Com o objetivo geral de elaborar e testar uma metodologia para comparar custos diretos unitários totais de análises bioquímicas quantitativas em processo manual e em processo automático no Laboratório de Análises Clínicas do Hospital Universitário da USP-LAC/HU e com os objetivos específicos de (a) aplicar a metodologia no LAC/HU, (b) avaliar se o auto-analisador era adequado à rotina, (c) qual o tempo teórico despendido por cada um dos processos - manual e automático - para realizar o total de análises requisitadas em 1989 e (d) proceder simulações do modelo de análises para situações hipotéticas a fim de verificar sua sensibilidade, foram estudados 7 tipos de análise - glicose, creatinina, uréia, sódio & potássio, ácido úrico, proteínas totais e cálcio. Adequou-se uma metodologia para avaliar o custo unitário direto total de cada um e conhecer qual processo apresentava os menores valores; os 7 tipos estudados foram submetidos a ambos no decorrer da pesquisa em 1989. Procurou-se, também, constatar se o equipamento utilizado no processo automático era adequado à rotina do HU e determinar o tempo teórico despendido por ambos os processos na execução de cada tipo de análise. O número estudado de análises foi determinado estatisticamente, o tempo de mão-de- obra gasto na execução das análises foi cronometrado, os dados referentes ao material de consumo, manutenção e depreciação foram obtidos nos respectivos processos de licitação e/ou aquisição. Para determinar os diversos custos unitários diretos totais foram selecionados os custos relevantes dos dois processos de execução e os resultados obtidos foram comparados. Verificou-se que os custos unitários diretos totais do processo manual foram menores que os do processo automático, exceto aqueles referentes à análise de sódio & potássio. Foi constatado, igualmente, pela comparação do tempo teórico despendido, se as análises dos 7 tipos fossem realizadas por ambos os processos, que o processo automático teria gasto um tempo menor que o processo manual na realização das duas etapas. Como os resultados encontrados divergiram dos esperados, pois a maioria dos custos unitários diretos totais do processo manual foi menor que os do processo automático, a pesquisa foi ampliada para serem acrescentadas 5 situações hipotéticas nas quais se admitiu, primeiramente, que dos 7 tipos de análises mencionados foram realizadas (a) 28.509 análises (número total das glicemias, o tipo mais requisitado) e (b) 47.894 análises (capacidade operacional do autoanalisador); a seguir admitiu-se que outros 4 tipos de análises-colesterol, bilirrubina, ferro e triglicérides, programados no auto-analisador e cujas análises não foram realizadas, o teriam sido nas seguintes quantidades: (a) o número real de análises executadas em 1989 das 11 análises e, também, os dois números das duas primeiras hipóteses, isto é, (b) 28.509 análises (número total das glicemias, o tipo mais requisitado) e (c) 47.894 análises (capacidade operacional do autoanalisador). Realizada a comparação do custo unitário direto total de cada um dos processos verificou-se que o processo automático, mesmo utilizando o auto-analisador em suas capacidades quantitativa e qualitativa totais, teria para a maioria das análises um custo unitário direto total maior que o do processo manual. / Seven types of biochemical analyses were studied (glucose, creatinine, urea, sodium & potassium, uric acid, total proteins and calcium), in orden to design and test a methodology aiming the comparison of total unitary direct cost of quantitative biochemical analyses between a manual process and an automatic one in the Clinical Analysis Laboratory (LAC) of Hospital Universitário from the University of São Paulo (HU). The specific objectives were a) to aply the methodology in the LAC, b) to determine wether the autoanalyzer was adequate for routine work, c) to measure the theorical time spent for each one of the processes - manual and automatic - to satisfy the demand of all the analyses accomplished during 1989, and d) to simulate a model of analyses for hypothetical situations in order to test its sensitivity. A specific methodoly was designed in order to evaluate the total unitary direct cost of each of the biochemical tests and to find out which of them had the lowest values. A side observation dealt with the adequacy to HU routine of the equipment used for the automatic process. All studies were done in 1989. The sample was determined with statistical tools, the time of manual labor was chronometered and the data related to supplies, maintenance and depreciation were gathered from their bidding and/or acquisition processes. To obtain the different total unitary direct costs, a comparison among relevant costs from the processes was established. The total unitary direct costs from the manual processes were lower than the automatic ones, except for sodium & potassium. If all 7 types were done by both processes, the automatic process would have taken less time than the manual one. These findings were different from what was expected, since costs for manual processes were lower than those for automatic ones. Therefore, the research was redesigned, to add 5 new hypothetic situations: a) the 7 types equaled 28509 analyses (total of glukemia tests, the one with the largest demand); b) the 5 types equaled 47894 analyses (operational capacity of the autoanalyzer) and c) under the false assumption that cholesterol, bilirubina, iron and triglycerides were done using autoanalyzer, three situations were simulated: (a) the actual number of analyses done in 1989; (b) 28509 analyses (see a above) and (c) 47894 (see b above). Comparing the total unitary direct cost of each of the processes, it was observed that for the automatic process, even using the autoanalyzer in full capacity (quantitative and qualitative), it would be greater than for the the manual process, for most cases.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Química, Programa de Pós-Graduação em Química, 2016. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2016-05-10T12:42:31Z No. of bitstreams: 1 2016_ElderTacianoRomaoSilva.pdf: 2181497 bytes, checksum: 2a97612cdc4a23ddd48ef062e29d969d (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2016-05-27T13:14:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_ElderTacianoRomaoSilva.pdf: 2181497 bytes, checksum: 2a97612cdc4a23ddd48ef062e29d969d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-27T13:14:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_ElderTacianoRomaoSilva.pdf: 2181497 bytes, checksum: 2a97612cdc4a23ddd48ef062e29d969d (MD5) / O estado vivente de um organismo é caracterizado principalmente pela presença de um constante fluxo de reações química, e por isso, seres vivos são formados por inúmeras reações, ligadas umas as outras, em uma espécie de rede. A teoria das redes bioquímicas fornece uma estrutura matemática e computacional usada para analisar e simular tais redes de reações. É um modelo de construção, diagnóstico e análise de redes baseados em equações diferenciais ordinárias. Algumas redes de reações químicas são estudadas, principalmente, pelos comportamentos dinâmicos complexos. Longe do equilíbrio, tais sistemas dinâmicos não-lineares exibem fenômenos, como, múltiplos estados estacionários e oscilações. Foram analisadas algumas redes químicas de interesse bioquímico, como as redes de cálcio nos cílios dos neurônios receptores olfativos, da via glicolítica, da oxidase-peroxidase e a rede que concede uma dinâmica multiestável na embriogênese da mosca de fruta, Drosophila melanogaster, assim como redes teóricas. Para estuda-las, o método, Stoichiometric Network Analysis, ou SNA, forneceu uma abordagem sistemática para a dinâmica de mecanismos químicos ou de quaisquer outros sistemas que contém estequiometria. Primeiro foi necessário compreender a bioquímica de sistemas que apresentam dinâmicas complexas e a importância das tais na manutenção de processos metabólicos e de comunicação celular em seres viventes para, então, avaliar a eficácia da técnica de análise estequiométrica de redes no inquérito de fenômenos não lineares. A variante gráfica do método SNA foi usada na criação de sub-redes que exibem comportamentos incomuns, e o consequente emprego da mesma na modelagem de redes elementares de fácil apreensão. Por fim, os métodos mostraram-se eficazes na análise de dinâmicas complexas, ademais, pode-se verificar a análise de bifurcação para algumas redes. Além das condições necessárias e suficientes para a observação de dinâmicas complexas, a técnica por SNA pôde, inclusive, expor outra propriedade biológica dos modelos. _____________________________________________________________________________ ABSTRACT / The state of a living body is mainly characterized by the presence of a constant flow of chemical reactions, and therefore living beings are formed by several reactions, linked to each other in a kind of network. The theory of biochemical networks provides a mathematical and computational framework used to analyze and simulate reactions such networks. It is a building model, diagnosis and network analysis based on ordinary differential equations. Some chemical reactions networks are studied mainly for the complex dynamic behavior. Far from equilibrium, such nonlinear dynamical systems exhibit phenomena such as, multiple steady states and oscillations. Some chemical networks of biochemical interest were analyzed, such as calcium networks in the cilia of olfactory receptor neurons, the glycolytic pathway, oxidase-peroxidase and network granting a multistable dynamics in the fruit fly embryogenesis, Drosophila melanogaster, as well as networks theoretical. To study them, the method Stoichiometric Network Analysis, or SNA, provided a systematic approach to the dynamics of chemical mechanisms or other systems containing stoichiometry. First it was necessary to understand the biochemical systems that exhibit complex dynamics and the importance of such in maintaining metabolic and cellular communication in living creatures to then assess the effectiveness of the stoichiometric analysis of technical networks in the investigation of nonlinear phenomena. The graphical variant of the SNA method was used to create subnets that exhibit unusual behaviors and the consequent use of the same in modeling elementary easy to grasp networks. Finally, the methods have been shown effective in analyzing complex dynamic, moreover, it can verify the bifurcation analysis for some networks. In addition to the necessary and sufficient conditions for observing complex dynamics, the SNA by technique could even expose another biological properties of the models.

Com o objetivo geral de elaborar e testar uma metodologia para comparar custos diretos unitários totais de análises bioquímicas quantitativas em processo manual e em processo automático no Laboratório de Análises Clínicas do Hospital Universitário da USP-LAC/HU e com os objetivos específicos de (a) aplicar a metodologia no LAC/HU, (b) avaliar se o auto-analisador era adequado à rotina, (c) qual o tempo teórico despendido por cada um dos processos - manual e automático - para realizar o total de análises requisitadas em 1989 e (d) proceder simulações do modelo de análises para situações hipotéticas a fim de verificar sua sensibilidade, foram estudados 7 tipos de análise - glicose, creatinina, uréia, sódio & potássio, ácido úrico, proteínas totais e cálcio. Adequou-se uma metodologia para avaliar o custo unitário direto total de cada um e conhecer qual processo apresentava os menores valores; os 7 tipos estudados foram submetidos a ambos no decorrer da pesquisa em 1989. Procurou-se, também, constatar se o equipamento utilizado no processo automático era adequado à rotina do HU e determinar o tempo teórico despendido por ambos os processos na execução de cada tipo de análise. O número estudado de análises foi determinado estatisticamente, o tempo de mão-de- obra gasto na execução das análises foi cronometrado, os dados referentes ao material de consumo, manutenção e depreciação foram obtidos nos respectivos processos de licitação e/ou aquisição. Para determinar os diversos custos unitários diretos totais foram selecionados os custos relevantes dos dois processos de execução e os resultados obtidos foram comparados. Verificou-se que os custos unitários diretos totais do processo manual foram menores que os do processo automático, exceto aqueles referentes à análise de sódio & potássio. Foi constatado, igualmente, pela comparação do tempo teórico despendido, se as análises dos 7 tipos fossem realizadas por ambos os processos, que o processo automático teria gasto um tempo menor que o processo manual na realização das duas etapas. Como os resultados encontrados divergiram dos esperados, pois a maioria dos custos unitários diretos totais do processo manual foi menor que os do processo automático, a pesquisa foi ampliada para serem acrescentadas 5 situações hipotéticas nas quais se admitiu, primeiramente, que dos 7 tipos de análises mencionados foram realizadas (a) 28.509 análises (número total das glicemias, o tipo mais requisitado) e (b) 47.894 análises (capacidade operacional do autoanalisador); a seguir admitiu-se que outros 4 tipos de análises-colesterol, bilirrubina, ferro e triglicérides, programados no auto-analisador e cujas análises não foram realizadas, o teriam sido nas seguintes quantidades: (a) o número real de análises executadas em 1989 das 11 análises e, também, os dois números das duas primeiras hipóteses, isto é, (b) 28.509 análises (número total das glicemias, o tipo mais requisitado) e (c) 47.894 análises (capacidade operacional do autoanalisador). Realizada a comparação do custo unitário direto total de cada um dos processos verificou-se que o processo automático, mesmo utilizando o auto-analisador em suas capacidades quantitativa e qualitativa totais, teria para a maioria das análises um custo unitário direto total maior que o do processo manual. / Seven types of biochemical analyses were studied (glucose, creatinine, urea, sodium & potassium, uric acid, total proteins and calcium), in orden to design and test a methodology aiming the comparison of total unitary direct cost of quantitative biochemical analyses between a manual process and an automatic one in the Clinical Analysis Laboratory (LAC) of Hospital Universitário from the University of São Paulo (HU). The specific objectives were a) to aply the methodology in the LAC, b) to determine wether the autoanalyzer was adequate for routine work, c) to measure the theorical time spent for each one of the processes - manual and automatic - to satisfy the demand of all the analyses accomplished during 1989, and d) to simulate a model of analyses for hypothetical situations in order to test its sensitivity. A specific methodoly was designed in order to evaluate the total unitary direct cost of each of the biochemical tests and to find out which of them had the lowest values. A side observation dealt with the adequacy to HU routine of the equipment used for the automatic process. All studies were done in 1989. The sample was determined with statistical tools, the time of manual labor was chronometered and the data related to supplies, maintenance and depreciation were gathered from their bidding and/or acquisition processes. To obtain the different total unitary direct costs, a comparison among relevant costs from the processes was established. The total unitary direct costs from the manual processes were lower than the automatic ones, except for sodium & potassium. If all 7 types were done by both processes, the automatic process would have taken less time than the manual one. These findings were different from what was expected, since costs for manual processes were lower than those for automatic ones. Therefore, the research was redesigned, to add 5 new hypothetic situations: a) the 7 types equaled 28509 analyses (total of glukemia tests, the one with the largest demand); b) the 5 types equaled 47894 analyses (operational capacity of the autoanalyzer) and c) under the false assumption that cholesterol, bilirubina, iron and triglycerides were done using autoanalyzer, three situations were simulated: (a) the actual number of analyses done in 1989; (b) 28509 analyses (see a above) and (c) 47894 (see b above). Comparing the total unitary direct cost of each of the processes, it was observed that for the automatic process, even using the autoanalyzer in full capacity (quantitative and qualitative), it would be greater than for the the manual process, for most cases.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico. Programa de Pós-Graduação em Engenharia Química. / Made available in DSpace on 2012-10-23T21:47:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2013-07-16T20:16:38Z : No. of bitstreams: 1 260699.pdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Este trabalho reúne ferramentas computacionais de biologia de sistemas num aplicativo chamado GEnSys (Genomic Engineering System), desenvolvido usando o MATLAB®, e que é formado por um conjunto de módulos interdependentes que permite a análise e simulação de redes de reações bioquímicas. Os módulos implementados realizam as seguintes tarefas: simulação dinâmica determinística, análise de controle metabólico, análise de fluxo metabólico, análise de balanço de fluxo e determinação de modos elementares. Uma característica importante do GEnSys é que não há a necessidade da entrada direta da matriz estequiométrica que representa o modelo biológico, pois existe um módulo que lê um arquivo contendo as reações da rede metabólica, escritas em uma sintaxe específica. Este procedimento gera automaticamente a matriz estequiométrica da rede. Para tanto, foi criada uma linguagem formal batizada de Linguagem de Reações Bioquímicas (LRB), flexível e intuitiva. Por exemplo, os nomes dos reagentes e produtos de uma reação podem conter caracteres especiais, tais como +, -, espaço e apóstrofo. Esses símbolos são comuns nos nomes dos compostos bioquímicos. Da forma como foi projetado, o GEnSys pode ser facilmente extendido para outros tipos de métodos de análise envolvendo a matriz estequiométrica. A partir de dados da literatura foram modeladas e simuladas diversas redes metabólicas. Para a Clostridium acetobutylicum foram consideradas todas as reações usadas para a produção de ácidos, solventes e hidrogênio molecular a partir de dois substratos distintos: glicose e glicerol. A rede modelada captura importantes aspectos qualitativos, de acordo com padrão de distribuição de fluxos (velocidades de reação) desta bactéria. Em um dos casos analisados foi possível obter valores quantitativos próximos aos valores reportados na literatura. Foram determinados 29 modos elementares de fluxo para a produção de hidrogênio molecular pela C. acetobutylicum. Destes, há 13 modos distintos envolvidos na produção de H2: seis a partir da glicose, seis a partir do glicerol e um relativo ao NADH, o qual foi considerado externo. Um estudo de caso em que a regulação da expressão gênica é importante foi conduzido comparando-se as simulações estocástica e determinística da via de biossíntese do triptofano da Escherichia coli. Todos os mecanismos de regulação conhecidos do operon trp (transcrição, tradução e inibição enzimática) foram considerados nas simulações estocástica e determinística. Em ambas, o comportamento da atividade da enzima antranilato sintase foi avaliado e comparado aos valores experimentais para uma E. coli selvagem. This work considers a set of computational systems biology tools, written as a MATLAB® toolbox called GEnSys (Genomic Engineering System). GEnSys comprises several interdependent modules that allow analysis and simulation of biochemical reaction networks. The developed implemented modules perform the following tasks: deterministic dynamic simulation, metabolic control analysis, metabolic flux analysis, flux balance analysis and determination of elementary modes. An important GEnSys feature is that the stoichiometric matrix representing the biological model does not have to be supplied directly. A module that reads an external file describing the metabolic network, in a specified, proposed syntax (the Biochemical Reaction Language - LRB), automatically produces the stoichiometric matrix. LRB is a flexible but intuitive language, that also allows the use of common biochemical symbols such as +, -, blank space and primes. Due to its design strategy, GEnSys may be easily extended for other analytical methods involving the stoichiometric matrix. Several metabolic networks were modeled from literature data and simulated using the developed tools. For Clostridium acetobutylicum all important reactions involved in the production of acids, solvents and molecular hydrogen, using two substrates, glucose and glycerol, were considered. The modeled network captures essential qualitative behavior, according to expected flux distribution from that bacterium. In one of the analysed cases, good quantitative agreement with literature data was found. Twenty-nine flux elementary modes for the molecular hydrogen production were found, thirteen of them involved in the H2 biosynthesis: six from glucose, six from glycerol, and one regarding NADH production. NADH was considered an external metabolite. A comparison between stochastic and deterministic simulation was carried out using a model where genetic regulation is important, the tryptophan biosynthesis by Escherichia coli. All known regulatory mechanisms for the trp operon (transcription, translation and enzymatic inhibition) were taken into account. In both cases, the catalytic behavior of the anthranilate synthase enzyme was evaluated and compared to experimental values reported to wild type E. coli.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:02:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / Universidade Federal de Pernambuco / Ganoderma lucidum é um basidiomiceto muito popular na medicina tradicional chinesa, sendo chamado de Lingzhi ou cogumelo da imortalidade . Estudos revelaram diversas propriedades farmacológicas benéficas deste fungo, sugerindo sua utilização como auxiliar em diversos tratamentos contra doenças humanas. Por não ser muito comum na natureza, o cultivo é a melhor maneira de suprir um mercado cada vez mais amplo. Dentre os vários métodos de cultivo existentes para a fungicultura, a técnica Jun-Cao é considerada a mais promissora para a produção de cogumelos em escala que atenda à demanda crescente. Sabendo que a bioquímica de um organismo pode variar entre diferentes linhagens, e entendendo a necessidade de descobrir novas variedades de G. lucidum, para ampliar as opções de cultivo deste fungo, este trabalho buscou comparar linhagens comerciais chinesas com linhagens brasileiras inexploradas de G. lucidum, para avaliar o valor bioquimico destas. Os resultados mostram que o cultivo combinado de madeira com gramínea, na técnica Jun-Cao, foi mais promissor no desenvolvimento das linhagens tanto em redução no tempo de cultivo quanto na qualidade e quantidade dos cogumelos. A linhagem brasileira (CC-144) destacou-se tanto na velocidade de crescimento, quanto na produtividade de basidiomas e na concentração bioquímica de proteínas, carboidratos, β- glucanas e fenóis, superando as chinesas e se mostrando uma opção para a fungicultura. A análise RAPD mostrou distinção genética entre as linhagens, descartando a possibilidade de ocorrência de clones

Considerando que o diabetes experimental altera a morfologia e função das glândulas salivares de ratos, o objetivo deste estudo foi analisar o efeito da irradiação com laser em baixa intensidade no metabolismo das glândulas parótidas (GP) e submandibulares (GSM) de ratas diabéticas, assim como analisar a glicemia destes animais. Ratas Wistar com aproximadamente 195 g foram divididas em diabéticas (D) e controles (C), e subdivididas de acordo com a dose de irradiação recebida: C-D0 (0 J/cm2), C-D5 (5 J/cm2), C-D10 (10 J/cm2), C-D20 (20 J/cm2). O diabetes foi induzido por injeção de estreptozotocina 60 mg/kg p.c., e confirmado após 72 h, através da glicemia. Vinte e nove dias após a indução, as ratas receberam a irradiação de acordo com o grupo a qual pertenciam. O laser de diodo (Ecco Fibras®), 660nm, foi utilizado nas áreas correspondentes às GP e GSM. Após 24 h, as ratas foram eutanasiadas e as glândulas removidas para posterior análise iônica, histológica e bioquímica de concentração total de proteína, atividade das enzimas catalase, peroxidase e amilase. Além disso, análise glicêmica também foi realizada. Análise de variância e teste de Tukey revelaram diminuição da glicemia nos grupos D5 e D20 (p<0,05), assim como diminuição na atividade da enzima catalase, nestas mesmas dosagens, nas GP e GSM para valores similares às ratas não-diabéticas (p>0,05), sendo que para as GSM, a dose de 10 J/cm2 também se mostrou efetiva. Análise histológica demonstrou acúmulo de lipídeos nas GP dos animais diabéticos, sendo que para os grupos que receberam irradiação, este acúmulo foi reduzido. Com base nos resultados, podemos concluir que a irradiação com laser vermelho nas GP e GSM altera a atividade enzimática da catalase, assim como altera a concentração de glicose sangüínea e o acúmulo de lipídeos. Com isto, mais estudos devem ser realizados objetivando continuar as análises de parâmetros antioxidantes, assim como, análise glicêmica, uma vez que a hiperglicemia e alterações no sistema antioxidante são diretamente relacionadas às complicações do diabetes. / Considering that experimental diabetes alters rat salivary gland morphology and function, the aim of this study was to evaluate the effect of laser irradiation (LI) on the glycaemic state and some biochemical parameters of the parotid glands (PG) and submandibulary glands (SMG) in diabetic and non diabetic rats, which were divided into 8 groups: D0/5/10/20 and C0/5/10/20, respectively. Diabetes was induced by administration of streptozotocin (60 mg/kg) and confirmed later by the glycaemia results. Twenty-nine (29) days after the induction, the PG and SMG of groups D-C5, D-C10 and D-C20, were irradiated with 5, 10 and 20 J/cm2 of laser diode (660nm/100mW) respectively. On the following day, the rats were euthanized and the blood glucose determined. The PG and SMG were removed and total protein concentration and amylase, peroxidase and catalase activities were performed, as well as, ionic and histological analysis. The analysis of the results (ANOVA and Tukey tests) revealed a decrease in the glycaemia level for groups D5 and D20 (p<0.05). In addition, diabetic rats showed higher catalase and peroxidase activities than non diabetic groups, without radiation. The doses of 5 and 20 J/cm2 decreased catalase activity, of PG and SMG, of diabetic groups to non diabetic values (p<0.05). Moreover, the dose of 10 J/cm2 also was effective to SMGs. Histological analysis showed accumulation of lipids droplets on parotid glands of diabetic animals. However, the lipid droplets quantity was lower in comparison with that observed to non irradiated diabetic animals. The results of the present study suggest that the classical organs which control glycaemia should also be analyzed after being irradiated with LI, once hyperglycaemia and alterations of the antioxidant system are the main causes of diabetes complications.

Made available in DSpace on 2017-07-10T17:37:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Monica_Anghinoni_Muller.pdf: 756682 bytes, checksum: 61f5a661d3ee29d68326be6cb32f6bc7 (MD5) Previous issue date: 2015-02-20 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The nematode Pratylenchus brachyurus known as nematode lesions, affects the soybean crop caused significant damage, this means that there is a need to develop alternatives that supply the control of pathogens by aggregating in productivity. Then the objective is to verify the influence of homeopathic Mercurius solubilis in different potencies in soybean plants and on control of the nematode. For this, three experiments were carried out in climatized greenhouse, testing the potencies of 6, 12, 24, 50, 100, 200 and 400CH (centesimal Hahnemannian) of Mercurius solubilis, ethanol 30% and healthy plants (untreated and not inoculated) were used as control treatment. The treatments were applied weekly from the V3 growth stage of soybeans. Three days after the first treatment, inoculation of nematodes was done. After 50 and 70 days after inoculation of the first and second experiment respectively, were made assessments of the aerial part height, stem diameter, number of pods per plant, dry weight of aerial part, dry weight of leaf + petiole + stem, dry mass of total pods, dry weight per pod, fresh weight of root, and were count juvenile, adults and eggs in the soil and in roots, and determined the reproduction factor (RF). In the third experiment, were quantified enzymes involved in secondary metabolism of plants, peroxidase (POX), phenylalanine ammonia lyase (PAL) and polyphenol oxidase (PPO). The sample of roots were taken at intervals of 0, 3, 7 and 14 days after treatment (DAT) and in the 3rd DAT, inoculation was made. In laboratory was conducted a experiment to evaluate in vitro motility and mortality, a distilled water solution containing 100 ml-1 juveniles and adults were placed in plastic container and add 7 mL of in vivo treatments tested at a dilution of 0.1%. The experiments were conducted in a randomized block design. The potencies 24CH, 50CH, 200CH and 100CH reduce the number of adults and juveniles in soil, as well as the reproduction factor, furthermore 100CH is able to interfere in the productive aspects, increasing 107.5% in the number of pods when compared to the control ethanol 30%, as well as dynamization 6CH and 12CH. To POX the enzymatic activity was higher for dynamizations 6CH, 100CH and 400CH, 3, 7 and 14 DAT respectively. The PAL activity presented increases of 79.93%, 80.72% and 84.10% in dynamizations 6CH, 12CH and 24CH respectively compared to control treatment, 3 DAT. 14 days after the first treatment, 400CH dynamization showed an increase in the enzymatic activity of 53.41% and 32.21% when compared to the control ethanol 30% and absolute control respectively. The dynamization 24CH when compared to absolute control showed an increase of 41.10% in the enzymatic activity. So Mercurius solubilis may be a potential alternative for the control of the nematode / O nematoide Pratylenchus brachyurus conhecido como nematoide das lesões, afeta a cultura da soja causado danos expressivos, isso faz com que haja a necessidade de desenvolver alternativas que supram o controle dos patógenos, agregando em produtividade. Objetivou-se então, verificar a influência do medicamento homeopático Mercurius solubilis em diferentes dinamizações nas plantas de soja e no controle de P. brachyurus. Para tanto, foram conduzidos três experimentos em casa de vegetação climatizada, testando-se as dinamizações de 6, 12, 24, 50, 100, 200 e 400CH (centesimal hahnemanniana) de Mercurius solubilis, Etanol 30% e plantas sadias (não tratada e não inoculada) foram utilizadas como tratamento testemunha. Os tratamentos foram aplicados semanalmente a partir do estádio fenológico V3 da soja. Três dias após o primeiro tratamento, foi feita a inoculação dos nematoides. Decorridos 50 e 70 dias após a inoculação do primeiro e segundo experimento respectivamente, foram realizadas as avaliações de altura de parte aérea, diâmetro do coleto, número de vagens por planta, massa seca de parte aérea, massa seca de folha+pecíolo+caule, massa seca total de vagens, massa seca por vagem, massa fresca de raiz, e contagem de juvenis, adultos e ovos presentes no solo e na raiz, e determinado o fator de reprodução (FR). No terceiro experimento, foram quantificadas enzimas envolvidas no metabolismo secundário das plantas, peroxidase (POX), fenilalanina amônia-liase (FAL) e a polifenoloxidase (PFO). As coletas das amostras de raízes foram realizadas no intervalo de 0, 3, 7 e 14 dias após o tratamento (DAT) sendo que no 3º DAT foi feita a inoculação. Em laboratório foi realizado experimento in vitro para avaliação de motilidade e mortalidade, uma solução de água destilada contendo 100 juvenis e adultos mL-1 foi depositada em recipiente plástico, e adicionados 7 mL dos tratamentos testados in vivo na diluição de 0,1%. Os experimentos foram conduzidos em delineamento em blocos casualizados. As dinamizações 24CH, 50CH, 100CH e 200CH reduzem o número de juvenis e adultos presentes no solo, assim como o fator de reprodução, além disso, a dinamização 100CH é capaz de interferir em aspectos produtivos pelo aumento de 107,5% no número de vagens quando comparada à testemunha etanol 30%, assim como a dinamização 6CH e 12CH. Para POX a atividade enzimática foi superior para as dinamizações 6CH, 100CH e 400CH, em 3, 7 e 14 DAT respectivamente. A atividade de FAL apresentou incrementos de 79,93%, 80,72% e 84,10% nas dinamizações 6CH, 12CH e 24CH respectivamente em relação à testemunha absoluta, 3 DAT. 14 dias após o primeiro tratamento, a dinamização 400CH mostrou um aumento na atividade enzimática de 53,41% e 32,21% quando comparada à testemunha etanol 30% e testemunha absoluta respectivamente. A dinamização 24CH quando comparada a testemunha absoluta mostrou um acréscimo de 41,10% na atividade enzimática. Assim Mercurius solubilis pode ser uma alternativa potencial para o controle de P. brachyurus

Dissertação(mestrado) - Universidade Federal do Rio Grande, Programa de Pós-Graduação em Engenharia e Ciência de Alimentos, Escola de Química e Alimentos, 2010. / Submitted by Caroline Silva (krol_bilhar@hotmail.com) on 2012-08-19T20:33:18Z No. of bitstreams: 1 dissertao graciella campello.pdf: 486302 bytes, checksum: 0f3c85b47643a8359572feee54269a00 (MD5) / Approved for entry into archive by Bruna Vieira(bruninha_vieira@ibest.com.br) on 2012-09-24T23:15:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 dissertao graciella campello.pdf: 486302 bytes, checksum: 0f3c85b47643a8359572feee54269a00 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-09-24T23:15:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertao graciella campello.pdf: 486302 bytes, checksum: 0f3c85b47643a8359572feee54269a00 (MD5) Previous issue date: 2010 / Este trabalho teve como objetivo principal investigar a imobilização da enzima β- galactosidase comercial de Kluyveromyces lactis (Lactozym®), bem como caracterizar a enzima livre e imobilizada visando sua aplicação na reação de hidrólise da lactose. Foram feitos testes preliminares com três suportes diferentes para a imobilização (alginato, quitosana e Eupergit® C), sendo que os valores de recuperação da atividade enzimática foram, respectivamente, 2,43%, 6,27% e 41,86%, selecionando-se o suporte Eupergit® C como o mais promissor. Um planejamento Plackett-Burman, correspondente a 12 ensaios mais 3 réplicas no ponto central, foi proposto a fim de verificar os efeitos das variáveis temperatura, pH, força iônica, tempo de imobilização, concentração de galactose, concentração de íons Mg2+ e volume de enzima na imobilização de β-galactosidase em Eupergit® C. A força iônica e o pH foram as variáveis que apresentaram efeito significativo (p<0,1) na imobilização, sendo que o aumento da força iônica de 0,1 M para 1,5 M e o aumento do pH de 6,6 para 7,4 representaram aumento de 30,0% e redução de 17,3% na recuperação da atividade enzimática, respectivamente. À temperatura de 25°C, pH 6,6, concentração salina de 1,5 M, tempo de imobilização de 8 h, concentração de Mg2+ de 1 mM e 0,4 mL de enzima adicionada, atingiu-se 85% de recuperação da atividade enzimática. As enzimas livre e imobilizada, nas melhores condições em Eupergit® C, foram caracterizadas quanto aos perfis de pH e temperatura, estabilidade térmica, parâmetros cinéticos e termodinâmicos. Quanto aos perfis de pH e temperatura, foram obtidos, para ambas, valores máximos de atividade enzimática em pH 6,6 e 45°C. Houve um ganho de estabilidade térmica com a imobilização enzimática, tendo-se observado um aumento de cerca de 4 vezes no tempo de meia-vida da enzima imobilizada a 45oC, em relação à livre, o que pode representar vantagens na utilização da enzima imobilizada em escala comercial. Os valores de energia de ativação para as enzimas livre e imobilizada foram, respectivamente, iguais a 35,28 kJ.mol-1 e 29,46kJ.mol-1; e os valores de energia de ativação da reação de desnaturação para as enzimas livre e imobilizada foram iguais, respectivamente, a 266,12 kJ.mol-1 e 198,77 kJ.mol-1. Foram determinados os parâmetros cinéticos para as enzimas livre e imobilizada, sendo que os valores de Km, 30,33 mM e 104,00 mM, respectivamente, representaram uma diminuição da afinidade da enzima pelo substrato com a imobilização, possivelmente devido a fatores estéricos e conformacionais. Parâmetros termodinâmicos foram calculados, evidenciando novamente a maior estabilidade térmica da enzima imobilizada e indicando que a perda de estabilidade de ambas as enzimas, livre e imobilizada, parece não estar associada a alterações relevantes na estrutura terciária. / Immobilization of b-galactosidase (Lactozym®) on Eupergit® C and its characterization This study aimed to investigate the immobilization of commercial β-galactosidase from Kluyveromyces lactis (Lactozym®) and characterize the free and immobilized enzymes for their application in lactose hydrolysis. Three preliminaries tests were carried out with three different supports for immobilization (alginate, chitosan and Eupergit® C), and the values for recovery of enzyme activity were, respectively, 2.43%, 6.27% e 41.86%, selecting Eupergit® C as the most promising. A Plackett-Burman design, composed of 12 assays over 3 central points was proposed in order to verify the effects of temperature, pH, ionic strength, reaction time, galactose concentration, Mg2+ concentration and enzyme volume on β-galactosidase immobilization using Eupergit® C support. The ionic strength and pH were the variables that presented significant effect (p<0.1) on immobilization. The increase in the ionic strength from 0.1 to 1.5 M and the decrease in pH from 6.6 to 7.4 represented an increase of 30.0% and a reduction of 17.3% in the recovery of enzyme activity, respectively. At 25°C, pH 6.6, salt concentration of 1.5 M, immobilization for 8 h, 1 mM Mg2+ and 0.4 mL of enzyme added, reached 85% recovery of enzymatic activity. The free and immobilized enzyme on Eupergit® C were characterized,determining pH and temperature profiles, thermal stability, kinetic and thermodynamic parameters. pH and temperature profiles showed maximum activity at pH 6.6 and 45°C. There was a gain in thermal stability with the enzyme immobilization and there was an increase of about 4 times in the half-life of immobilized enzyme at 45°C, which may represent advantages when using in a commercial scale. The values of activation energy for free and immobilized enzymes were, respectively, equal to 35.28 kJ.mol-1 and 29.46 kJ.mol-1, and the values of activation energy of denaturation reaction for free and immobilized enzymes were equal, respectively, to 266.12kJ.mol-1 and 198.77 kJ.mol-1. Kinetic parameters were determined for the immobilized and free enzyme. Km values of 30.33 mM and 104.00 mM, respectively, represented a decrease of the affinity of the enzyme by the substrate with immobilization, possibly due to steric and conformational factors. Thermodynamic parameters were calculated, showing the higher thermal stability of the immobilized enzyme and indicating that the loss of stability of both enzymes, immobilized and free, does not seem to be associated with significant changes in tertiary structure.

Considerando que o diabetes experimental altera a morfologia e função das glândulas salivares de ratos, o objetivo deste estudo foi analisar o efeito da irradiação com laser em baixa intensidade no metabolismo das glândulas parótidas (GP) e submandibulares (GSM) de ratas diabéticas, assim como analisar a glicemia destes animais. Ratas Wistar com aproximadamente 195 g foram divididas em diabéticas (D) e controles (C), e subdivididas de acordo com a dose de irradiação recebida: C-D0 (0 J/cm2), C-D5 (5 J/cm2), C-D10 (10 J/cm2), C-D20 (20 J/cm2). O diabetes foi induzido por injeção de estreptozotocina 60 mg/kg p.c., e confirmado após 72 h, através da glicemia. Vinte e nove dias após a indução, as ratas receberam a irradiação de acordo com o grupo a qual pertenciam. O laser de diodo (Ecco Fibras®), 660nm, foi utilizado nas áreas correspondentes às GP e GSM. Após 24 h, as ratas foram eutanasiadas e as glândulas removidas para posterior análise iônica, histológica e bioquímica de concentração total de proteína, atividade das enzimas catalase, peroxidase e amilase. Além disso, análise glicêmica também foi realizada. Análise de variância e teste de Tukey revelaram diminuição da glicemia nos grupos D5 e D20 (p<0,05), assim como diminuição na atividade da enzima catalase, nestas mesmas dosagens, nas GP e GSM para valores similares às ratas não-diabéticas (p>0,05), sendo que para as GSM, a dose de 10 J/cm2 também se mostrou efetiva. Análise histológica demonstrou acúmulo de lipídeos nas GP dos animais diabéticos, sendo que para os grupos que receberam irradiação, este acúmulo foi reduzido. Com base nos resultados, podemos concluir que a irradiação com laser vermelho nas GP e GSM altera a atividade enzimática da catalase, assim como altera a concentração de glicose sangüínea e o acúmulo de lipídeos. Com isto, mais estudos devem ser realizados objetivando continuar as análises de parâmetros antioxidantes, assim como, análise glicêmica, uma vez que a hiperglicemia e alterações no sistema antioxidante são diretamente relacionadas às complicações do diabetes. / Considering that experimental diabetes alters rat salivary gland morphology and function, the aim of this study was to evaluate the effect of laser irradiation (LI) on the glycaemic state and some biochemical parameters of the parotid glands (PG) and submandibulary glands (SMG) in diabetic and non diabetic rats, which were divided into 8 groups: D0/5/10/20 and C0/5/10/20, respectively. Diabetes was induced by administration of streptozotocin (60 mg/kg) and confirmed later by the glycaemia results. Twenty-nine (29) days after the induction, the PG and SMG of groups D-C5, D-C10 and D-C20, were irradiated with 5, 10 and 20 J/cm2 of laser diode (660nm/100mW) respectively. On the following day, the rats were euthanized and the blood glucose determined. The PG and SMG were removed and total protein concentration and amylase, peroxidase and catalase activities were performed, as well as, ionic and histological analysis. The analysis of the results (ANOVA and Tukey tests) revealed a decrease in the glycaemia level for groups D5 and D20 (p<0.05). In addition, diabetic rats showed higher catalase and peroxidase activities than non diabetic groups, without radiation. The doses of 5 and 20 J/cm2 decreased catalase activity, of PG and SMG, of diabetic groups to non diabetic values (p<0.05). Moreover, the dose of 10 J/cm2 also was effective to SMGs. Histological analysis showed accumulation of lipids droplets on parotid glands of diabetic animals. However, the lipid droplets quantity was lower in comparison with that observed to non irradiated diabetic animals. The results of the present study suggest that the classical organs which control glycaemia should also be analyzed after being irradiated with LI, once hyperglycaemia and alterations of the antioxidant system are the main causes of diabetes complications.

Made available in DSpace on 2014-06-12T22:59:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo3170_1.pdf: 1508296 bytes, checksum: 37656c73a9b85b4fbbb9ae66a5359205 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O objetivo do presente estudo foi estudar em ratos neonatos e jovens as repercussões sobre o crescimento e o desenvolvimento neuromotor da ingestão de dieta hipocalórica e/ou da realização de atividade aquática. Foram utilizados 72 ratos machos provenientes de 17 ratas primíparas, linhagem Wistar da UFPE. Os grupos inicialmente foram formados pela manipulação dietética: American Institute of Nutrition - AIN (N) na gestação e lactação, ou Hipocalórica (H) a partir da 3º semama de gestação e por toda a lactação. A atividade aquática foi realizada com os filhotes a partir do 8º dia até o 52º dia de vida. Assim, formaram-se 4 grupos: Normocalórico Inativo (NI) e Ativo (NA), e Hipocalórico Inativo (HI) e Ativo (HA). Os procedimentos nos filhotes: 1. Lactação: 1.1 Peso corporal, medida dos eixos latero-lateral (ELLC), antero-posterior (EAPC) do crânio, eixo longitudinal do corpo (EL) e o comprimento da cauda (CC). 1.2. Reflexos: recuperação de decúbito (RD), aversão ao precipício (AP), colocação pelas vibrissas (CV), pressão palmar (PP), geotaxia negatica (GN), endireitamento em queda livre (QL), resposta ao susto (RS). 1.3 Locomoção: a distância percorrida, velocidade e potência média, tempo de parada e número de parada. 2. Pós-desmame aos 60 dias: 2.1 Percentual do ganho de peso (%GP); 2.2 Taxa específica do ganho de peso (TEGP); 2.3 Índice de massa corporal e de Lee; 2.4 Circunferência da abdominal e torácica; 2.5 Consumo alimentar da ninhada; 2.6 Lactato; 2.7 Glicose, triglicerídeos, colesterol, LDL-col, HDL-col, VLDL-col; 2.8. Peso dos órgãos; 2.9 Tíbia. Os resultados indicaram que o oferecimento de dieta hipocalórica, não afetou o peso ao nascer, mas o reduziu a partir do 6º dia de vida até os 60 dias de vida. Houve redução no ELLC, EAPC, EL e CC e retardo dos CV, GN, RS e QL do HI em relação ao NI, sendo o HA nas mesmas medidas apresentou valores superiores ao HI ao final do desmame. A locomoção, o consumo alimentar e as circunferências corporais não apresentaram diferenças entre os grupos. A TEGP e %GP foi maior no HI. O IMC, Índice de Lee, peso do fígado foram superiores no HA. A glicemia foi inferior no HI. O peso da tíbia foi maior no NA. Contudo, a utilização desse modelo dietético parece induzir repercussões no crescimento e desenvolvimento de forma menos agressiva que o observado em dieta hipoprotéica e similar aos modelos de restrição alimentar. Neste contexto, pode-se sugerir que a atividade física atue como um fator de reprogramação da agressão nutricional por dieta hipocalórica sobre o sistema nervoso ratificando a capacidade plástica desse sistema frente a estímulos externos