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Isolamento, identificação e suscetibilidade in vitro de fungos causadores de onicomicose / Isolation, identification and in vitro susceptibility of fungi that cause onychomycosis

ATAÍDES, Fábio Silvestre 24 February 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2014-07-29T15:30:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fabio Silvestre.pdf: 2956413 bytes, checksum: 836474631eb4bcc7cdf144ad6ffb8efb (MD5) Previous issue date: 2010-02-24 / Onychomycosis is the nail infection caused by a wide spectrum of fungi species, including yeasts, dermatophyte and filamentous fungi nondermatophytes (FFND). In this work, patients with lesions nails from Dermatology Department in Clinics Hospital of the Federal University of Goiás were studied. These patients were submitted to mycologic tests and the etiologic agents identified were evaluated on in vitro activity for systemic antifungal agents. During the period of March 2008 to March 2009, 114 patients clinically suspected of having onychomycosis were examinated. The nail samples collected were submitted to direct examination with potassium hydroxide 20% and grown in dextrose Sabouraud agar and specific fungal pathogens agar. The antifungal susceptibility test was performed according to the method of broth microdilution, recommended by the Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI), through M38-A and M27-A2 documents. The onychomycosis diagnosis was established in 83.3% (95/114) patients, of which most were women between 40 to 59 years old. The isolated fungi were identified as yeasts in 54.6%; dermatophytes in 28.7%; and filamentous fungi nondermatophytes in 16.7%. Among yeasts, Candida parapsilosis was the most common etiologic agent (52.5%); among dermatophytes, Trichophyton rubrum was the most found (74.2), and among the filamentous fungi nondermatophytes, Fusarium spp was the most isolated genus (44.4%). Both distal and lateral subungual lesions were predominant in cases of onychomycosis by all the agents identified, showing that there was no correlation with the clinical presentation and etiology. Although most of the isolates have showed susceptible to several antifungal agents studied, five Candida spp strains were resistant; one to voriconazole, one species to itraconazole and three to amphotericin B. The in vitro susceptibility testing profile for dermatophytes was similar for each antifungal agent analyzed. The minimal inhibitory concentration (MIC) of itraconazole, ketoconazole and griseofulvin for 50% of isolates were lower than 1 μg/mL, and terbinafine was extremely low, with concentration 0.015 μg/mL for 90% of isolates. The MIC for itraconazole in 90% isolates of FFND was 16 g/mL, while for amphotericin B and voriconazole was 8 g/mL. In summary, this study showed a higher frequency of onychomycosis in women. Candida spp and dermatophytes with FFND emergence, especially of the genus Fusarium, were the main fungi involved. Besides, the presence of resistant fungi to some antifungal agents showed the need of using susceptibility tests for these fungi. / Onicomicose é a infecção da unha causada por amplo espectro de espécies fúngicas, incluindo leveduras, dermatófitos e fungos filamentosos não dermatofíticos (FFND). Neste trabalho, foram estudados pacientes com lesões de unhas atendidos no Departamento de Dermatologia, Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Goiás, os quais foram submetidos a exames micológicos. Os agentes etiológicos identificados foram avaliados em testes de atividade in vitro para agentes antifúngicos sistêmicos. Durante o período de março de 2008 a março de 2009, foram examinados 114 pacientes com suspeita clínica de onicomicose. As amostras de unhas coletadas foram submetidas ao exame direto com hidróxido de potássio 20% e cultivadas em ágar Sabouraud dextrose e ágar específico para fungos patogênicos. O teste de suscetibilidade antifúngico foi realizado de acordo com o método de microdiluição em caldo, preconizado pelo Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI), através dos documentos M38-A e M27-A2. O diagnóstico de onicomicose foi estabelecido em 83,3% (95/114) dos pacientes, dos quais a maioria era constituída por indivíduos do gênero feminino e com idade entre 40-59 anos. Os fungos isolados foram identificados como leveduras em 54,6%, dermatófitos em 28,7%, e FFND em 16,7%. Entre as leveduras, Candida parapsilosis (52,5%) foi o agente etiológico mais comum; entre os dermatófitos, Trichophyton rubrum foi o mais encontrado (74,2%) e, entre os FFND, Fusarium spp foi o gênero mais frequentemente isolado (44,4%). Lesões subungueal distal e lateral foram predominantes nos casos de onicomicose por todos os agentes identificados, mostrando que não havia correlação com a clínica e a etiologia. Embora a maioria dos isolados tenha se mostrado suscetível aos diferentes antifúngicos estudados, cinco isolados de Candida foram resistentes; um ao voriconazol, um ao itraconazol e três a anfotericina B. O perfil de suscetibilidade in vitro para dermatófitos foi semelhante para cada antifúngico analisado. A concentração inibitória mínima (CIM) de itraconazol, cetoconazol e griseofulvina para 50% dos isolados foram menores do que 1 μg/mL, e para terbinafina foi extremamente baixa, com concentração 0,015 μg/mL para 90% dos isolados. A CIM para o itraconazol foi de 16 μg/mL em 90% dos isolados de FFND, e para anfotericina B e voriconazol obteve-se uma concentração de 8 μg/mL. Em resumo, este estudo demonstrou uma maior frequência de onicomicose em mulheres, sendo que os principais fungos envolvidos nesta infecção foram Candida spp e dermatófitos, com emergência de FFND, em especial do gênero Fusarium. Além disso, em decorrência da resistência observada a alguns antifúngicos, demonstrou-se a necessidade do uso dos testes de suscetibilidade para estes fungos.

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