Made available in DSpace on 2016-01-26T18:56:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Deigilam Cestari Esteves.pdf: 2776358 bytes, checksum: 7e1a46b5b264cbf8e0c0d96e68b501e2 (MD5) Previous issue date: 2014-12-18 / The environmental and hospital infections, caused by bacteria which are resistant to a wide variety of antibiotics, have shown increasing records in the last years, manifesting themselves in high mortality and lethality. Recent researches report that the bacteria presents a survival profile on dry surfaces in order to maintain their virulence when exposed to biological fluids such as urine, saliva and blood. The objective of this study was to document - through laboratorial analysis the survival capacity of the main bacteria of medical interest on abiotic surfaces. The adopted procedures were completely conducted in the microbiology laboratory at Unoeste, in Presidente Prudente SP. Standard ATCC strains of Staphylococcus aureus (ATCC25923), Enterococcus faecalis (ATCC29212), Escherichia coli (ATCC35218), Klebsiella pneumoniae (ATCC700603) and Pseudomonas aeruginosa (ATCC27583) were used, to which biological fluids and water were added. The surfaces were tile, synthetic fabric, mattress and cotton fabric. The surfaces were contaminated with suspension composed by the ATCC strains, biological fluids and water in addition to the control containing only the ATCC strains, which were stored in petri dishes, kept in room temperature. Every seven days the surfaces were dipped in trypticase soy broth and kept in the oven for 24h at 37ºC. They were spread from the contaminated brothin Mueller Hinton agar and kept for 24h in the oven at 37ºC. The viability analysis was done through the colony-forming unity (CFU) counting. For the statistical analysis, the Software R was used, through the Friedman and Kruskal Wallis tests for multiple comparisons, analyzing within each factor (solution or surface) which differ between one another (Friedman s test) and also which treatments interactions are different (Kruskal-Wallis). Through this analysis it was possible to observe that in the current work that Staphylococcus aureus kept its viability for a longer period than other microorganisms under all the tested conditions, presenting significant differences between the fluids and surfaces, with a particular colony growth in blood and cotton. The Klebsiella pneumoniae showed differences between fluids, with saliva containing the highest colony number. With regards to the other tested bacteria, there was no isolated significance. For the multiple comparisons analysis, only the Pseudomonas aeruginosa presented no significant difference between any pair of treatments, whereas the other bacteria presented significant differences between the correlations. The need to analyze the environmental impact of these microorganisms persistence in environments, which are vulnerable to human beings, guides the creation of measures in order to control the spread of pathogenic microorganisms. / As infecções ambientais e hospitalares causadas por bactérias resistentes a um amplo espectro de antibióticos têm índices crescentes nos últimos anos, manifestando-se com alta morbidade e letalidade. Pesquisas recentes evidenciam que as bactérias demonstram um perfil de sobrevivência, em superfícies secas de modo a manter sua virulência quando expostas a fluidos biológicos como urina, saliva e sangue. O objetivo desse estudo foi documentar através de análises laboratoriais a capacidade de sobrevivência das principais bactérias de interesse médico em superfícies abióticas. Os procedimentos foram totalmente realizados no laboratório de microbiologia da Unoeste em Presidente Prudente - SP., utilizando cepas padrão ATCC de Staphylococcus aureus(ATCC25923), Enterococcus faecalis (ATCC29212), Escherichia coli(ATCC35218), Klebsiella pneumoniae(ATCC700603) e Pseudomonas aeruginosa(ATCC27583), ao qual foram adicionados fluídos biológicos e água. As superfícies utilizadas foram piso, tecido sintético, colchão e tecido algodão. As superfícies foram contaminadas com suspensão composta pelas cepas ATCC, fluídos biológicos e água, além do controle contendo somente as cepas ATCC, armazenadas em placas de petri e mantidas em temperatura ambiente. A cada sete dias as superfíciesarmazenadas foram mergulhadas em caldo Tripscaseína de Soja (TSB), colocadas na estufa por 24h a 37ºC. Foram semeados do caldo contaminado em ágar Mueller Hinton e mantidos por 24h em aquecimento a 37º em Estufa.A análise da viabilidadefoi realizada através da contagem de unidade formadora de colônias (U.F.C.). Para a análise estatística utilizou o software R, realizando os testes de Friedman e de Kruskal Wallis para comparações multiplas, analisando dentro de cada fator (solução ou superfície) quais diferem entre si (Teste de Friedman) e, também, quais interações de tratamentos são diferentes (Kruskal-Wallis). Através dessas análises foi possível observar no presente trabalho que Staphylococcus aureus manteve a viabilidade por tempo maior que os outros microrganismos em todas as condições testadas, apresentando diferença significativa entre os fluídos e as superfícies, tendo sangue e tecido algodão crescimento de maior número de colônias. A Klebsiella pneumoniae apresentou diferença entre os fluídos, sendo asaliva com maior número de colônias. Para as outras bactérias testadas não houve significância isoladamente. Para as análises de comparações múltiplas somente para a Pseudomonas aeruginosanão houve diferença significativa entre algum par de tratamentos, as outras bactérias apresentaram diferenças significativas entre as correlações. A necessidade de analisar o impacto ambiental da persistência desses microrganismos em ambientes vulneráveis ao ser humano, norteia o delineamento de medidas para o controle na disseminação de microrganismos patogênicos.

Made available in DSpace on 2016-07-18T17:46:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Deigilam Cestari Esteves.pdf: 2776358 bytes, checksum: 7e1a46b5b264cbf8e0c0d96e68b501e2 (MD5) Previous issue date: 2014-12-18 / The environmental and hospital infections, caused by bacteria which are resistant to a wide variety of antibiotics, have shown increasing records in the last years, manifesting themselves in high mortality and lethality. Recent researches report that the bacteria presents a survival profile on dry surfaces in order to maintain their virulence when exposed to biological fluids such as urine, saliva and blood. The objective of this study was to document - through laboratorial analysis the survival capacity of the main bacteria of medical interest on abiotic surfaces. The adopted procedures were completely conducted in the microbiology laboratory at Unoeste, in Presidente Prudente SP. Standard ATCC strains of Staphylococcus aureus (ATCC25923), Enterococcus faecalis (ATCC29212), Escherichia coli (ATCC35218), Klebsiella pneumoniae (ATCC700603) and Pseudomonas aeruginosa (ATCC27583) were used, to which biological fluids and water were added. The surfaces were tile, synthetic fabric, mattress and cotton fabric. The surfaces were contaminated with suspension composed by the ATCC strains, biological fluids and water in addition to the control containing only the ATCC strains, which were stored in petri dishes, kept in room temperature. Every seven days the surfaces were dipped in trypticase soy broth and kept in the oven for 24h at 37ºC. They were spread from the contaminated brothin Mueller Hinton agar and kept for 24h in the oven at 37ºC. The viability analysis was done through the colony-forming unity (CFU) counting. For the statistical analysis, the Software R was used, through the Friedman and Kruskal Wallis tests for multiple comparisons, analyzing within each factor (solution or surface) which differ between one another (Friedman s test) and also which treatments interactions are different (Kruskal-Wallis). Through this analysis it was possible to observe that in the current work that Staphylococcus aureus kept its viability for a longer period than other microorganisms under all the tested conditions, presenting significant differences between the fluids and surfaces, with a particular colony growth in blood and cotton. The Klebsiella pneumoniae showed differences between fluids, with saliva containing the highest colony number. With regards to the other tested bacteria, there was no isolated significance. For the multiple comparisons analysis, only the Pseudomonas aeruginosa presented no significant difference between any pair of treatments, whereas the other bacteria presented significant differences between the correlations. The need to analyze the environmental impact of these microorganisms persistence in environments, which are vulnerable to human beings, guides the creation of measures in order to control the spread of pathogenic microorganisms. / As infecções ambientais e hospitalares causadas por bactérias resistentes a um amplo espectro de antibióticos têm índices crescentes nos últimos anos, manifestando-se com alta morbidade e letalidade. Pesquisas recentes evidenciam que as bactérias demonstram um perfil de sobrevivência, em superfícies secas de modo a manter sua virulência quando expostas a fluidos biológicos como urina, saliva e sangue. O objetivo desse estudo foi documentar através de análises laboratoriais a capacidade de sobrevivência das principais bactérias de interesse médico em superfícies abióticas. Os procedimentos foram totalmente realizados no laboratório de microbiologia da Unoeste em Presidente Prudente - SP., utilizando cepas padrão ATCC de Staphylococcus aureus(ATCC25923), Enterococcus faecalis (ATCC29212), Escherichia coli(ATCC35218), Klebsiella pneumoniae(ATCC700603) e Pseudomonas aeruginosa(ATCC27583), ao qual foram adicionados fluídos biológicos e água. As superfícies utilizadas foram piso, tecido sintético, colchão e tecido algodão. As superfícies foram contaminadas com suspensão composta pelas cepas ATCC, fluídos biológicos e água, além do controle contendo somente as cepas ATCC, armazenadas em placas de petri e mantidas em temperatura ambiente. A cada sete dias as superfíciesarmazenadas foram mergulhadas em caldo Tripscaseína de Soja (TSB), colocadas na estufa por 24h a 37ºC. Foram semeados do caldo contaminado em ágar Mueller Hinton e mantidos por 24h em aquecimento a 37º em Estufa.A análise da viabilidadefoi realizada através da contagem de unidade formadora de colônias (U.F.C.). Para a análise estatística utilizou o software R, realizando os testes de Friedman e de Kruskal Wallis para comparações multiplas, analisando dentro de cada fator (solução ou superfície) quais diferem entre si (Teste de Friedman) e, também, quais interações de tratamentos são diferentes (Kruskal-Wallis). Através dessas análises foi possível observar no presente trabalho que Staphylococcus aureus manteve a viabilidade por tempo maior que os outros microrganismos em todas as condições testadas, apresentando diferença significativa entre os fluídos e as superfícies, tendo sangue e tecido algodão crescimento de maior número de colônias. A Klebsiella pneumoniae apresentou diferença entre os fluídos, sendo asaliva com maior número de colônias. Para as outras bactérias testadas não houve significância isoladamente. Para as análises de comparações múltiplas somente para a Pseudomonas aeruginosanão houve diferença significativa entre algum par de tratamentos, as outras bactérias apresentaram diferenças significativas entre as correlações. A necessidade de analisar o impacto ambiental da persistência desses microrganismos em ambientes vulneráveis ao ser humano, norteia o delineamento de medidas para o controle na disseminação de microrganismos patogênicos.

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No. of bitstreams: 1 DissAMS.pdf: 9742960 bytes, checksum: 9f8e053fcda7ed507c68927b7c6c5533 (MD5) Previous issue date: 2015-07-30 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / In this master dissertation, electroanalytical procedures for the simultaneous determination of analgesics paracetamol (PAR) and codeine (COD) and, PAR and tramadol (TRA) in pharmaceutical samples and biological fluids using a cathodically pretreated boron-doped diamond electrode (BDDE) were developed. In the first procedure, the square-wave voltammetry (SWV) was employed for the simultaneous determination of PAR and COD, using as supporting electrolyte 0.2 mol L−1 acetate buffer (pH 4.0), and the analytical curves were linear in the concentration range from 0.2 to 95.8 μmol L−1 for PAR and from 0.2 to 95.8 μmol L−1 for COD, with detection limits (LODs) of 0.018 μmol L−1 and 0.014 μmol L−1, respectively. The second procedure developed for the simultaneous determination of PAR and COD was based on a flow injection analysis with multiple pulses amperometric detection (FIA-MPA), using as transport solution a 0.05 mol L−1 H2SO4 solution. The potential pulse application sequence in function of time was 950 mV / 200 ms (potential where only the PAR oxidation occurs) and 1400 mV / 100 ms (potential where both analytes suffers oxidation (PAR and COD)). The obtained analytical curves show linearity from 0.08 to 100.0 μmol L−1 for PAR and 0.05 to 10.0 μmol L−1 for COD, with LODs of 0.030 e 0.035 μmol L−1 for PAR and COD, respectively. The analytical frequency was estimated as being 90 determinations h−1. After, an electroanalytical procedure using FIA–MPA it was developed a simultaneous determination of PAR and TRA. The potential pulse application sequence in function of time was 850 mV / 200 ms (potential where only occurs the PAR oxidation) and 1600 mV / 100 ms (potential where both analytes suffers oxidation). The obtained analytical curves show linearities between 1.0 to 100.0 μmol L−1 and 0.08 to 10.0 μmol L−1 for PAR and TRA, respectively, and the LOD was 0.030 μmol L−1 for PAR and 0.040 μmol L−1 for TRA. Finally, all developed procedures were employed for the simultaneous determination of these compounds (PAR + COD e PAR + TRA) in pharmaceutical samples, where the obtained results agree with those results obtained using a comparative method (HPLC – High-performance liquid chromatography). These compounds were simultaneously analyzed in synthetic biological fluids (urine and human serum) by addiction and recuperation method, where the recuperations obtained ranged from 90.8 to 108%. / Neste trabalho de mestrado foram desenvolvidos procedimentos eletroanalíticos para a determinação simultânea dos analgésicos paracetamol (PAR) e codeína (COD) e de PAR e tramadol (TRA) em amostras farmacêuticas e fluidos biológicos utilizando-se o eletrodo de diamante dopado com boro (BDDE) prétratado catodicamente. Para o primeiro procedimento, empregou-se a voltametria de onda quadrada (SWV) para a determinação simultânea de PAR e COD em tampão acetato 0,2 mol L−1 (pH 4,0) como eletrólito suporte, obtendo-se curvas analíticas lineares nos intervalos de concentração de 0,2 a 95,8 μmol L−1 para PAR e de 0,4 a 9,6 μmol L−1 para COD e limites de detecção (LDs) de 0,018 e de 0,014 μmol L−1 respectivamente para o PAR e COD. O segundo procedimento desenvolvido para a determinação simultânea dos analgésicos PAR e COD foi por análise por injeção em fluxo com detecção amperométrica de múltiplos pulsos (FIA–MPA) em solução transportadora de H2SO4 0,05 mol L−1. A sequência de aplicação dos pulsos em função do tempo foi de 950 mV / 200 ms (pulso de potencial no qual ocorre a oxidação apenas do PAR) e de 1400 mV / 100 ms (pulso de potencial no qual ocorre a oxidação de ambos os analitos (PAR e COD)). As curvas analíticas obtidas apresentaram linearidades de 0,08 a 100,0 μmol L−1 para PAR e de 0,05 a 10,0 μmol L−1 para COD e os LDs foram de 0,030 e 0,035 μmol L−1 para PAR e COD, respectivamente. A frequência analítica obtida foi de 90 determinações h−1. O terceiro procedimento foi desenvolvido empregando-se FIA–MPA para a determinação simultânea de PAR e TRA. Uma sequência de aplicação dos pulsos de potencial em função do tempo foram de 850 mV / 200 ms (pulso de potencial no qual ocorre a oxidação apenas de PAR) e de 1600 mV / 100 ms (pulso de potencial no qual ocorre a oxidação de PAR e TRA). As curvas analíticas obtidas apresentaram linearidades de 1,0 a 100,0 μmol L−1 e de 0,08 a 10,0 μmol L−1 para PAR e TRA, respectivamente, com LDs de 0,030 μmol L−1 para o PAR e de 0,040 μmol L−1 para o TRA. Finalmente, todos os procedimentos desenvolvidos foram empregados para a determinação simultânea destes compostos (PAR + COD e PAR + TRA) em amostras farmacêuticas, sendo os resultados obtidos concordantes com os resultados obtidos empregando-se o método comparativo (HPLC – cromatografia líquida de alta eficiência). Estes analgésicos também foram determinados simultaneamente em fluidos biológicos sintéticos (urina e soro humano) pelo método de adição e recuperação, sendo obtidas recuperações entre 90,8 a 108%.