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Caracteriza??o dos marcadores qu?micos e avalia??o de atividades biol?gicas do extrato de Spondias mombin (ANACARDIACEAE)Cabral, Barbara 11 March 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-03-11 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Spondias mombin is a fruitful species dispersed in tropical regions of America, Africa
and Asia. In Brazil, the species can be found mainly in the northern and northeastern
regions. Scarce chemical and pharmacological studies have been reported for S.
mombin and until this moment studies about chemical markers were not developed.
In this context, the aims of this study were to characterize the chemical markers from
S. mombin leaves and evaluate their anti-inflammatory, antioxidant and
antiproliferative potentials. The chemical profile of the hydroethanolic extract from S.
mombin leaves analyzed by HPLC-DAD, through a validated method, allowed the
identification and quantification of ellagic acid and chlorogenic acid. This extract
showed anti-inflammatory potential in acute peritonitis model induced by
carrageenan. The hydroethanolic extract from S. mombin leaves was subjected to a
liquid-liquid partition with the solvents: n-hexane, dichloromethane, ethyl acetate and
n-butanol. Regarding the anti-inflammatory potential of the fractions obtained they
were active; however, ethyl acetate fraction at 200 mg/kg showed highlighted results.
The compounds ellagic acid and chlorogenic acid also inhibited the leukocyte
migration to the site of inflammation at 2.5, 5 and 10 mg/kg. The hydroethanolic
extract, fractions and the chemical markers showed significant antioxidant potential
when evaluated in different assays: DPPH Free-Radical Scavenging, Superoxide
Radical Scavenging, Hydroxyl Radicals Scavenging and Reducing Power. Taken
together our results showed that hydroethanolic extract of S. mombin leaves has
ellagic acid and chlorogenic acid as bioactive markers and it demonstrated antiinflammatory
and antioxidant properties besides no cytotoxicity against 3T3 cells. It
enables us to suggest S. mombin as an important species to develop herbal drugs / S. mombin ? uma esp?cie frut?fera que se encontra dispersa em regi?es tropicais da
Am?rica, ?frica e ?sia. No Brasil a esp?cie pode ser encontrada em v?rios estados
tendo maior preval?ncia nas regi?es norte e nordeste do pa?s. Foram descritos
poucos estudos qu?micos e farmacol?gicos para a esp?cie S. mombin e at? o
momento n?o foram analisados os marcadores qu?micos da esp?cie. Diante desse
contexto, este trabalho buscou caracterizar os marcadores qu?micos para as folhas e
frutos de S. mombin e avaliar a atividade anti-inflamat?ria, antioxidante,
antiproliferativa e antimicrobiana. O extrato das folhas (EHfl) secas e dos frutos
(EHfr) in natura foram preparados por macera??o em meio hidroalco?lico. Para a
caracteriza??o dos compostos ativos da esp?cie S. mombin, os extratos
hidroetan?licos foram submetidos ? parti??o l?quido-l?quido com solventes de
polaridade crescente n- hexano (Hex), diclorometano (Dcm), acetato de etila (AcOEt)
e n-butanol (ButOH). A avalia??o do perfil qu?mico das folhas por CCD e CLAE
mostrou que a esp?cie ? rica em compostos fen?licos. Na an?lise por CCD foi
observada a presen?a de quercetina, ?cido el?gico e canferol. A an?lise por CLAE
permitiu a identifica??o e a quantifica??o de ?cido el?gico e ?cido clorog?nico no
EHfl. A metodologia anal?tica foi validada segundo os par?metros estabelecidos pela
RDC 899/ 2003 e pela ICH. Na an?lise qualitativa por CLAE do EHfr foram
identificados o ?cido clorog?nico e a rutina. Os resultados da avalia??o da atividade
antiinflamat?ria mostraram que o EHfl das folhas, nas doses de 100, 200, 300 e 500
mg/kg, apresentou efeito de inibi??o da migra??o de leuc?citos no modelo de
peritonite aguda induzida por carragenina. Todas as fra??es foram ativas, no
entanto, a fra??o AcOEt na dose de 200 mg/kg apresentou melhor atividade em
rela??o ?s outras fra??es testadas.O EHfl e a fra??o AcOEt apresentaram
importante perfil de inibi??o bacteriana no teste de difus?o em disco, principalmente
frente ? bact?ria S. flexneri. O EHfl e as fra??es (Dcm, AcOEt, ButOH) das folhas
assim como o EHfr apresentaram importante atividade antioxidante nos ensaios de
DPPH, sequestro de radicais super?xidos, sequestro de radicais hidroxilas e poder
redutor. No que se refere ? avalia??o da citotoxicidade do EHfl, das respectivas
fra??es e do EHfr frente ? cultura de c?lulas de fibroblastos 3T3 n?o foi observada
citotoxidade significativa. Os resultados mostraram que o EHfl possui atividade
antiinflamat?ria, antioxidante e antimicrobiana. Verificou-se que o ?cido clorog?nico
e o ?cido el?gico podem ser usados como marcadores biativos das folhas de S.
mombin. O EHfr apresentou atividade antioxidante e foi observada a presen?a de
?cido clorog?nico e rutina. Al?m disso, n?o foi observada atividade citot?xica para o
EHfr e para o EHfl
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