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Emprego da Técnica de pcr em tempo real na detecção de DNA de Brucella spp em lesões de carcaças e vísceras provenientes de matadouros- frigoríficos sob inspeção federal. / Real-Time PCR detection of Brucella spp in lesions of carcasses and visceras from slaughterhouses under Federal InspectionSOLA, Marilia Cristina 28 February 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-02-28 / Brucellosis is a chronic infectious disease caused by bacterium of the genus Brucella, which affects humans and different species of animals. Despite the implementation of programs aimed at the disease controlling and eradicating, brucelosis is endemic in many countries, especially in developing ones, resulting in significant economic losses and serious implications for animal and public health, due to its zoonotic character. The disease can be transmitted by direct or indirect contact with infected animals, fetal membranes, and also transmitted to humans by contaminated animal products, especially milk and dairy products that have not undergone thermal processing, by raw meat and the handling of carcasses and visceras at the slaughterhouse. The National Programme for Control and Eradication of Brucellosis (PNCEBT), established in the country in 2001, determines the diagnosis of animals in order to establish both the distribution and characterization of the agent. In this context and seeking for a rapid, safe and precise diagnosis of this disease in cattle, we aimed to detect Brucella spp by real time PCR in suspect lesions detected during routine inspection in slaughterhouses under Federal Inspection in the state of Goias, Brazil. Such lesions were related to cervical bursitis, testicular, lung and liver lesions and also in mandibular, retropharyngeal, esophageal, intercostal, apical, mediastinal, tracheobronchial, inguinal, ischiatic, popliteal and mesenteric lymphnodes. In the sampling procedure, cellulose cards were used for storage of biological material (card FTA ® Elute) by impregnating the material in the fibrous matrix of the card. Laboratory analyses were performed on 47 samples from animal tissue and fluids, collected from carcasses and visceras at 40 bovines suspected of brucellosis. Samples were processed at the Laboratório de Biologia Molecular from the Centro de Pesquisa em Alimentos, Escola de Veterinária e Zootecnia from Universidade Federal de Goiás (LBM / CPA / EVZ / UFG). Brucella spp was detected in 42.5% of the bovines with suspect lesions and in 38.3% of samples. It was verified that the use of real-time PCR associated with the FTA® Elute method is an important diagnostic tool in the process of trial and disposition of carcasses and visceras of slaughtered animals and it gives flexibility and efficiency for the diagnosis of diseases, helping the Federal Inspection Service in fulfilling its mission of providing safe food to consumers / A brucelose é uma enfermidade infectocontagiosa de caráter crônico, causada por bactérias do gênero Brucella, que acomete o homem e diferentes espécies animais. Apesar da implementação de programas que visam o controle e a erradicação da enfermidade, apresenta-se endêmica em muitos países, principalmente aqueles em desenvolvimento, resultando em prejuízos econômicos significativos aos sistemas de produção e sérias implicações em saúde animal e pública, visto seu caráter zoonótico. A doença pode ser transmitida pelo contato direto ou indireto com animais infectados e anexos fetais e, ainda, veiculada ao homem pela ingestão de produtos de origem animal contaminados, principalmente leite e seus derivados que não passaram por processamento térmico. Pode ser veiculada também por meio de carnes cruas e pela própria manipulação de carcaças e vísceras durante o abate sanitário. O Programa Nacional de Controle e Erradicação da Brucelose e Tuberculose (PNCEBT) instituído no país em 2001 determina como uma das medidas sanitárias, o diagnóstico dos animais, a fim de estabelecer a ocorrência, distribuição e caracterização do agente. Neste contexto, visando um diagnóstico rápido, seguro e preciso desta enfermidade em bovinos, objetivou-se detectar o DNA de Brucella spp por meio da técnica de PCR em Tempo Real em lesões sugestivas identificadas durante a inspeção sanitária de rotina em matadouros-frigoríficos sob Inspeção Federal no estado de Goiás. Tais lesões abrangeram a bursite cervical, lesões testiculares, pulmonares, hepáticas e de linfonodos mandibular, retrofaríngeo, esofageano, intercostal, apical, mediastínico, traqueobrônquico, inguinal, isquiático, poplíteo e mesentérico. Para tanto, no procedimento de colheita de amostras, foram utilizados cartões de celulose destinados ao armazenamento de material biológico (cartão FTA® Elute), por impregnação do material na matriz fibrosa do cartão. As análises laboratoriais foram efetuadas em 47 amostras provenientes de fluidos e tecido animal, colhidas em carcaças e vísceras de 40 bovinos com suspeita de brucelose e desenvolvidas no Laboratório de Biologia Molecular do Centro de Pesquisa em Alimentos da Escola de Veterinária e Zootecnia da Universidade Federal de Goiás (LBM/CPA/EVZ/UFG). Detectou-se o DNA de Brucella spp em 42,5% dos bovinos que apresentaram lesões sugestivas e em 38,3% das amostras totais. Verificou-se que o emprego da técnica de PCR em Tempo Real associada ao método FTA® Elute, é uma ferramenta de diagnóstico importante no processo de julgamento e destino de carcaças e vísceras dos animais de abate, tendo em vista que confere agilidade e eficiência no diagnóstico das enfermidades, auxiliando o Serviço de Inspeção Federal no cumprimento de sua missão, ou seja, de colocar à disposição do consumidor, alimentos seguros.
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