida foram resistentes; um ao
voriconazol, um ao itraconazol e três a anfotericina B. O perfil de suscetibilidade in vitro para
dermatófitos foi semelhante para cada antifúngico analisado. A concentração inibitória
mínima (CIM) de itraconazol, cetoconazol e griseofulvina para 50% dos isolados foram
menores do que 1 μg/mL, e para terbinafina foi extremamente baixa, com concentração 0,015
μg/mL para 90% dos isolados. A CIM para o itraconazol foi de 16 μg/mL em 90% dos
isolados de FFND, e para anfotericina B e voriconazol obteve-se uma concentração de 8
μg/mL. Em resumo, este estudo demonstrou uma maior frequência de onicomicose em
mulheres, sendo que os principais fungos envolvidos nesta infecção foram Candida spp e
dermatófitos, com emergência de FFND, em especial do gênero Fusarium. Além disso, em
decorrência da resistência observada a alguns antifúngicos, demonstrou-se a necessidade do
uso dos testes de suscetibilidade para estes fungos.
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