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Determinação da heterogeneidade do vírus da leucose bovina no estado de Santa Catarina / Determination of the heterogeneity among bovine leukemia virus from Santa Catarina State

Rodakiewicz, Sheyla Michele 23 August 2013 (has links)
Made available in DSpace on 2016-12-08T16:24:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGCA13MA113.pdf: 865063 bytes, checksum: 41861f94a8b447b6d17dbc06ba954319 (MD5) Previous issue date: 2013-08-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Bovine leukemia virus (BLV) is a member of the family Retroviridae, genus Deltaretrovirus and it is an important agent, being primarily responsible for economic losses in dairy herds, causing losses of around 10% in production. The infection of BLV, can manifest itself in two ways, benign one, which reaches approximately 30% of the animals infected with concomitant persistent lymphocytosis and malignant condition, often fatal, affecting approximately 5% of animals with tumor appearance lymphoid (lymphosarcomas).Currently, several studies have been made about of BLV genotypes, finding at least seven genotypes, in samples of different parts of the world. The aim of this study was the molecular characterization of samples of BLV from seropositive dairy cattle in Santa Catarina State. Were collected 454 blood samples of dairy cattle of the 31 properties and four buffaloes, being initially performed serology using agar gel immunodiffusion test (IDGA). Also collected tumor samples with different locations: lymph node, heart, intestine and muscle near the coxal, from three cattle. After serology 191 samples were found to be seropositive then submitted to DNA extraction and in 62 samples were performed the polymerase chain reaction (PCR) for amplification of a 440 bp fragment of the env gene, as well as the tumor samples. Nineteen samples extracted from blood and tumors samples were submitted to restriction fragment lenght polymorphism analysis (RFLP) by digestion of the PCR fragment for five restriction endonucleases, BamHI, HaeIII, Tru9I, TaqI and MwoI. The results obtained in serology demonstrated 42% seropositive animals (191/454) and 68% positives properties 7 (21/31), buffaloes no positive and tumor samples were positive in its entirety in PCR. In RFLP analysis identified five different profiles corresponding to five genotypes circulating in the State. Among the genotypes found in this study, the highest prevalence was observed genotype X (47.4%). This study allows us to know some the viral genotypes present in cattle in the Santa Catarina state and these results useful for future epidemiological studies, as well as identify the existence of new variants and their current prevalence / O vírus da Leucose Bovina (BLV) membro da família Retroviridae, gênero Deltaretrovirus, é um agente importante em bovinos, sendo responsável por perdas econômicas principalmente em rebanhos leiteiros, podendo causar prejuízos em torno de 10% na produção. A infecção pelo BLV, pode manifestar-se de duas formas, uma benigna, que atinge aproximadamente 30% dos animais infectados, cursando com linfocitose persistente, e a forma maligna, muitas vezes fatal, que atinge aproximadamente 5% dos animais, com surgimento de tumores linfóides (linfossarcomas). Atualmente, vários estudos têm sido realizados a cerca dos genótipos do BLV, encontrando-se pelo menos sete genótipos, em amostras de diferentes locais do mundo. O presente estudo teve como objetivo, a genotipagem do BLV, em rebanhos leiteiros do estado de Santa Catarina. Foram coletadas 454 amostras de sangue de bovinos leiteiros de 31 propriedades e quatro búfalos sendo realizada inicialmente a sorologia pelo teste de imunodifusão em gel de ágar (IDGA). Coletaram-se também amostras de tumores com diferentes localizações: linfonodo, coração, intestino e musculatura próximo ao coxal, de três bovinos. Após a sorologia 191 amostras foram constatadas como soropositivas sendo submetidas então à extração de DNA e em 62 amostras realizou-se a reação da polimerase em cadeia (PCR), visando a amplificação de um fragmento 440 pb do gene env, assim como nas amostras de tumores. Dezenove amostras extraídas de sangue e dos tumores foram submetidas à análise de polimorfismo dos fragmentos de restrição (RFLP), através da digestão do fragmento da PCR por 5 cinco endonucleases de restrição, BamHI, HaeIII, Tru9I, TaqI e MwoI. Os resultados obtidos na sorologia demonstraram 42% dos soros dos bovinos analisados positivos (191/454), 68% de propriedades positivas (21/31), nenhum soro bubalino positivo e as amostras de tumores foram positivas em sua totalidade na PCR. Nas análises por RFLP identificamos cinco perfis diferentes correspondendo a cinco genótipos circulantes no Estado. Dentre os genótipos encontrados neste trabalho, o mais prevalente foi o genótipo X (47,4%). Este estudo permitiu conhecer alguns dos genótipos virais presentes em bovinos no Estado de Santa Catarina sendo estes resultados úteis para futuros estudos epidemiológicos, assim como identificar a existência de novas variantes circulantes e sua prevalência

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