Thesis (Ph. D.)--University of California, Riverside, 2009. / Includes abstract. Includes bibliographical references. Issued in print and online. Available via ProQuest Digital Dissertations.

Este trabajo presenta los resultados de la investigación sobre la preparación y caracterización de las metilcelulosas a partir de las plantas anuales.Las pastas del miscanthus, el cardo, y el eucalipto, se prepararon mediante el proceso IRSP (Impregnation Rapid Steam Pulping) y se blanquearon con las secuencias del TCF (Total Chloride Free), que usan peróxido de hidrógeno y hidróxido de sodio (NaOH). Con el aumento de la severidad del proceso de obtención de las pastas, la accesibilidad y la reactividad de las pastas aumentaron mientras que la viscosidad y el número de la kappa disminuyeron. Se desarrolló un nuevo y sencillo método de metilación para preparar las metilcelulosas a partir de la madera y las plantas anuales en el laboratorio. Cada metilcelulosa de las pastas blanqueadas con las secuencias del TCF se sintetizó en una mezcla de isopropanol con metano de yodo a 600C durante 22 horas después la pasta del TCF se mercerizó en una solución del hidróxido de sodio al 40% durante 1 hora. La mercerización y la metilación se repitieron para obtener un grado de sustitución (DS) más alto. Los resultados de la espectroscopía infrarroja de transformada de Fourier (FTIR) (Fourier Transform Infrared Spectroscopy) mostraron que los grupos del OH de la celulosa habían sido sustituidos parcialmente por grupos del metoxil. Los modelos de sustitución supramolecular de las metilcelulosas se determinaron mediante espectroscopía de resonancia magnética nuclear del carbono-13. La viscosidad intrínseca de las metilcelulosas se midió con agua destilada, una solución al 4% de NaOH, o DMSO. Las propiedades reológicas de las metilcelulosas se midieron con DMSO, una solución al 4% de NaOH o agua destilada. Las metilcelulosas sintetizadas tenían unas propiedades similares a las metilcelulosas comerciales. Los volúmenes hidrosolubles y alcalinosolubles de la metilcelulosas se determinaron mediante extracción con disolventes.Las metilcelulosas se prepararon a partir de pastas de lino, yute, cáñamo, sisal, y abacá mediante metilaciones heterogéneas y homogéneas. Estas pastas se blanquearonmediante el proceso ECF (Elemental Chlorine Free). La mutilación inhomogénea de las pastas blanqueadas mediante el proceso ECF se sintetizó en una mezcla de isopropanol con metano de yodo a 600C durante 22 horas después la pasta del ECF se mercerizó durante 1 hora en una solución de NaOH al 50%. La mutilación homogénea de la pasta blanqueada mediante ECF se realizó en DMSO con metano de yodo a 300C durante 48 horas. Para esta metilación homogénea se usó una metilcelulosa con un grado de sustitución más bajo, que se disolvió completamente en DMSO. La espectroscopía infrarroja de transformada de Fourier (FTIR) de las metilcelulosas mostró la existencia de grupos de metoxiles sobre las moléculas de metilcelulosa. Se utilizó la espectroscopia de resonancia magnética nuclear del carbono 13 para medir los grados de sustitución de las metilcelulosas. Los pesos moleculares de las metilcelulosas hidrosolubles se determinaron con la cromotagrafía de exclusión por tamaños (SEC). Las viscosidades intrínsecas se midieron en una solución de NaOH al 4%. Las metilcelulosas preparadas a partir de pastas de elevadas accesibilidades y reactividades tenían las mejores grados de sustitución, pesos moleculares, viscosidades y viscosidades intrínsecas.Se investigaron las accesibilidades y reactividades de las pastas del ECF. Los volúmenes de glucosa y de xilosa de estas pastas se determinaron mediante HPLC (High performance liquid chromatography) después de la hidrólisis. Las accesibilidades de adsorción de yodo de estas pastas eran bajas y sus fragmentos accesibles estaban entre el 1,31% y el 5,16%. En la región amorfa, sus fragmentos accesibles estaban entre el 5% y el 24%. Las imágenes del SEM (Scanning Electrón Microscopy) mostraron que sus fibrillas tenían distintas estructuras morfológicas. Los resultados de la espectroscopía infrarroja de transformada de Fourier (FTIR) mostraron que, después de los pretratamientos, habían disminuido tanto la media de la intensidad de los enlaces de hidrógeno como los índices de cristalinidad relativos. Sus reactividades aumentaron significativamente después de la mercerización preliminar. Las accesibilidades y reactividades de la pasta del abacá se mejoraron con los tratamientos de impregnación con agua, la mercerización a 15 bares de presión, la explosión de vapor y la mercerización preliminar. La desintegración, el incremento de los huecos, el debilitamiento de la intensidad de los enlaces de hidrógeno, la depolimerización, y la decristalización son esenciales para mejorar las accesibilidades y las reactividades, pero el factor decisivo es la especie de la planta.Hemos estudiado los factores que influyen en el peso molecular (Mw) de las metilcelulosas hidrosolubles preparadas a partir de plantas anuales. El tiempo y la temperatura de impregnación y las condiciones de cocción influyeron de manera diferente en el peso molecular (Mw) de metilcelulosas preparadas a partir de los cardos recogidos en primavera y en verano, el miscanthus y el eucalipto. Se compararon los efectos de los pretratamientos (la impregnación con agua, la mercerización preliminar, la mercerización con presión y la explosión de vapor) en la pasta del abacá. Cuando se pretrató la pasta del abacá, su metilcelulosa hidrosoluble consiguió un peso molecular más alto. De entre los pretratramientos analizados, la explosión de vapor resultó el más adecuado. Para conseguir metilcelulosas con un peso molecular más alto deben perfeccionarse las condiciones de la preparación de las pastas blanqueadas mediante ECF. La especie de las plantas es el factor decisivo para conseguir el peso molecular más alto de las metilcelulosas y para seleccionar los pretratamientos más adecuados.Los parámetros del proceso de obtención de pastas, las condiciones de la metilación, las especies de las plantas, los pretratamientos, y la estructura morfológicas de las pastas influyó en los grados de sustitución de las metilcelulosas preparadas a partir de plantas anuales. Una severidad de impregnación más alta, una temperatura del proceso de obtención de pastas más alta y un incremento del tiempo del mismo proceso consiguieron grados de sustitución más altos. Un aumento de reactivos de la metilación causó un aumento de grado de sustitución. Las pastas obtenidas de distintas especies produjeron grados de sustitución diferentes, trabajando con las mismas condiciones de metilación. Los pretratamientos aumentaron el grado de sustitución de las metilcelulosas.Esta investigación contribuye a encontrar las condiciones apropiadas para metilcelulosas diseñadas a medida, sintetizadas a partir de plantas anuales. Esta investigación demuestra que estas plantas tienen la capacidad de ser preparadas para conseguir metilcelulosas de alta calidad y de alto valor aptas para distintas aplicaciones, como la industria alimentaria, la de la construcción o la farmacéutica. La industria puede utilizar estas plantas anuales de crecimiento rápido para producir metilcelulosas, con lo que, además, se evitará el uso de madera.Palabras clave: abacá, accessibilidad, blanqueo mediante TCF, cáñamo, cardo, eucalipto, grado de sustitución, lino, metilación, metilcelulosa, miscanthus, peso molecular, plantas anuales, proceso de obtención de pasta IRSP, sisal, yute. / Preparation and characterization of methylcelluloses from some annual plantswere investigated.Miscanthus, cardoon, and eucalyptus pulps were produced by Impregnation Rapid Steam Pulping (IRSP) process and bleached by Total Chloride Free (TCF) sequences using hydrogen peroxide and sodium hydroxide. With an increase of pulping severities, accessibilities and reactivities of bleached pulps increased while viscosities and kappa numbers decreased. A novel facile methylation was developed in order to prepare methylcelluloses from wood and annual plants. Each methylcellulose of TCF bleached pulps was synthesized in isopropanol slurry with iodomethane at 600C for 22 hours after the TCF bleached pulp was mercerized in 40% NaOH solution for 1 hour. The mercerization and methylation were repeated in order to obtain a higher degree of substitution (DS). Fourier Transform Infrared (FTIR) spectra showed OH groups of cellulose were partially substituted by methoxyl groups. Supramolecular substitution patterns of methylcelluloses were determined by 13C nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy. Intrinsic viscosities of methylcelluloses were measured in distilled water, 4% NaOH solution, or dimethyl sulphoxide (DMSO). Rheological properties of methylcelluloses were measured in DMSO, 4% NaOH solution or distilled water, in which the synthesized methylcelluloses had similar properties as commercial methylcelluloses. Watersoluble and alkali-soluble contents of methylcelluloses were determined by solventextraction.We used iodomethane to synthesize methylcelluloses from Elemental Chloride Free (ECF) bleached abaca, hemp, flax, jute, and sisal pulps via heterogeneous and homogeneous methylations. The heterogeneous methylation was carried out in isopropanol with iodomethane at 600C for 22h after a ECF bleached pulp was mercerized in excessive 50% NaOH solution for one hour at ambient temperature. The homogeneous methylation was carried out in dimethyl sulfoxide with iodomethane at 300C for 48h using a methylcellulose of low degree of substitution. Fourier Transform Infrared (FTIR) spectra of the synthesized methylcelluloses showed the existence of methoxyl groups on methylcellulose molecules. The degrees of substitution of the synthesized methylcelluloses were measured by 13C Nuclear Magnetic Resonance (NMR) spectroscopy. The molecular weights of the waterVI soluble methylcelluloses were determined by Size Exclusion Chromatography (SEC). Intrinsic viscosities of the synthesized methylcelluloses were measured in 4% NaOH solution. Methylcelluloses with better properties, such as greater degrees of substitution, molecular weights, viscosities, and intrinsic viscosities, were prepared from the pulps with higher accessibilities and reactivities. The factors influencing the preparation of methylcelluloses from these pulps were discussed.Pretreatments (water-soaking, pre-mercerization, mercerization under a pressure of 15 bars, and steam explosion) were used to improve the accessibilities and reactivities of celluloses of bleached flax, hemp, sisal, abaca, and jute pulps for the synthesis of methylcellulose. Glucose and xylose contents of these pulps were determined by High Performance Liquid Chromatograph (HPLC) after hydrolysis. Degrees of crystallinity of these pulps were determined by X-ray Diffraction (XRD) spectra. Figures of Scanning Electron Microscope (SEM) showed that their fibrils had different morphological structures. The iodine adsorption accessibilities of these pulps were low and accessible fractions ranged from 1.3% to 5.2%. Accessible fractions in amorphous cellulose were calculated in the 5% to 18% range. The accessibilities of these pulps were hemp pulp > flax pulp > sisal pulp > jute pulp > abaca pulp. Fourier Transform Infrared (FTIR) spectra showed that mean hydrogen bond strengths were weakened and relative crystallinity indexes were decreased by pretreatments. The accessibility and reactivity of the abaca pulp were improved by water soaking, mercerization under 15 bars pressure, steam explosion and preliminary mercerization, of which steam explosion and pre-mercerization were thebest treatments. Species was the main factor for the accessibility and reactivity.We studied the factors that influenced the molecular weights (Mw) of watersolublemethylcelluloses prepared from annual plants and juvenile eucalyptus. Miscanthus and cardoon stalks, and bleached pulps of abaca, jute, sisal, hemp, and flax were used as the annual plant materials. A higher concentration of NaOH solution during the impregnation led to a spring cardoon methylcellulose having a lower molecular weight. As the impregnation times increased, so did the molecular weights of the water-soluble methylcelluloses of spring cardoon. The impregnation conditions had less influence on the methylcelluloses of summer cardoon than on the methylcelluloses of spring cardoon. As the cooking times increased, so did the molecular weights of miscanthus methylcelluloses. A lower pulping severity increased the molecular weight of eucalyptus methylcellulose. The preliminary treatments (water soaking, pre-mercerization, mercerization under pressure andsteam explosion) improved the molecular weights of water-soluble abaca methylcelluloses. The steam explosion method was the best of the preliminary treatments for the abaca pulp. Different species led to different molecular weights for methylcelluloses synthesized from ECF bleached pulps, and these were further improved by preliminary mercerization. The molecular weight of -cellulose methylcellulose changed as the ratio of the methylation reagent was varied. In order to synthesize an optimum Mw of methylcellulose, the different raw materials can be chosen, the pulping parameters adjusted (including impregnation and cooking), the cellulose pretreated, and the methylcellulose conditions changed. The plant species is the decisive factor for the Mw of methylcellulose.The pulping parameters, the methylation conditions, the species, the pretreatments, and the morphological structures of pulps influenced the degrees of substitution of the methylcelluloses prepared from the annual plants. A higher impregnation severity, a higher pulping temperature, and a longer pulping time caused a higher degree of substitution. An increase of methylation reagents led to an increase of degree of substitution. Methylcelluloses of different degrees of substitution were synthesized from the pulps of different species when a same methylation condition was used. The pretreatments increased the degrees of substitution of methylcelluloses.This investigation contributes to find appropriate conditions for the production of methylcellulose from annual plants. The present investigation demonstrates these annual plants have the capacities to produce upgraded and high quality methylcelluloses for varied applications, such as additives of foods, construction, pharmaceutics, polymerization, paints, and detergents etc. The industry can utilize these annual fast-growth plants to produce methylcelluloses. Therefore, a lot of wood will be saved.Keywords: abaca, accessibility, annual plants, cardoon, degree of substitution, eucalyptus, flax, hemp, IRSP pulping, jute, methylation, methylcellulose, miscanthus, molecular weight, sisal, steam explosion, TCF bleaching.

L'artichaut et le cardon, appartenant à la famille des Asteraceae (Compositae), sont des plantes pérennes herbacées natives du bassin méditerranéen, et qui sont traditionnellement cultivées comme plantes maraîchères, respectivement pour leurs têtes et leurs cardes. L'Italie est le pays possédant la plus importante collection de germoplasmes autochtones d'artichaut. Dans le centre de l'Italie, le type Romanesco est étendu. Ces dernières années, le développement des techniques in vitro a permis la multiplication de l'artichaut Romanesco et sa rapide expansion. Le clone Romanesco C3 a ainsi remplacé de nombreuses races locales de Romanesco, contribuant de la sorte à une érosion significative des ressources génétiques locales. Concernant le germoplasme de cardon cultivé, seules quelques études sont disponibles sur son identification et sa caractérisation génétique. Le cardon sauvage, n'est pas du tout cultivé; il est davantage considéré comme une adventice dans le paysage italien. La grande variabilité existant entre les espèces de Cynara n'est pas correctement décrite et il existe plusieurs cas d'homonymes. Le secteur de l'artichaut italien a du faire face ces dernières années à une crise causée principalement par l'apparition sur le marché de produits étrangers et par les coûts élevés de mise en culture et de récolte. Afin de surmonter cette crise, de nombreuses valorisations du Cynara ont été envisagées. Ces potentielles applications pour la culture ont pu voir le jour grâce au support de l'Union européenne pour la recherche sur les co-poduits issus de l'agriculture, et ont mené à un intérêt croissant pour la biomasse entière d'artichaut. Considérant ces remarques préliminaires, une stratégie, qui permettrait de valoriser le germoplasme italien par la production concomitante de biomasse et de biocomposés, a été mise en place durant ces trois ans de doctorat. Le premier objectif de ce travail de doctorat consistait en i) la caractérisation agro-morphologique du germoplasme italien par le biais de descripteurs UPOV, ii) l'évaluation de la variabilité génétique à l'intérieur et entre les races/clones et iii) l'identification et la préservation des ressources génétiques pour le développement de futurs programmes d'amélioration des plantes. Suite à cette caractérisation, trois génotypes ont été sélectionnés et enregistrés sous les noms de Michelangelo, Donatello and Raffaello. Afin d'analyser le germoplasme italien de Cynara d'un point de vue de la biomasse, différents traits expliquant la vigueur de la plante et la production de matière sèche ont été considérés. Le rendement en biomasse aérienne s'est révélé très élevé, soulignant la possibilité d'utiliser cette culture comme matière première industrielle. Un point particulier du programme de thèse était de mettre au point les méthodes d'extraction de biocomposés et les techniques d'analyse afin d'optimiser le rendement en polyphénols à partir de la biomasse de Cynara à l'échelle laboratoire. L'ASE a été reconnue comme étant la meilleure technique. De plus, les cinétiques de production de biomasse et de biocomposés ont été évaluées et le stade physiologique optimal pour collecter le matériel végétal en champ a été identifié. La caractérisation biochimique a été réalisée grâce aux méthodes mises au point et en collectant le matériel végétal au stade physiologique optimal identifié afin de distinguer les génotypes les plus appropriés pour la production de biocomposés. Le dernier point du programme de thèse était centré sur le développement d'une technique alternative de production de biomasse et de biocomposés en conditions de croissance sous serre. Les résultats obtenus mettent en exergue la possibilité d'utiliser avec succès certains génotypes de Cynara pour la production de biomasse et de biocomposés. La perspective réelle d'utiliser certains génotypes d'artichaut pour une double valorisation alimentaire et non-alimentaire a ainsi été soulignée. / Globe artichoke and cardoon, belonging to the Asteraceae (Compositae) family, are herbaceous perennial plants native to the Mediterranean area, which are traditionally grown as vegetables for the heads and the fleshy petiole leaves, respectively. Italy is the richest reserve of globe artichoke autochthonous germplasm, which is vegetatively propagated and well adapted to the different pedoclimatic conditions of the Country. In Central Italian environments, the Romanesco type is widespread. In the last years, the development of in vitro technologies allowed the propagation of Romanesco globe artichoke type and its rapid expansion. As a result, the micropropagated Romanesco clone C3 has replaced many landraces traditionally grown in the Latium Region and has led either to a significant erosion of local genetic resources. As regards Italian cultivated cardoon germplasm, there are few studies on its genetic characterization and identification and there is a lack of information about the genetic variability existing within and among accessions. For the wild cardoon, no specialized crop is present and it represents mainly a weed in Italian environments. The great variability existing in Cynara spp. has not been described, the nomenclature of Italian germplasm is not always very clear since there are many cases of homonyms. In addition, Italian globe artichoke sector is facing a crisis due principally to the appearance on the market of foreign products and to the high labor cost required for crop cultivation and harvesting. In order to overcome this crisis several possible industrial uses were considered for the species. Considering these preliminary remarks, a strategy for valorizing Italian germplasm using biomass and biocompound production has been carried out during the three years of PhD program. The first objective of PhD work consisted in (i) characterizing agro-morphologically Italian germplasm using UPOV descriptors, (ii) assessing the genetic variability existing within and among landraces/clones and (iii) identifying and preserving genetic resources for the development of future plant breeding programs. As a result of this characterization, three genotypes have been selected and registered under the names of Michelangelo, Donatello and Raffaello. In order to analyze Italian Cynara spp. germplasm also from a biomass point of view, different traits explaining plant vigor and dry matter production have been considered. The aerial biomass yield resulted very high underlining the possibility of using this crop as raw industrial material. A focal point of PhD program was to set up biocompound extraction methods and analysis techniques to optimize polyphenol recovery from biomass of Cynara spp at a laboratory scale. In particular, ASE was found as the best extraction technique which allows to reduce extraction time and solvent consumption, increase nutraceutical yield and improvement of extract quality. Moreover, the kinetics of biomass and bio-compound production has been evaluated and the optimal physiological stage to collect plant material grown in open field has been identified. Biochemical characterization has been performed using the methods set up and collecting plant material in the optimal physiological stage identified in order to distinguish which genotypes were more suitable for bio-compound production purpose. The last focal point of PhD program was the development of an alternative technique for biomass and biocompound production in greenhouse grown conditions. Results obtained in the three PhD years, highlighted the possibility of using successfully some Cynara spp. genotypes for biomass and bio-compound production, in particular in open field condition. Also the real prospect of using some globe artichoke genotypes for food and non-food dual-production (biomass for biocompound extraction and heads for human food) has been underlined.