Orientador : Prof. Dr. Marcello Iacomini / Coorientadora : Profª. Drª. Fhernanda Ribeiro Smiderle / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências : Bioquímica. Defesa: Curitiba, 21/08/2017 / Inclui referências : f. 86-100 / Resumo: O cogumelo gigante Macrocybe titans assim como os demais basidiomicetos, desperta o interesse científico devido a sua possível bioatividade, em parte decorrente da presença de polissacarídeos com variadas características estruturais. Com base nisto, o presente trabalho teve por objetivo elucidar a estrutura química de alguns polissacarídeos presentes no basidioma de M. titans, bem como verificar seu efeito biológico frente a células de melanoma murino B16F10. Para isto, o corpo de frutificação do basidiomiceto seco, moído e deslipidificado foi submetido à processos sucessivos de extrações aquosas (a frio e a quente) e alcalina (NaOH 5%). Os extratos aquosos foram precipitados com etanol e dialisados contra água destilada, enquanto que o extrato alcalino foi neutralizado e dialisado contra água corrente. O extrato obtido a frio foi purificado por tratamento com ?-amilase, congelamento e degelo e diálise em membrana (1.000 kDa). O extrato a quente foi fracionado por congelamento e degelo, tratamento com ?-amilase e tratamento com Me2SO. O extrato alcalino, por sua vez, foi purificado por congelamento e degelo, tratamento com solução de Fehling ou NaOH 2% seguido de precipitação com ácido acético. A fração E1000, obtida do extrato a frio apresentou-se homogênea, sendo composta por galactose e fucose e contendo uma massa molar estimada em 14,2 x 103 g/mol. As análises de espectroscopia e metilação sugerem que esta molécula seja uma fucogalactana com uma cadeia principal composta por ?-D-Galp ligadas (1?6), substituída a cada 2 ou 3 unidades em O-2 por terminais não redutores de ?-L-Fucp. A atividade biológica desta molécula, bem como da fração bruta R6CW obtida do extrato a frio, foi avaliada em células de melanoma murino B16F10, sendo que a fração R6CW aumentou a capacidade endocítica do corante vermelho neutro pelas células em 48 h na concentrações de 10 e 50 ?g/mL, enquanto que a proliferação celular foi aumentada em todas as concentrações testadas em 48 h. A fucogalactana, por sua vez, não causou alteração na viabilidade celular e alterou a proliferação célular apenas na concentração de 50 ?g/mL em 72 h de tratamento. A fração SSD, obtida do extrato a quente, apresentou-se composta por mais de uma molécula, contendo principalmente glucose, galactose, manose e fucose. A análise espectroscópica indicou a presença de ?-D-Glcp, ?-D-Manp, ?-L-Fucp e ?-D-Galp nesta fração, que será submetida a outras etapas de fracionamento visando a purificação da mesma. As frações SFSEA e SSIEA, obtidas do extrato alcalino, apresentaram principalmente glucose em sua composição monossacarídica. Ambas as frações ao serem analisadas por espectroscopia, apresentaram sinais correspondentes à uma ?-D-Glucana contendo uma cadeia principal formada por unidades de ?-D-Glcp ligadas (1?3), ramificada em O-6 por ?-D-Glcp, o que foi confirmado pela degradação controlada de Smith, em que o material resistente à degradação apresentou sinais correspondentes à ?-D-Glcp ligada (1?3). A análise de metilação da fração SSIEA mostrou que a glucana presente nesta fração é substituída em O-6 na proporção de 1:1, podendo estas substituições serem tanto por unidades de ?-D-Glcp quanto por cadeias laterais de ?-D-Glcp ligadas (1?6). A fração SFSEA será submetida a análise de metilação visando a elucidação da sua estrutura química. Palavras-chaves: Macrocybe titans; Glucana; Fucogalactana; Atividade biológica. / Abstract: The giant mushroom Macrocybe titans, as well as the other basidiomycetes, arouse the scientific interest due to its possible bioactivity, in part due to the presence of polysaccharides with a varied chemical structures. Based on this, this work aimed to elucidate the chemical structure of some polysaccharides of M. titans fruiting bodies, as well as evaluate its biological activity on murine melanoma cells (B16F10). Therefore, the dried, powdered and defatted fruiting bodies were submitted to successive aqueous (cold and hot) and alkaline (NaOH 5%) extractions. The aqueous extracts were precipitated with ethanol and dialyzed against distilled water, while the alkaline extract was neutralized and dialyzed against tap water. The cold water extract was purified by ƒ¿-amylase treatment, freeze and thawing process and dialysis through membrane (1,000 kDa). The hot water extract was fractionated by freeze and thawing process, ƒ¿-amylase treatment and Me2SO treatment. The alkaline extract, on its turn, was purified by freeze and thawing, treatment with Fehling solution or with NaOH 2% followed by precipitation with acetic acid. The E1000 fraction, obtained from cold water extract, was pure and contained galactose and fucose, and an estimated molar mass of 14.2 x 103 g/mol. The spectroscopy and methylation analyses suggest that this molecule is a fucogalactan with a main chain composed of ƒ¿-D-Galp (1¨6) linked, branched at O-2 position by non reducing end units of ƒ¿-L-Fucp in the proportion of 2 to 3 units. The biological activity of this molecule, as well as the crude fraction R6CW obtained from the cold water extract, was evaluated in B16F10 cells. The R6CW fraction increased the cell endocytic capacity in 48 h at 10 and 50 ƒÊg/mL, while the cell proliferation was increased in 48 h at all concentrations tested. On the other hand, the fucogalactan did not cause changes in the cell viability, and altered the proliferation only at 50 ƒÊg/mL in 72 h of treatment. The SSD fraction, obtained of hot water extract was composed of more than one molecule and contained maily glucose, galactose, mannose, and fucose. The spectroscopic analyses indicated the presence of ƒÀ-D-Glcp, ƒ¿-D-Manp, ƒ¿-L-Fucp and ƒ¿-D-Galp in this fraction, that will be submitted to other purification steps aiming its purification. The fractions SFSEA and SSIEA, obtained from alkaline extract, presented mainly glucose as monosaccharides. Both fractions, when analyzed by spectroscopy showed signals corresponding to a ƒÀ-D-glucan containing a main chain composed of ƒÀ-D-Glcp (1¨3) linked, branched at O-6 position by ƒÀ-D-Glcp, which was confirmed after Smith degradation, which generated a resistant fraction with signals corresponding to the ƒÀ-D-Glcp (1¨3)-linked. The methylation analysis of SSIEA suggested that the ƒÀ-glucan present in this fraction is branched at a rate of 1:1, and the side chains can be composed by ƒÀ-D-Glcp units or ƒÀ-D-Glcp (1¨6)-linked chains. The SFSEA fraction will be subjected to methylation analysis to determine its chemical structure. Keywords: Macrocybe titans; Glucan; Fucogalactan; Biological activity.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina. Programa de Pós-graduação em Biotecnologia / Made available in DSpace on 2013-07-16T02:49:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 213754.pdf: 825313 bytes, checksum: 719b942f69b3204102ad0eb0af7086d7 (MD5) / Agaricus brasiliensis (=Agaricus blazei ss. Heinem.), popularmente conhecido no Brasil como Cogumelo Medicinal, Cogumelo do Solâ, é um fungo de cultivo expressivo no país devido às suas propriedades medicinais, evidenciadas em diversos trabalhos científicos, e vem ganhando importância em diversos países, principalmente para uso nutricêutico. Estes produtos são obtidos dos cogumelos, minimamente processados e encapsulados para serem consumidos como suplementos dietéticos. São utilizados principalmente devido ao potencial terapêutico como imunomodulatórios e anti-tumoral. As frutificações de A. brasiliensis são coletadas no Brasil principalmente no estágio imaturo, quando o píleo ainda está fechado, atendendo a padrões morfológicos pré-estabelecidos. No entanto, essas frutificações imaturas ainda não atingiram máxima eficiência da biomassa fúngica, mas é nesse estágio que se obtém maior valor comercial para exportação. As frutificações maduras são geralmente de menor valor comercial, sendo muitas vezes descartadas pelos produtores ou aproveitadas na produção de nutricêuticos. A qualidade desses nutricêuticos é dependente da composição química das frutificações, particularmente em relação ao conteúdo de b-D-glucanas que constituem a parede celular do fungo. No presente estudo, foram utilizadas frutificações de A. brasiliensis (estirpe UFSC 51), coletadas em diferentes estágios de maturação - imaturas SI (píleo fechado), maduras (píleo aberto) com esporos imaturos SII e maduras com esporos maduros SIII, para se avaliar o rendimento e as características estruturais dos polissacarídeos solúveis em água a 100oC antes e após a purificação das b-D-glucanas usando-se cromatografia líquida, identificação por espectrometria (FTIR e RMN de 13C e 1H), peso molecular e teor de proteínas. Identificou-se a presença de um polímero de peso molecular superior a 1.000.000 daltons, e estrutura (1®6)-(1®3)-b-D-glucanas, com baixo teor de proteínas (em média 0,61%), nos três estágios de maturação, porém com aumento do rendimento das b-D-glucanas no estágio SII e de (1®3)-b-D-glucanas nos estágios SII e SIII. Como conseqüência, frutificações maduras de A. brasiliensis que também contêm estas importantes b-D-glucanas devem ser utilizadas na elaboração de produtos nutricêuticos. As b-D-glucanas extraídas e purificadas destas frutificações nos diferentes estágios foram avaliadas quanto à bioatividade, qualitativa e quantitativamente, sobre o processo de vascularização inicial em embriões de galinha (Gallus domesticus). Foram constatados efeitos pró-vasculogênico, com conseqüente aumento do crescimento dos embriões para todos os estágios de maturação, inclusive nas diferentes concentrações testadas para os estágios SI e SII. Estes resultados sugerem que as b-D-glucanas, isoladas das frutificações nos diferentes estágios de maturação interferem positivamente na formação de vasos sanguíneos e que o efeito pode ser mediado pela atividade imunomoduladora. Em conclusão, as frutificações maduras, que também possuem atividade pró-vasculogênica, devem ser incluídas na produção de nutricêuticos propiciando a utilização otimizada da biomassa do cogumelo.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-graduação em Biologia de Fungos, Algas e Plantas, Florianópolis, 2013 / Made available in DSpace on 2014-08-06T17:17:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 325531.pdf: 1384240 bytes, checksum: 0906d138ed0d095b21a4e4b2f128c482 (MD5) Previous issue date: 2013 / O gênero Leucocoprinus Pat. (Agaricaceae) é incluído em Lepiota s.l., complexo que compreende um grande número de cogumelos caracterizados por apresentarem lamelas livres, esporada branca e anel. Foram coletados 67 espécimes do gênero no estado de Santa Catarina e foram analisadas conservando-se as características taxonômicas morfológicas como hipótese de pesquisa. Foram identificadas cinco espécies: Lc. birnbaumii, Lc. brunneoluteus, Lc. fragilissimus, Lc. ianthinus e Lc. longistriatus. A partir de literatura e revisão de coleções de herbário foi obtida a distribuição geográfica para o Brasil de 25 espécies de Leucocoprinus e 136 espécies de Lepiota s.l. compreendidas em 12 gêneros. Foram realizadas análises de máxima parcimônia (MP) e inferência Bayesiana (PP) utilizando sequências de ITS de táxons coletados durante o desenvolvimento do projeto junto com sequências similares obtidas do GenBank. A relação de espécimes de Leucocoprinus com fungos cultivados por formigas da tribo Attini é discutida com base nas análises moleculares.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Curso de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos / Made available in DSpace on 2012-10-18T17:06:35Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / O presente trabalho teve por objetivo avaliar o comportamento da incubação do cogumelo Agaricus bisporus em substrato sólido, com spawn obtido através da cultura em meio líquido. Como meio líquido, utilizou-se o trigo em grão , na forma de extrato (ETG) ou sólido, utilizado nos cultivos comerciais (GT). As temperaturas x tempos de cozimento para a obtenção do (ETG), suas concentrações e posterior comparação em meio líquido quimicamente definido foram estudados. A produção micelial obtida em micro - fermentador foi utilizada a 1% v/v meio como inóculo na produção do spawn . Os resultados da produção de biomassa, em fermentadores air-lift foi equivalente a 0,011496 + 0,001320 x. gr./ ml no meio ETG - 65°C, 20'-[ 75] , em 130 horas de fermentação. Produção de biomassa muito superior quando comparado a produção de 0,006795 gr./ ml obtida com o meio quimicamente definido. A fase lag de crescimento microbiano e sua correlação com o consumo de nutrientes (P = 5% ), foi linear e bem definido. A forma micelial foi dispersa e de pequenos pellet. Na segunda etapa, realizada em um cultivo industrial no Brasil, avaliou-se qualitativamente e quantitativamente cada fase do processo desde a fermentação até a incubação do composto. Os resultados, foram comparados aos dados médios de 7 processos comerciais de produção do cogumelo. Neste trabalho, O spawn líquido, em 15 dias proporcionou uma inexpressiva incubação do micélio no composto. Sem contaminação por outros microorganismos ficou caracterizado uma fase lag muito evidente do crescimento microbiano. Não foram observados clamp conections no spawn, nem no micélio do composto. A avaliação da correlação entre o tratamento testemunha e o spawn líquido, para o comportamento dos nutrientes no composto, não foi superior a 77% em nenhuma análise, ao passo que o spawn em trigo grão foi superior a 92%. Para melhores caracterizações do ocorrido sugere-se o estudo sobre métodos para a manutenção das características genéticas e fenotípicas da origem para viabilização do spawn líquido via meio ETG; bem como potencialidades de utilização da forma micelial como alimento nutriceutico.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-02-07Bitstream added on 2014-06-13T20:44:52Z : No. of bitstreams: 1 pinto_avfs_dr_botfm.pdf: 715603 bytes, checksum: 2845d758b9af30dde6146b9a2b2a40c7 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A ATF (fração ácido-tratada) é uma fração polissacarídica extraída do cogumelo Agaricus brasiliensis rica em (1→6)-β-D-glucana, à qual se atribui ação imunoestimulante. No presente trabalho, avaliamos o efeito da ATF sobre a produção de citocinas, a expressão de mRNA de fatores angiogênicos e a infiltração de leucócitos no microambiente do tumor de Ehrlich, subcutaneamente implantado em camundongos BALB/c. O tratamento consistiu de 3 aplicações de ATF (0,5 mg/0,1mL) no sítio de implantação tumoral, seguido de sacrifício dos animais aos 7 ou 14 dias após a implantação do tumor. A massa tumoral foi removida para a obtenção das células infiltradas no tumor de Ehrlich e para análise do número de células secretoras de citocinas (ELISPOT). Foi realizada a análise dos fatores pró-angiogênicos pela técnica de PCR em tempo real e a presença in situ de células imunocompetentes, foi analisada através de microscopia confocal. Aos 7 dias observou-se maior número de células secretoras de IL-4 e IFN-γ no grupo Ehr/ATF e aos 14 dias a capacidade de produção de IL-10 mostrou-se aumentada no grupo Ehr, fenômeno revertido pelo tratamento com a ATF, que induziu aumento no número de células produtoras de IFN- γ. Esses achados são compatíveis com a observação de que os animais tratados com a ATF apresentaram marcação mais intensa para as células CD8+ e Mac-3+. Em relação aos fatores angiogênicos, observamos que aos 7 dias, o tratamento inibiu a produção de FGF-2 no microambiente tumoral. Assim, concluímos que a ATF, através da indução da produção de IFN-γ, foi capaz de reverter parcialmente a produção de IL-10 induzida pelas células tumorais, estabelecendo um microambiente menos favorável ao desenvolvimento do tumor. / The acid treated fraction (ATF) is a polysaccharidic (1-6)-β-D-glucan-rich fraction obtained from A. brasiliensis, with putative immunostimulatory activity. The present study was undertaken to examine the effect of ATF on cytokine production and expression of mRNA of angiogenic factors in the microenvironment of subcutaneous Ehrlich tumor mass. BALB/c mice were subcutaneously inoculated with Ehrlich tumor cells (day zero), followed by in situ administration of sterile salt solution (group Ehr) or with 0,5 mg/0,1mL of ATF (group Ehr/ATF) on day 3, 4 and 5. These animals were sacrificed on the 7th or 14th day for evaluations. Tumor tissue was removed to obtain infiltrated cells and for analyze the number of cytokine producing cells (ELISPOT). The pro-angiogenic factor were analyzed by real time PCR and phenotype of infiltrated immunocompetent cells was analyzed by confocal microscopy. On the 7th day, increased number of IL-4 and IFN-γ- producing cells was observed in the Ehr/ATF group. On the 14th day Ehr group showed increased number of IL-10-producing cells, whereas this occurrence was avoided by treatment with ATF (Her/ATF). Treatment also increased the number of IFN-γ producing cells in that time. These data are in accordance with the stronger labeling of tumor tissue for CD8 and Mac-3. Concerning to angiogenic factor, on the 7th day, the treatment decreased the FGF-2 mRNA expression by tumor tissue. In summary, our data allow us to conclude that ATF was able to partially reverse the production of IL-10 induced by tumor cells, through the induction of higher levels of IFN-γ-producing cells, perhaps establishing a more efficient immunoresponsiveness against tumor.

Orientador: Ramon Kaneno / Banca: Iracilda Zeppone Carlos / Banca: Denise Fecchio / Banca: Giselle Zenker / Banca: Sandra Aparecida Cororato dos Santos / Resumo: A ATF (fração ácido-tratada) é uma fração polissacarídica extraída do cogumelo Agaricus brasiliensis rica em (1→6)-β-D-glucana, à qual se atribui ação imunoestimulante. No presente trabalho, avaliamos o efeito da ATF sobre a produção de citocinas, a expressão de mRNA de fatores angiogênicos e a infiltração de leucócitos no microambiente do tumor de Ehrlich, subcutaneamente implantado em camundongos BALB/c. O tratamento consistiu de 3 aplicações de ATF (0,5 mg/0,1mL) no sítio de implantação tumoral, seguido de sacrifício dos animais aos 7 ou 14 dias após a implantação do tumor. A massa tumoral foi removida para a obtenção das células infiltradas no tumor de Ehrlich e para análise do número de células secretoras de citocinas (ELISPOT). Foi realizada a análise dos fatores pró-angiogênicos pela técnica de PCR em tempo real e a presença in situ de células imunocompetentes, foi analisada através de microscopia confocal. Aos 7 dias observou-se maior número de células secretoras de IL-4 e IFN-γ no grupo Ehr/ATF e aos 14 dias a capacidade de produção de IL-10 mostrou-se aumentada no grupo Ehr, fenômeno revertido pelo tratamento com a ATF, que induziu aumento no número de células produtoras de IFN- γ. Esses achados são compatíveis com a observação de que os animais tratados com a ATF apresentaram marcação mais intensa para as células CD8+ e Mac-3+. Em relação aos fatores angiogênicos, observamos que aos 7 dias, o tratamento inibiu a produção de FGF-2 no microambiente tumoral. Assim, concluímos que a ATF, através da indução da produção de IFN-γ, foi capaz de reverter parcialmente a produção de IL-10 induzida pelas células tumorais, estabelecendo um microambiente menos favorável ao desenvolvimento do tumor. / Abstract: The acid treated fraction (ATF) is a polysaccharidic (1-6)-β-D-glucan-rich fraction obtained from A. brasiliensis, with putative immunostimulatory activity. The present study was undertaken to examine the effect of ATF on cytokine production and expression of mRNA of angiogenic factors in the microenvironment of subcutaneous Ehrlich tumor mass. BALB/c mice were subcutaneously inoculated with Ehrlich tumor cells (day zero), followed by in situ administration of sterile salt solution (group Ehr) or with 0,5 mg/0,1mL of ATF (group Ehr/ATF) on day 3, 4 and 5. These animals were sacrificed on the 7th or 14th day for evaluations. Tumor tissue was removed to obtain infiltrated cells and for analyze the number of cytokine producing cells (ELISPOT). The pro-angiogenic factor were analyzed by real time PCR and phenotype of infiltrated immunocompetent cells was analyzed by confocal microscopy. On the 7th day, increased number of IL-4 and IFN-γ- producing cells was observed in the Ehr/ATF group. On the 14th day Ehr group showed increased number of IL-10-producing cells, whereas this occurrence was avoided by treatment with ATF (Her/ATF). Treatment also increased the number of IFN-γ producing cells in that time. These data are in accordance with the stronger labeling of tumor tissue for CD8 and Mac-3. Concerning to angiogenic factor, on the 7th day, the treatment decreased the FGF-2 mRNA expression by tumor tissue. In summary, our data allow us to conclude that ATF was able to partially reverse the production of IL-10 induced by tumor cells, through the induction of higher levels of IFN-γ-producing cells, perhaps establishing a more efficient immunoresponsiveness against tumor. / Doutor

Orientador: Olga Maria Mascarenhas Faria de Oliveira / Coorientador: José Carlos Rebuglio Vellosa / Banca: Taís Maria Bauab / Banca: Mariza Pires de Melo / Resumo: O excesso na geração de espécies reativas como os radicais livres pode resultar num desequilíbrio que, embora benéfico em situações como o combate a micro-organismos patógenos, está implicado com diversas patologias crônicas e com o envelhecimento. Assim é comum a indicação de compostos antioxidantes para a prevenção destas patologias e inclusive, algumas pesquisas com substâncias antioxidantes já resultaram no desenvolvimento de novos medicamentos. Desta forma, o estudo de fontes naturais que apresentam substâncias ativas sobre as diferentes espécies oxidantes geradas em nosso organismo é de grande importância, visto as implicações destas em várias patologias. Entre estas fontes, Agaricus blazei Murrill é um cogumelo comestível e medicinal, popularmente utilizado na prevenção do envelhecimento e no tratamento de diversas doenças, como câncer, artrite reumatóide, artrose, aterosclerose, diabetes e hipertensão. Tem sido relatado também, o uso de outros cogumelos como Agaricus bisporus (champignon), Lentinus edodes (shiitake) e Pleurotus ostreatus (shimeji ou hiratake), de forma similar ao Agaricus blazei. Além da função nutricional desse cogumelo é importante verificar possíveis atividades biológicas, o que poderia render novos produtos com alegações de propriedades funcionais ou terapêuticas, como as já existentes para o A. blazei. Assim, este projeto objetivou o estudo do perfil de atividade antioxidante (químico, enzimático e ex vivo) e análise de atividade antibacteriana de três cogumelos cultivados no Brasil em comparação com o Agaricus blazei Murrill. Foram utilizadas metodologias de análise de atividade antioxidante como os ensaios de ação scavenger do DPPH·, ABTS·+, O2 ·-, NO, H2O2 e HOCl, e também por análise do sistema oxidativo catalisado por mieloperoxidase (MPO) e... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The excessive generation of reactive oxygen species, like free radicals, can lead to an imbalance which, although benefical in such situations to combat pathogenic microorganisms, is involved with various chronic diseases and aging. Thus, it is common to indicate the use of antioxidants for prevention of these diseases, and some research about antioxidant products have already resulted in the development of new medicines. Thus, the study of natural sources that contain active compounds over the different oxidant species, generated in our bodies, is of great importance, due their implications in various pathologies. Among these sources, Agaricus blazei Murrill is an edible and medicinal mushroom, commonly used in the prevention of aging and the treatment of various diseases such as cancer, rheumatoid arthritis, osteoarthritis, atherosclerosis, diabetes and hypertension. It has also been reported, the use of other Agaricus bisporus (champignon), Lentinus edodes (shiitake) and Pleurotus ostreatus (shimeji or hiratake), similar to Agaricus blazei. Besides its nutritional properties, it is important to check possible biological activities, which could render functional property claims as those existing for the A. blazei. Thus, mushrooms such as this project aims to study the profile of antioxidant activity (chemical, enzymatic and ex vivo) of mushrooms cultivated in Brazil, comparing to Agaricus blazei Murrill. Antioxidant activities were evaluated through DPPH·, ABTS·+, O2 ·-, NO, H2O2 and HOCl and also by analysis of the oxidative system catalyzed by myeloperoxidase (MPO) and horseradish peroxidase (HRP). In relation to cellular analysis and antibacterial, it was determined toxicity erythrocytes and neutrophils, and activity in relation to Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Satoshi Tobinaga / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-21T06:49:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Paschoaleti_ClaudiaCristina_M.pdf: 1735630 bytes, checksum: 30fdb256e7643980481bf304f0d7444b (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: Desenvolveu-se um estudo experimental de secagem do cogumelo, tipo champignon (Agaricus bisporus). As corridas experimentais foram conduzidas em secador hermético com corrente de ar a temperatura de 35°C, com umidade relativa média de 9,8% e velocidade de l,05m/s. Na faixa de umidade de 95-12% (em base seca), a curva de secagem não apresentou a fase de taxa constante, e apresentou 2 fases na taxa decrescente, e os cogumelos apresentaram escurecimento e enragamento de suas superfícies. A solução analítica foi obtida adotando a lei de Fick com difusividade efetiva constante para geometria semi-esférica. Para cada instante, o valor do perfil médio de umidade foi obtido utilizando os softwares EUREKA e o Lotus 1-2-3 versão 4, Os perfis de umidade assim calculados foram comparados com os experimentais, obtendo-se uma boa concordância entre eles, com erro mínimo médio de 1,8% paia o período de taxa decrescente. Os valores de difusividade efetiva obtidos do ajuste do perfil de umidade experimental e calculado foram de 2,0x10-3 cm2/h para a 1ª fase da taxa decrescente e de l,0x l0-3 cm2/h para a 2ª fase / Abstract: Wide champignons (Agaricus hisporus) were dryed in an airtight chamber with air at 35ºC, 9.8% relative humidity and 1.05 m/s average velocity. During the experiments champignons were dryed from 95% to 12% (dry basis) and drying curves exhibited two decreasing ranges only. The final product showed intense browning and surface shrinking. The process was assumed controlled by diffusion and therefore theoretical analysis was made based on Ficks'second law with constant effective diffusivity applied to semi-spherical geometry. The time dependent moisture profile was evaluated from spatial average of exact solution by use of EUREKA and version 4 Lotus 1-2-3 softwares. Analytical solution for humidity profile fitted very well to the experimental data. Average minimal error was 1,8% for decreasing range. The results obtained for effective difusivity were 2,0 x 10-3 and 1,0 x 10-3 in the first and second phases of dreping curve respectivelly / Mestrado / Mestre em Engenharia de Alimentos

Orientador: Pilar R. de Massaguer / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-19T02:09:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mohallem_MariadeLourdes_M.pdf: 5416429 bytes, checksum: 194b9c9d51d7542051031baf8d942e81 (MD5) Previous issue date: 1994 / Resumo: O presente trabalho propôs estabelecer os parâmetros do processamento térmico utilizando-se a nisina como coadjuvante térmico no homogeneizado de cogumelos em salmoura 1,5% {p/v) pH 6,2 (HC). 0 meio HC simula uma conserva comercial não acidificada. O microrganismo alvo da destruição termoquímica foi o Bacillus stearothermophilus FS 1518. Seus esporos foram obtidos à partir de uma solução estoque e produzidos no meio Agar Nutriente {AN) contendo 5 ppm de sulfato de manganês {PFLUG, 1982}. Esta metodologia mostrou-se mais eficaz que aquela preconizada por KIM & NAYLOR (1966) . A ativação ótima para a germinação foi determinada e ficou estabelecida como 5 minutos à temperatura de ebulição nos meios de subcultura estudados. O meio Caldo Nutriente (CN) foi eleito para estudar o efeito da nisina na germinação e no crescimento pó-germinativo porque melhor se adequou ao método espectrofotométrico de redução de absorbância. Constatou-se que a nisina não inibe a germinação destes esporos. Sua inibição é posterior à germinação. Concentrações de nisina maior ou igual a 50 UI/ml inibiram a crescimento pós-germinativo. A Menor Concentração Inibitória (MCI} de nisina para as células de B. stearothermophilus FS 1518, em uma população de 106 UFC/ml, foi de 50 UI/ml. A metade da MCI foi adicionada no meio HC inoculado com os esporos para a determinação da sua resistência térmica. A redução da resistência térmica, empregando-se o meio AN para a subcultura, foi de 19, 36 e 44% nas temperaturas de 125°, 121º e 118ºC respectivamente. O índice de temperatura encontrado foi 11,66 e 9,15 com e sem nisina, respectivamente. O valor de esterilização requerido para causar 5 reduções decimais a partir de uma população de 7000 esporos/250g produto decresceu, aproximadamente, em 36% à temperatura de 121 ºC com a nisina. Estes dados comprovam a sua eficiência na redução da resistência térmica destes esporos, quando inoculados no mexo HC e nos fornece o valor de esterilização requerido para o processamento desta conserva nestas condições / Abstract: The present work intended to establish the microbiological parameters for process using nisin as a thermal adjuvant in a homogenate of mushrooms in brine 1.5 per cent (p/v) pH 6.2 (HM). The HM simulates a low-acid processed product. The target microorganism for the thermo-chemical destruction was Bacillus stearotherraophilus FS 1518. The spore suspension was obtained from a stock suspension and produced in Nutrient Agar (NA) supplemented with 5 ppm of Manganese Sulfate (PFLUG, 1982). This methodology showed to be more efficient than the one standardized by KIM & NAYLOE (1966). It was determined the optimum conditions of activation for germination on the subculture medium studied. It was found that the optimum activation time was 5 minutes at boiling temperature. Nutrient Broth was chosen as the culture medium to study the effect of nisin on the germination and post-germinative growth, because it showed to be the most adequate to the spectrophotometry method of absorbance reduction. It was observed that nisin does not inhibit germination of such spores. Its inhibiting action occurs after the germination phase. Nisin Minimum Inhibitory Concentration (MIC) for B. stearothermophilus FS 1518 in apopulation of 106 CFU/ml was 50 UI/ml. Half of this MIC was added to the HM medium previously innoculated with the spores to determine its thermo-chemical resistance. The thermo-chemical resistance reduction using HA medium for subculturing was 19, 36 and 44 per cent for temperatures of 125, 121 and 118°C, respectively. The Z-value found was 11.66 and 9.15"C with and without nisin, respectively. The sterilization value required (F) to cause 5 decimal reduction on the initial population of 7000 spores per 250 g of product decreased approximately 36 per cent at 121ºC with nisin. These data prove the efficiency of nisin in reducing the thermal resistance of such spores when inoculated in HM medium, and it also provides the F-value for processing the product in the studied conditions. / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos

Orientador: Meire Cristina Nogueira de Andrade / Coorientador: Leonardo de Barros Pinto / Banca: Geisiany Maria de Queiroz-Fernandes / Banca: Jose Raimundo de Souza Passos / Resumo: O cultivo de cogumelos comestíveis, como o Pleurotus ostreatus (shimeji), vêm se expandindo no Brasil devido as suas características nutricionais, medicinais e possibilidade de empregar técnicas rústicas para o seu cultivo. Um dos fatores que influenciam este cultivo é a qualidade do inóculo. Alguns produtores acreditam que as sucessivas repicagens de um micélio resultam em perda de vigor e consequente queda na produtividade, porém a literatura carece de informações referentes a essa questão. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a produtividade, expressa pela perda de matéria orgânica, massa do basidioma fresco, eficiência biológica, número de cachos, atividade enzimática e caracterização química do substrato do inóculo de P. ostreatus em função de repicagens sucessivas, em três linhagens diferentes (SB, MB e CP3), cada qual com quatro tratamentos (I1, I2, I3 e I4, correspondendo aos inóculos repicados sucesssivamente), bem como analisar o processo de produção de inóculo e sua sustentabilidade sob o ponto de vista emergético. A linhagem SB apresentou os melhores resultados de produtividade, com uma massa média de 513 g, as linhagens MB e CP3 não diferiram estatisticamente entre si quanto à produtividade, com massa média de 371 g e 310 g, respectivamente. A linhagem CP3 produziu cogumelos maiores que as demais, com uma massa média de 278 g por cacho, enquanto a linhagem SB obteve uma massa média de 218 g por cacho e a linhagem MB 185 g por cacho. As repicagens suces... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The cultivation of edible mushrooms, such as the Pleurotus ostreatus (shimeji), has been expanding in Brazil due to its nutritional and medicinal characteristics, as well as the possibility of employing rustic techniques for its cultivation. One of the factors that influence this cultivation is the quality of the spawn. Some producers believe that the successive multiplications of the mycelium results in a loss of vigor and consequently a decline in productivity, however the literature lacks information regarding this issue. Therefore, the objective of this study was to evaluate the productivity, expressed by the loss of organic matter, fresh basidioma mass, biological efficiency, number of fruiting bodies, enzymatic activity and chemical characterization of the substrate of the Pleurotus ostreatus spawn as a function of successive multiplications, in three different strains (SB, MB and CP3), each with four treatments (I1, I2, I3 and I4, corresponding to the successively multiplied spawns), as well as to analyse the spawn production process and its sustainability under the emergetic point of view. The SB strain presented the best productivity results, with an average mass of 513 g, the MB and CP3 strains did not differ statistically among each other regarding productivity, with an average mass of 371 g and 310 g, respectively. The CP3 strain resulted in larger mushrooms than the others, with an average mass of 278 g per bunch, whereas the SB strain resulted in a mass of 218 g per bunch and the MB strain resulted in 185 g per bunch. The successive multiplications did not affect the size of the mushrooms. The spawns presented a similar behaviour on the substrate according to the data of enzymatic activity and chemical characterization of the substrate, indicating that the successive multiplications did not affect the behaviour of the fungi on the substrate. The data suggests that until the fifth ... / Mestre