Submitted by MARCIA ROVADOSCHI (marciar@unifra.br) on 2018-08-17T11:45:57Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Patrick_Flores_Menezes.pdf: 781861 bytes, checksum: d5a63e27019895c5d076c24d47faf78b (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-17T11:45:57Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Patrick_Flores_Menezes.pdf: 781861 bytes, checksum: d5a63e27019895c5d076c24d47faf78b (MD5) Previous issue date: 2016-08-29 / Carbon nanotubes (CNT) are structures of a few centimeters in length, and with a nanometer radius. The application of CNT has been diverse, from nanosensors to drug carriers, and therefore its toxicological evaluation is of great importance. Among the various properties of CNT, the most worrying in toxicological terms is its great insolubility. The insolubility in aqueous medium is one of the factors that decrease the biocompatibility, reducing cell viability in vitro. Functionalization techniques of nanostructures can be used to increase the solubility of CNT, thus increasing their biological compatibility. The objective of this work was to investigate the cytotoxicity caused by nonfunctionalized and functionalized multiple-walled carbon nanotubes (MWCNT) through a chemical method and subsequent purification. For the in vitro tests, the treated cells (RAW 264.7 and VERO cells) were cultured with various concentrations of CNT described in the literature for comparison (5, 10, 25, 50 and 100 μg / ml). Cells from the control group with culture medium were cultured with DMEM culture medium supplemented with 10% fetal bovine serum (FBS), and the positive control for cell damage with 100 mM of hydrogen peroxide. Cells remained in treatments for the 24 hour periods. Cell viability was then determined by the tripan blue exclusion method, which remained around 70%. Biochemical tests for cytotoxicity were carried out by the release of the enzyme lactate dehydrogenase (LDH) in the cell supernatant, nitric oxide in the macrophages, MTT, and a cell count of the supernatant after treatment. The results showed no significant difference in cytotoxicity of the samples, so the experiment was repeated using a VERO cell line, and concentrations were increased (100, 250, 500, 1000 and 5000 μg / ml). The MTT, LDH, neutral red and tripan blue counts were again performed. This second result demonstrated that functionalization decreases the cytotoxic effect of the MWCNT used. The methodology used was easy to apply and could be used for future analyzes of cytotoxicity using these nanomaterials. / Nanotubos de carbono (NTC) são estruturas de comprimento de poucos centímetros, e com um raio nanométrico. A aplicação dos NTC tem sido diversa, de nanosensores a carreadores de fármacos, e por isso sua avaliação toxicológica é de grande importância. Entre as diversas propriedades dos NTC, a mais preocupante em termos toxicológicos é a sua grande insolubilidade. A insolubilidade em meio aquoso é um dos fatores determinantes que diminuem a biocompatibilidade, diminuindo a viabilidade celular in vitro. Técnicas de funcionalização de nanoestruturas podem ser utilizadas, para aumentar a solubilidade dos NTC, aumentando assim sua compatibilidade biológica. Com isso, o objetivo desse trabalho foi investigar a citotoxicidade causada pelos nanotubos de carbono de paredes múltipla (NTCPM) não funcionalizados e funcionalizados, através de um método químico e posterior purificação. Para a realização dos testes in vitro, as células tratadas (RAW 264.7 e Células VERO) foram cultivadas com diversas concentrações de NTC descritas na literatura a fim de comparação (5, 10, 25, 50 e 100 μg/ml). As células do grupo controle com meio de cultura foram cultivadas com meio de cultura DMEM suplementado a 10% de soro bovino fetal (SBF), e o controle positivo para dano celular com 100 mM de peróxido de hidrogênio. As células permaneceram em tratamentos pelos períodos de 24 horas. Em seguida foi determinado a viabilidade celular, através do método de exclusão pelo azul tripan, a qual permaneceu em torno de 70%. Em seguida foram conduzidos os testes bioquímicos de citotoxicidade através da liberação da enzima lactato desidrogenase (LDH) no sobrenadante celular, óxido nítrico na linhagem de macrófagos, MTT e uma contagem celular do sobrenadante celular após tratamento. Os resultados não demonstraram diferença significativa na citotoxicidade das amostras, sendo assim, o experimento foi repetido utilizando uma linhagem celular de células VERO, e as concentrações foram aumentadas (100, 250, 500, 1000 e 5000 μg/ml). Foram realizados novamente os ensaios do MTT, LDH, vermelho neutro e a contagem com azul tripan. Este segundo resultado demonstrou que a funcionalização diminui o efeito citotóxico dos NTCPM utilizados. A metodologia utilizada, mostrou-se de fácil aplicabilidade e passível de ser utilizada para futuras análises de citotoxicidade utilizando estes nanomateriais.