Ulm, Univ., Diss., 2008.

Berlin, Freie University, Diss., 2005. / Dateiformat: zp, Dateien im PDF-Format.

Univ., Diss., 2006--Giessen

Proefschrift Maastricht. / Met samenvatting in het Nederlands. - Met lit. opg.

No description available.

This work focuses on megakaryocyte physiology with a special interest in the description of the localization of megakaryocytes in the bone marrow in mice single-deficient of the small Rho GTPase RhoA or double-deficient for RhoA and Cdc42. RhoA knock-out mice revealed intraluminal presence of megakaryocytes in bone marrow sinusoids. In a next step, potential aggravation, attenuation or preservation of this phenotype was studied in related mouse strains and also in the setting of platelet depletion and blockage of important megakaryocyte and platelet glycoprotein receptors in order to understand underlying singling pathways. A second part of this thesis studied the role of RhoF in filopodia formation and scrutinized RhoF deficient mice with regard to platelet activation and degranulation. / Diese Arbeit beschäftigt sich mit Megakaryozyten mit besonderem Fokus auf der Beschreibung ihrer Verteilung im Knochenmark in Abhängigkeit der Defizienz der kleinen Rho GTPase RhoA und der kombinierten Defizienz von RhoA und Cdc42. Hierbei konnten bei RhoA defizienten Mäusen intraluminal gelegene Megakaryozyten, das heißt Megakaryozyten innerhalb der Knochenmarksinusoide nachgewiesen werden. In einem nächsten Schritt wurde eine potentielle Verstärkung, Abschwächung oder Konservierung dieses Phänotyps anhand verwandter Mauslinien und ebenso unter Bedingungen von Plättchendepletion und der Blockade wichtiger megakaryozytärer und thrombozytärer Glykoproteinrezeptoren durchgeführt, um zu Grunde liegende Signalwege zu verstehen. Ein zweiter Teil dieser Arbeit behandelte die Rolle von RhoF in der Filopodiengenerierung und untersuchte RhoF defiziente Mäuse im Hinblick auf Thrombozytenaktivierung und -degranulierung.

Die in-vitro-Modelle des malignen Melanoms stellen eine vielversprechende Plattform für die Forschung und Entwicklung neuer Medikamente sowie für die Modellierung von Krankheiten, die regenerative Medizin und die grundlegende Hautbiologie dar. In dieser Arbeit wurden bereits etablierte organotypische in-vitro-Modelle des malignen Melanoms bezüglich ihrer physiologischen Eigenschaften, der Interaktion von Melanomzellen mit ihrer Umgebung, Vergleichbarkeit in der klinischen Diagnostik und Tumorprogression untersucht. Die Ergebnisse zeigen, dass die Modelle histologisch hinsichtlich ihres Aufbaus mit der in-vivo-Situation vergleichbar sind und Gewebemarker der Tumorumgebung zuverlässig darstellbar waren. Des Weiteren wurde die Interaktion des malignen Melanoms mit der Tumorumgebung anhand des Proteins MIA und des Notch-Signalweg analysiert. Dabei zeigte sich eine beschränkte Vergleichbarkeit zwischen den in-vitro-Modellen und der in-vivo-Situation. Die Exprimierung von MIA wurde in den in-vitro-Modellen bestätigt, jedoch war die Vergleichbarkeit mit der in-vivo-Situation eingeschränkt. Der Notch-Signalweg spielt eine Rolle bei der Progression des Melanoms, jedoch war die Expression des Rezeptors Notch1 nicht ausreichend in den Hautmodellen nachweisbar. Die Liganden Jagged1 und DLL1 zeigten stellenweise Expressionen, wobei DLL1 in den in-vitro-Modellen mit der in-vivo-Situation korrelierte. Zudem wurde die Vergleichbarkeit von in-vitro-Modellen des malignen Melanoms mit histopathologischem Patientengewebe hinsichtlich der klinischen Diagnostik des malignen Melanoms untersucht. Es wurde festgestellt, dass sich die immunhistochemischen Marker in den Hautmodellen vergleichbar mit der in-vivo-Situation präsentierten. Abschließend wurde die Transformation des Expressionsprofils des malignen Melanoms während des Tumorwachstums und der Interaktion der malignen Zellen mit der Tumorumgebung analysiert. Es wurde festgestellt, dass die in-vitro-Modelle des malignen Melanoms das Tumorwachstum präzise bis zur dritten Wachstumsphase nach Clark abbilden können (Clark, 1991). Der Cadherin-Switch zwischen E-Cadherin und N-Cadherin wurde ebenfalls in den Hautmodellen beobachtet. Insgesamt demonstriert diese Arbeit eine ausgeprägte Vergleichbarkeit zwischen den bereits etablierten in-vitro-Modellen des malignen Melanoms und der in-vivo-Situation. Sie bestätigt somit die in-vitro-Modelle des malignen Melanoms als vielversprechendes präklinisches Werkzeug für die weiterführende Erforschung dieses Tumortyps. / The in-vitro-models of malignant melanoma represent a promising platform for research and development of new drugs as well as for disease modeling, regenerative medicine and basic skin biology. In this study, established organotypic in-vitro-models of malignant melanoma were examined in terms of their physiological properties, interactions between melanoma cells and their microenvironment, clinical diagnostic relevance, and tumor progression. The results show that the histological structure of the models is comparable with the in-vivo-situation and that tissue markers of the tumor environment can be reliably depicted. Furthermore, the interaction of malignant melanoma with the tumor environment was analyzed using the MIA protein and the Notch signaling pathway. This showed limited comparability between the in-vitro-models and the in-vivo-situation. The expression of MIA was confirmed in the in-vitro-models, but the comparability with the in-vivo-situation was limited. The Notch signaling pathway plays a role in the progression of melanoma, but the expression of the Notch1 receptor was not sufficiently detectable in the skin models. The ligands Jagged1 and DLL1 showed localized expression, with DLL1 correlating with the in-vivo-situation in the in-vitro-models. Furthermore, the comparability of in-vitro-models of malignant melanoma with histopathological patient tissue was analyzed in the context of clinical diagnosis. The study revealed that the immunohistochemical markers in the skin models closely resembled those found in vivo. Finally, the transformation of the expression profile of malignant melanoma during tumor growth and the interaction of the malignant cells with the tumor environment was analyzed. It was found that the in-vitro-models of malignant melanoma can accurately depict tumor growth up to the third growth phase according to Clark (Clark, 1991). The cadherin switch between E-cadherin and N-cadherin was also observed in the skin models. Overall, this work demonstrates a pronounced comparability between the already established in-vitro-models of malignant melanoma and the in-vivo-situation. It thus confirms the in-vitro-models of malignant melanoma as a promising preclinical tool for further research into this tumor type.

Le génie tissulaire est une technologie prometteuse pour combler la pénurie de tissus. Cependant, la culture requise avant la greffe peut potentiellement conduire à la transmission d’agents infectieux ainsi qu’à des réactions immunitaires déclenchées par des protéines animales résiduelles. Lors de la reconstruction de tissus par auto-assemblage, l’ajout d’acide ascorbique et de sérum bovin stimule les cellules à sécréter la matrice extracellulaire pour résulter en tissu. En vue d’une utilisation clinique, des produits sans xénogène ont été testés. Le milieu défini LM enrichi de 1% de sérum humain stimule la prolifération cellulaire et ce milieu sans sérum soutient la différenciation adipogénique. Plusieurs analyses ont permis de caractériser les tissus adipeux produits: ils contiennent de petits adipocytes, sont 1,8 fois plus épais et deux fois moins contractiles que ceux produits en milieu standard. Ces résultats indiquent que des tissus conjonctifs et adipeux sécuritaires peuvent être produits pour de futures greffes. / Tissue engineering is a promising technology to address the shortage of tissues. However, culturing cells in vitro prior to transplantation can potentially lead to transmission of infectious agents as well as immune responses triggered by residual animal proteins. During tissue reconstruction by the self-assembly method, ascorbic acid and bovine serum stimulate cells to secrete extracellular matrix resulting in a manipulatable tissue. For clinical purposes, xenogenic-free products were tested. The defined medium (LM) enriched with 1% human serum stimulated cell proliferation and serum-free medium supported the adipogenic differentiation. Several analyses were performed to characterize the reconstructed adipose tissues: they contain small adipocytes, are 1.8 times thicker and half as contractile as those produced in standard medium. These results indicate that improved connective and adipose tissues can be produced for future transplantation.

Tübingen, Univ., Diss., 2004.

Thèse (M.Sc.)--Université Laval, 2004. / Bibliogr.: f. 78-85. Publié aussi en version électronique.