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Avaliação da contaminação microbiológica de drogas vegetais e potencial descontaminação por plasma / Evaluation of microbiologic contamination of vegetable drugs and decontamination potential by plasma

Souza, Siliane Bertoni Kalkaslief de 24 August 2007 (has links)
A qualidade, eficácia e segurança no emprego de drogas vegetais dependem, entre outras questões, de sua qualidade sanitária. Sua origem e manuseio, em condições no geral inadequadas, propiciam biocarga elevada e abrangente, o que implica riscos para saúde. O presente trabalho objetivou conhecimento da microbiota das plantas estudadas e o desenvolvimento de estudos de sua descontaminação por plasma, tendo-se analisado os parâmetros físicos que influenciaram este processo. O projeto possibilitou a descontaminação de drogas vegetais com alta carga microbiana. Estudou-se a alcachofra (Cynara scolymus L.), camomila (Chamomilla recutita (L.) Rauschert.), ginco (Ginkgo biloba L.) e guaraná (Paullinia cupana Kunth), adotando parâmetros de processo que alegadamente permitem a integridade dos princípios ativos termossensíveis. Para isso, foi empregado reator disponível no Laboratório de Sistemas Integráveis, pertecente à Escola Politécnica da Universidade de São Paulo, em sistema com acoplamento capacitivo modo RIE (Reactive Ion Etching). Neste sistema, trabalhou-se com oxigênio adicionado de peróxido de hidrogênio. Todos os processos de descontaminação foram desenvolvidos a temperatura ambiente, sob diferentes parâmetros físicos complementares. A eficácia do processo foi investigada, empregando-se contagem de microrganismos heterotróficos, assim como pesquisa de indicadores de patogênicos (Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella spp, Escherichia coli). As avaliações microbiológicas, quantitativas e qualitativas, assim como os estudos decorrentes dos dados obtidos, foram desenvolvidos no Laboratório de Controle Biológico da Faculdade de Ciências Farmacêuticas - USP. Os resultados obtidos após a descontaminação por plasma de oxigênio (100%), a potência de 150 W, evidenciaram redução de até 4 ciclos de aeróbicos totais. No processo por plasma peróxido de hidrogênio (20%) e oxigênio (80%), a uma potência de 150 W, observou-se a redução de até 4 ciclos log de aeróbios totais para as drogas vegetais deste estudo. A presença de substâncias químicas complexas da camomila, que contêm óleo volátil, flavonóides, aminoácidos, ácidos graxos, sais minerais, cumarinas, mucilagens e ácidos orgânicos, interferem no processo por plasma provavelmente em decorrência de a mucilagem formar um filme protetor, impedindo a difusão gasosa em ambos os processos por plasma. Assim, não só a camomila mas também o guaraná, com biocargas iniciais respectivamente de 6,6x106 UFC/g e 2,7x106 UFC/g, mantiveram-se com níveis de contaminação da mesma ordem de grandeza, após os desafios com plasma. A contagem bacteriana da alcachofra (fornecedor B), que foi submetida ao processo de descontaminação através do plasma O2 (100%), (potência de 150 W, pressão de 100 mTorr e vazão de 200 sccm), sofreu redução de dez vezes, independentemente do tempo do processo. Possivelmente este resultado, que aparenta inconsistência, decorre da ação apenas superficial do plasma. A descontaminação por processo de plasma de oxigênio e de peróxido de hidrogênio para a alcachofra (fornecedor B) não foi eficaz, devido à predominância de elementos lignificados. As amostras de alcachofra (fornecedor C), com baixa percentagem de vasos de xilema lignificados e fibras lignificadas evidenciaram a maior eficácia do processo por plasma, pois possibilitou grande difusão gasosa sobre as amostras. O estudo permitiu ainda concluir que à aplicabilidade do plasma na descontaminação de drogas vegetais depende da resistência dos microrganismos, mas igualmente das características da planta, sejam aquelas de natureza morfoanatômica, enzimática ou química. Estudos específicos devem ser desenvolvidos para cada situação. / The quality, effectiveness and safety of vegetal drugs usage depend, among others issues, on their sanitary quality. Their origin and handling, usually under inadequate conditions, propitiate high bioburden, what presents risks to health. This project aimed at the evaluation of the microbiota of the plants studied and the development of studies concerning their decontamination by plasma, after the analysis of the physical parameters that influence this process. This project made the vegetal drugs decontamination with high microbiana load possible. Artichoke (Cynara scolymus L.), chamomile (Chamomilla recufifa (L.) Rauschert), ginco (Ginkgo biloba L.) and guaraná (Paullinia cupana Kunth) were studied through parameters that allowed the integrity of thermal sensible active principies. The achievement of our purpose depended on the use of a reactor with RIE (Reactive Ion Etching) capacitive coupled systems, available in the Laboratory of Integrating Systems from Escola Politécnica, University of São Paulo. In this system we worked whith oxygen, whith hydrogen peroxide addition. All decontamination processes were developed at room temperature, under different complementary physical parameters. The process effectiveness was investigated using counting of heterotropic microorganisms, aswell as pathogenic register research (Sfaphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella spp, Escherichia coll). The microbiological, quantitative and qualitative evaluations, as well as the studies of the data obtained were developed in the Laboratory of Biological Control of Pharmaceutical Sciences Faculty - USP. The results obtained after decontamination by plasma , oxygen (100%) at 150 W potency, evidenced reduction of up to 4 cycles of total aerobics. In the process by plasma hydrogen peroxide (20%) and oxygen (80%) at 150 W potency, a reduction of up to 4 cycles of total aerobics was observed in vegetal drugs. The presence of chamomile chemical complex substances, which contain volatile oil, flavonoids, aminoacids, fatty acids, mineral salts, coumarins, mucilages and organic acids, interfere in the process by plasma, probably due to the fact that the muclilage forms a protective film, preventing the gaseous diffusion in both processes by plasma. Thus no only chamomile but also guaraná, whith initial bioburden of respectively 6,6x106 UFC/g and 2,7x106 UFC/g, kept similar contamination levels after the challenges whith plasma. The bacterial count of artichoke (supolier B), which was sumitted to decontamination process by plasma 02 (100%), (150 W potency, 100mTorr pressure and 200sccm) was reduced ten times, independently of the time of process. This apparently inconsistent result is possibly a consequence of a superficid plasma action. The decontamination by Oxygen and Hydrogen Peroxide plasma process for artichoke (supplier B) was not efficient due to the predominance of lignitic elements. The samples of artichoke from supplier C, whith low percentage of liginitic xylem vessels and fibres evidenced higer efficacy of the process by plasma, what eased great gaseous diffusion over thesamples of artichoke leaves (supplier C). Thus the study of plasma aplicability in vegetal drug decontamination depends not only of microorganisms resistence but also of the plant characteristics, either the morphopanatomic, enzymatic, or chemical ones. A specific study must then be developed for each situation.
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Avaliação da contaminação microbiológica de drogas vegetais e potencial descontaminação por plasma / Evaluation of microbiologic contamination of vegetable drugs and decontamination potential by plasma

Siliane Bertoni Kalkaslief de Souza 24 August 2007 (has links)
A qualidade, eficácia e segurança no emprego de drogas vegetais dependem, entre outras questões, de sua qualidade sanitária. Sua origem e manuseio, em condições no geral inadequadas, propiciam biocarga elevada e abrangente, o que implica riscos para saúde. O presente trabalho objetivou conhecimento da microbiota das plantas estudadas e o desenvolvimento de estudos de sua descontaminação por plasma, tendo-se analisado os parâmetros físicos que influenciaram este processo. O projeto possibilitou a descontaminação de drogas vegetais com alta carga microbiana. Estudou-se a alcachofra (Cynara scolymus L.), camomila (Chamomilla recutita (L.) Rauschert.), ginco (Ginkgo biloba L.) e guaraná (Paullinia cupana Kunth), adotando parâmetros de processo que alegadamente permitem a integridade dos princípios ativos termossensíveis. Para isso, foi empregado reator disponível no Laboratório de Sistemas Integráveis, pertecente à Escola Politécnica da Universidade de São Paulo, em sistema com acoplamento capacitivo modo RIE (Reactive Ion Etching). Neste sistema, trabalhou-se com oxigênio adicionado de peróxido de hidrogênio. Todos os processos de descontaminação foram desenvolvidos a temperatura ambiente, sob diferentes parâmetros físicos complementares. A eficácia do processo foi investigada, empregando-se contagem de microrganismos heterotróficos, assim como pesquisa de indicadores de patogênicos (Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella spp, Escherichia coli). As avaliações microbiológicas, quantitativas e qualitativas, assim como os estudos decorrentes dos dados obtidos, foram desenvolvidos no Laboratório de Controle Biológico da Faculdade de Ciências Farmacêuticas - USP. Os resultados obtidos após a descontaminação por plasma de oxigênio (100%), a potência de 150 W, evidenciaram redução de até 4 ciclos de aeróbicos totais. No processo por plasma peróxido de hidrogênio (20%) e oxigênio (80%), a uma potência de 150 W, observou-se a redução de até 4 ciclos log de aeróbios totais para as drogas vegetais deste estudo. A presença de substâncias químicas complexas da camomila, que contêm óleo volátil, flavonóides, aminoácidos, ácidos graxos, sais minerais, cumarinas, mucilagens e ácidos orgânicos, interferem no processo por plasma provavelmente em decorrência de a mucilagem formar um filme protetor, impedindo a difusão gasosa em ambos os processos por plasma. Assim, não só a camomila mas também o guaraná, com biocargas iniciais respectivamente de 6,6x106 UFC/g e 2,7x106 UFC/g, mantiveram-se com níveis de contaminação da mesma ordem de grandeza, após os desafios com plasma. A contagem bacteriana da alcachofra (fornecedor B), que foi submetida ao processo de descontaminação através do plasma O2 (100%), (potência de 150 W, pressão de 100 mTorr e vazão de 200 sccm), sofreu redução de dez vezes, independentemente do tempo do processo. Possivelmente este resultado, que aparenta inconsistência, decorre da ação apenas superficial do plasma. A descontaminação por processo de plasma de oxigênio e de peróxido de hidrogênio para a alcachofra (fornecedor B) não foi eficaz, devido à predominância de elementos lignificados. As amostras de alcachofra (fornecedor C), com baixa percentagem de vasos de xilema lignificados e fibras lignificadas evidenciaram a maior eficácia do processo por plasma, pois possibilitou grande difusão gasosa sobre as amostras. O estudo permitiu ainda concluir que à aplicabilidade do plasma na descontaminação de drogas vegetais depende da resistência dos microrganismos, mas igualmente das características da planta, sejam aquelas de natureza morfoanatômica, enzimática ou química. Estudos específicos devem ser desenvolvidos para cada situação. / The quality, effectiveness and safety of vegetal drugs usage depend, among others issues, on their sanitary quality. Their origin and handling, usually under inadequate conditions, propitiate high bioburden, what presents risks to health. This project aimed at the evaluation of the microbiota of the plants studied and the development of studies concerning their decontamination by plasma, after the analysis of the physical parameters that influence this process. This project made the vegetal drugs decontamination with high microbiana load possible. Artichoke (Cynara scolymus L.), chamomile (Chamomilla recufifa (L.) Rauschert), ginco (Ginkgo biloba L.) and guaraná (Paullinia cupana Kunth) were studied through parameters that allowed the integrity of thermal sensible active principies. The achievement of our purpose depended on the use of a reactor with RIE (Reactive Ion Etching) capacitive coupled systems, available in the Laboratory of Integrating Systems from Escola Politécnica, University of São Paulo. In this system we worked whith oxygen, whith hydrogen peroxide addition. All decontamination processes were developed at room temperature, under different complementary physical parameters. The process effectiveness was investigated using counting of heterotropic microorganisms, aswell as pathogenic register research (Sfaphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella spp, Escherichia coll). The microbiological, quantitative and qualitative evaluations, as well as the studies of the data obtained were developed in the Laboratory of Biological Control of Pharmaceutical Sciences Faculty - USP. The results obtained after decontamination by plasma , oxygen (100%) at 150 W potency, evidenced reduction of up to 4 cycles of total aerobics. In the process by plasma hydrogen peroxide (20%) and oxygen (80%) at 150 W potency, a reduction of up to 4 cycles of total aerobics was observed in vegetal drugs. The presence of chamomile chemical complex substances, which contain volatile oil, flavonoids, aminoacids, fatty acids, mineral salts, coumarins, mucilages and organic acids, interfere in the process by plasma, probably due to the fact that the muclilage forms a protective film, preventing the gaseous diffusion in both processes by plasma. Thus no only chamomile but also guaraná, whith initial bioburden of respectively 6,6x106 UFC/g and 2,7x106 UFC/g, kept similar contamination levels after the challenges whith plasma. The bacterial count of artichoke (supolier B), which was sumitted to decontamination process by plasma 02 (100%), (150 W potency, 100mTorr pressure and 200sccm) was reduced ten times, independently of the time of process. This apparently inconsistent result is possibly a consequence of a superficid plasma action. The decontamination by Oxygen and Hydrogen Peroxide plasma process for artichoke (supplier B) was not efficient due to the predominance of lignitic elements. The samples of artichoke from supplier C, whith low percentage of liginitic xylem vessels and fibres evidenced higer efficacy of the process by plasma, what eased great gaseous diffusion over thesamples of artichoke leaves (supplier C). Thus the study of plasma aplicability in vegetal drug decontamination depends not only of microorganisms resistence but also of the plant characteristics, either the morphopanatomic, enzymatic, or chemical ones. A specific study must then be developed for each situation.

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