Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-08-12Bitstream added on 2014-06-13T19:38:34Z : No. of bitstreams: 1 machado_ms_dr_botfmvz.pdf: 753288 bytes, checksum: 187c0d8cf0a2a6512626ff3476eafd08 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Respostas superovulatórias satisfatórias têm sido reportadas em éguas com o uso do Extrato de Pituitária Eqüina (EPE) e FSH purificado eqüino (eFSH), contudo as taxas de recuperação embrionária permanecem inconsistentes. O objetivo deste estudo foi avaliar as concentrações plasmáticas de estradiol, inibina, FSH e LH em éguas superovuladas com eFSH e EPE (em doses constantes ou decrescentes): antes, durante e imediatamente após o término da administração hormonal. Foram utilizadas seis éguas as quais foram submetidas aos seguintes tratamentos: Grupo I (GI) recebeu 25mg de EPE intramuscular (I.M.), Grupo II (GII) foram tratadas com EPE (I.M.) em doses decrescentes. No Grupo IIl (GIII), o EPE foi substituído por 12,5mg de eFSH (I.M.). O Grupo IV (GIV) foi utilizado como controle. Sangue foi coletado diariamente para avaliar as concentrações hormonais por radioimunoensaio. As coletas foram iniciadas dois dias antes da primeira aplicação medicamentosa, encerrando 48horas após a última ovulação do estro. As diferenças nos níveis plasmáticos hormonais foram comparadas utilizando-se o ANOVA, sendo considerada diferença estatística quando P0,05. O número médio de ovulações foi de 3,3; 4,8; 5,0 e 1,0 nos grupos 1 a 4, respectivamente, tendo sido maior (P<0,05) em todos os grupos superovulados em relação ao controle. As concentrações de estrógeno, inibina, FSH e LH não diferiram entre os grupos durante o período 1. No período 2, os valores de estradiol foram maiores (P<0,05) em éguas sob tratamento superovulatório com eFSH (GIII) 29,52pg/ml, os grupos I e II, apresentaram valores intermediários (GI: 16,75pg/ml, GII: 16,26pg/ml) e o GIV (7,78pg/ml) menor estatisticamente aos demais. Foi verificada uma correlação altamente positiva (R=0,615; P=0,01) entre os valores de estradiol e inibina, os quais, durante os tratamentos, foram maiores (P<0,05)... / Satisfactory superovulatory responses have been reported in mares with the use of equine pituitary extract (EPE) and purified equine FSH (eFSH), however embryo recovery rates are still inconsistent. Recent studies demonstrated that the superovulatory treatment disturbs oocyte maturation and transport. The main objective of the present study was to evaluate the plasmatic concentrations of estradiol, inhibin, FSH and LH in super ovulated mares treated with eFSH and EPE (with constant or decreasing doses): Six mares were used in a crossover experiment in four different groups: Group I mares received 25mg of EPE every twelve hours, Group II received EPE in decreasing doses and Group IlI mares received 12.5mg of eFSH (IM). Group IV served as control. Embryo flushes were performed 8 days pos ovulation. Blood was collected daily to evaluate hormonal concentrations through radioimuneassay, starting two days before the first administration, until 48 hours post-ovulation. Mean and daily hormonal concentrations of estradiol, inhibin, FSH and LH were evaluated. Hormonal concentrations were submitted to statistical analysis using ANOVA. Significance levels were set as P<0.05. Mean number of ovulations was 3.3; 4.8; 5.0 and 1.0 in groups 1 to 4, respectively, being higher (P<0.05) in all super ovulated groups, when compared to control. Concentrations of estrogen, inhibin, FSH and LH did not differ between groups during the first period. In period 2, estradiol levels were higher (P<0.05) in mares with superovulatory treatment eFSH (GIII) 29.52pg/ml, the groups GI and GII (GI: 16.75pg/ml, GII: 16.26pg/ml) values intermediary, and GIV (7.78pg/ml) levels lower. A positive correlation between estradiol levels and number of follicles ≥30mm (R=0.917; P<0.05), recovered embryos (R=0.945; P<0.05) and ovulations (R=0.75; P<0.05) was identified in super ovulated mares. A positive correlation (R=0.615; P=0.01) between estradiol and inhibin concentrations.

Orientador: Marco Antonio Alvarenga / Resumo: Respostas superovulatórias satisfatórias têm sido reportadas em éguas com o uso do Extrato de Pituitária Eqüina (EPE) e FSH purificado eqüino (eFSH), contudo as taxas de recuperação embrionária permanecem inconsistentes. O objetivo deste estudo foi avaliar as concentrações plasmáticas de estradiol, inibina, FSH e LH em éguas superovuladas com eFSH e EPE (em doses constantes ou decrescentes): antes, durante e imediatamente após o término da administração hormonal. Foram utilizadas seis éguas as quais foram submetidas aos seguintes tratamentos: Grupo I (GI) recebeu 25mg de EPE intramuscular (I.M.), Grupo II (GII) foram tratadas com EPE (I.M.) em doses decrescentes. No Grupo IIl (GIII), o EPE foi substituído por 12,5mg de eFSH (I.M.). O Grupo IV (GIV) foi utilizado como controle. Sangue foi coletado diariamente para avaliar as concentrações hormonais por radioimunoensaio. As coletas foram iniciadas dois dias antes da primeira aplicação medicamentosa, encerrando 48horas após a última ovulação do estro. As diferenças nos níveis plasmáticos hormonais foram comparadas utilizando-se o ANOVA, sendo considerada diferença estatística quando P0,05. O número médio de ovulações foi de 3,3; 4,8; 5,0 e 1,0 nos grupos 1 a 4, respectivamente, tendo sido maior (P<0,05) em todos os grupos superovulados em relação ao controle. As concentrações de estrógeno, inibina, FSH e LH não diferiram entre os grupos durante o período 1. No período 2, os valores de estradiol foram maiores (P<0,05) em éguas sob tratamento superovulatório com eFSH (GIII) 29,52pg/ml, os grupos I e II, apresentaram valores intermediários (GI: 16,75pg/ml, GII: 16,26pg/ml) e o GIV (7,78pg/ml) menor estatisticamente aos demais. Foi verificada uma correlação altamente positiva (R=0,615; P=0,01) entre os valores de estradiol e inibina, os quais, durante os tratamentos, foram maiores (P<0,05)... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Satisfactory superovulatory responses have been reported in mares with the use of equine pituitary extract (EPE) and purified equine FSH (eFSH), however embryo recovery rates are still inconsistent. Recent studies demonstrated that the superovulatory treatment disturbs oocyte maturation and transport. The main objective of the present study was to evaluate the plasmatic concentrations of estradiol, inhibin, FSH and LH in super ovulated mares treated with eFSH and EPE (with constant or decreasing doses): Six mares were used in a crossover experiment in four different groups: Group I mares received 25mg of EPE every twelve hours, Group II received EPE in decreasing doses and Group IlI mares received 12.5mg of eFSH (IM). Group IV served as control. Embryo flushes were performed 8 days pos ovulation. Blood was collected daily to evaluate hormonal concentrations through radioimuneassay, starting two days before the first administration, until 48 hours post-ovulation. Mean and daily hormonal concentrations of estradiol, inhibin, FSH and LH were evaluated. Hormonal concentrations were submitted to statistical analysis using ANOVA. Significance levels were set as P<0.05. Mean number of ovulations was 3.3; 4.8; 5.0 and 1.0 in groups 1 to 4, respectively, being higher (P<0.05) in all super ovulated groups, when compared to control. Concentrations of estrogen, inhibin, FSH and LH did not differ between groups during the first period. In period 2, estradiol levels were higher (P<0.05) in mares with superovulatory treatment eFSH (GIII) 29.52pg/ml, the groups GI and GII (GI: 16.75pg/ml, GII: 16.26pg/ml) values intermediary, and GIV (7.78pg/ml) levels lower. A positive correlation between estradiol levels and number of follicles ≥30mm (R=0.917; P<0.05), recovered embryos (R=0.945; P<0.05) and ovulations (R=0.75; P<0.05) was identified in super ovulated mares. A positive correlation (R=0.615; P=0.01) between estradiol and inhibin concentrations. / Mestre

Mit der vorliegenden Arbeit erfolgt erstmals eine vergleichende Studie hinsichtlich der endometrialen Funktionsmorphologie unter Einbezug klinisch-gynäkologischer Befunde und endokrinologischer Parameter bei zyklischen und nicht zyklischen Maultierstuten über den Zeitraum einer physiologischen Zuchtsaison. Dazu wurden beim Pferd etablierte Untersuchungsverfahren eingesetzt, was neben einer klinisch-gynäkologischen Untersuchung einschließlich Palpatio per rectum, Ultraschall der inneren Geschlechtsorgane und Vaginoskopie sowie die pathohistologische Auswertung von Endometriumpioptaten beinhaltete. Parallel dazu wurde zur Sicherung der Zyklusansprache und zur Erstellung eines endokrinologischen Verlaufsprofiles Blut zur Bestimmung der Sexualsteroide entnommen. Hierzu wurden sechs allgemein- und geschlechtsgesunde Maultierstuten über einen Zeitraum von Mitte April bis Mitte November in Abständen von zwei bis zehn Tagen untersucht. Die bei der Pferdestute etablierten Untersuchungsverfahren konnten auch bei den Maultierstuten wiederholt, aussagekräftig und komplikationslos eingesetzt werden. Besonders die Technik der Endometriumbiopsie mit Spreizspekulum, Zervixfasszange und Entnahmegerät zeigte sich als praktikabel und sicher bezüglich der Vermeidung von Verletzungen oder Kontamination der inneren Geschlechtsorgane mit lokaler Infektion. Es erfolgte eine Einteilung der Tiere in eine „azyklische“ Gruppe 1 und eine „zyklische“ Gruppe 2. Alle azyklischen Maultierstuten der Gruppe 1 zeigten während des Untersuchungszeitraumes sowohl klinisch als auch pathohistologisch eine vollständige Azyklie. Die bei den Blutproben gewonnenen Serumhormonwerte lagen bei der Gruppe 1 konstant im basalen Bereich. Histologisch wurde ein inaktives, irregulär differenziertes Endometrium vorgefunden. Die zyklischen Maultierstuten der Gruppe 2 wiesen eine variable endometriale Funktionsmorphologie mit teilweise ausgeprägter Fehldifferenzierung auf. Die Serumhormonwerte der Gruppe 2 zeigten starke Schwankungen und es konnte dabei keine Korrelation zwischen den klinisch-endokrinologischen Parametern und der endometrialen Funktionsmorphologie beobachtet werden. Weiterhin zeigten alle Tiere der Gruppe 1 und 2 eine Endometrose. Die endometrialen Gefäße wurden von jeder Maultierstute untersucht und der Gefäßschädigungsindex in Relation zum Alter dargestellt, wobei sich eine Altersassoziation hinsichtlich der Intensität der Gefäßalterationen ergab. Die Untersuchungsergebnisse der Endometriumbioptate jeder Maultierstute für sich gesehen, waren qualitativ und quantitativ über den langen Untersuchungszeitraum immer identisch und wiesen eine ausgeprägte Konstanz und Homogenität auf. Dies lässt den Rückschluss zu, dass die Ergebnisse repräsentativ für das ganze Endometrium der jeweiligen Maultierstute sind. Die Infertilität des Maultiers ist sicher durch genetische Ursachen, wie den ungeraden Chromosomensatz 2n=63 (WODSEDALEK 1916) begründet, aber auch Folgeerscheinungen wie eine reduzierte ovarielle Aktivität, eine Störung der Hypothalmus-Hypophysen-Ovarien-Uterus-Achse und eine daraus resultierende oder schon bestehende endometriale Fehldifferenzierung sind anhand der Ergebnisse dieser Studie als Ursachen der Infertilität zu berücksichtigen. Die eigenen Ergebnisse sprechen nicht dafür, dass Maultierstuten mit spontanem Zyklusgeschehen ohne exogene Unterstützung als Rezipienten für einen Embryotransfer geeignet sein dürften.

Mit der vorliegenden Arbeit erfolgt erstmals eine vergleichende Studie hinsichtlich der endometrialen Funktionsmorphologie unter Einbezug klinisch-gynäkologischer Befunde und endokrinologischer Parameter bei zyklischen und nicht zyklischen Maultierstuten über den Zeitraum einer physiologischen Zuchtsaison. Dazu wurden beim Pferd etablierte Untersuchungsverfahren eingesetzt, was neben einer klinisch-gynäkologischen Untersuchung einschließlich Palpatio per rectum, Ultraschall der inneren Geschlechtsorgane und Vaginoskopie sowie die pathohistologische Auswertung von Endometriumpioptaten beinhaltete. Parallel dazu wurde zur Sicherung der Zyklusansprache und zur Erstellung eines endokrinologischen Verlaufsprofiles Blut zur Bestimmung der Sexualsteroide entnommen. Hierzu wurden sechs allgemein- und geschlechtsgesunde Maultierstuten über einen Zeitraum von Mitte April bis Mitte November in Abständen von zwei bis zehn Tagen untersucht. Die bei der Pferdestute etablierten Untersuchungsverfahren konnten auch bei den Maultierstuten wiederholt, aussagekräftig und komplikationslos eingesetzt werden. Besonders die Technik der Endometriumbiopsie mit Spreizspekulum, Zervixfasszange und Entnahmegerät zeigte sich als praktikabel und sicher bezüglich der Vermeidung von Verletzungen oder Kontamination der inneren Geschlechtsorgane mit lokaler Infektion. Es erfolgte eine Einteilung der Tiere in eine „azyklische“ Gruppe 1 und eine „zyklische“ Gruppe 2. Alle azyklischen Maultierstuten der Gruppe 1 zeigten während des Untersuchungszeitraumes sowohl klinisch als auch pathohistologisch eine vollständige Azyklie. Die bei den Blutproben gewonnenen Serumhormonwerte lagen bei der Gruppe 1 konstant im basalen Bereich. Histologisch wurde ein inaktives, irregulär differenziertes Endometrium vorgefunden. Die zyklischen Maultierstuten der Gruppe 2 wiesen eine variable endometriale Funktionsmorphologie mit teilweise ausgeprägter Fehldifferenzierung auf. Die Serumhormonwerte der Gruppe 2 zeigten starke Schwankungen und es konnte dabei keine Korrelation zwischen den klinisch-endokrinologischen Parametern und der endometrialen Funktionsmorphologie beobachtet werden. Weiterhin zeigten alle Tiere der Gruppe 1 und 2 eine Endometrose. Die endometrialen Gefäße wurden von jeder Maultierstute untersucht und der Gefäßschädigungsindex in Relation zum Alter dargestellt, wobei sich eine Altersassoziation hinsichtlich der Intensität der Gefäßalterationen ergab. Die Untersuchungsergebnisse der Endometriumbioptate jeder Maultierstute für sich gesehen, waren qualitativ und quantitativ über den langen Untersuchungszeitraum immer identisch und wiesen eine ausgeprägte Konstanz und Homogenität auf. Dies lässt den Rückschluss zu, dass die Ergebnisse repräsentativ für das ganze Endometrium der jeweiligen Maultierstute sind. Die Infertilität des Maultiers ist sicher durch genetische Ursachen, wie den ungeraden Chromosomensatz 2n=63 (WODSEDALEK 1916) begründet, aber auch Folgeerscheinungen wie eine reduzierte ovarielle Aktivität, eine Störung der Hypothalmus-Hypophysen-Ovarien-Uterus-Achse und eine daraus resultierende oder schon bestehende endometriale Fehldifferenzierung sind anhand der Ergebnisse dieser Studie als Ursachen der Infertilität zu berücksichtigen. Die eigenen Ergebnisse sprechen nicht dafür, dass Maultierstuten mit spontanem Zyklusgeschehen ohne exogene Unterstützung als Rezipienten für einen Embryotransfer geeignet sein dürften.