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Otimização das condições de enchimento de colunas de cromatografia liquida de alta eficiencia - CLAE

Costa, Paulo Afonso da 13 July 2018 (has links)
Orientador : Kenneth E. Collins / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-13T23:10:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Costa_PauloAfonsoda_M.pdf: 2024111 bytes, checksum: 08bc891d762b2bec63ec5323479fe02f (MD5) Previous issue date: 1990 / Mestrado
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Sintese de oligossacarideos por inulinase de Kluyveromyces bulgarius

Santos, Andrelina Maria Pinheiro 19 February 1998 (has links)
Orientador: Francisco Maugeri Filho / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-23T09:26:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Santos_AndrelinaMariaPinheiro_M.pdf: 4241361 bytes, checksum: fde869175e4b17091d71a31d9d208cf9 (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: Oligossacarídeos são compostos com grande potencial de aplicação na indústria alimentícia, e vem recebendo atenção especial de muitos pesquisadores. Em particular, tem-se os frutooligossacarídeos, que são açúcares de baixo teor calórico, não cariogênico, diabético e apresenta como principal característica estimular a produção da bifidobactéria. Este trabalho teve como objetivo estudar as características das enzimas inulinases com atividade de transfrutosilação produzidas por diferentes microrganismos. Foram estudados o efeito do pH, da temperatura e do tempo de reação de transfrutosilação ou na produção de frutooligossacarídeos. As enzimas foram produzidas por fermentação dos microrganismos Kluyveromyces bulgaricus A TCC 16045, Kluyveromyces lactis e Kluyveromyces fragilis. Durante a fermentação foram analisadas atividade enzimática, pH, ART e massa seca. A purificação da enzima foi realizada através da precipitação com etanol e cromatografia em coluna de troca aniônica em resina Q-Sepharose Fast Flow em sistema FPLC (Fast Protein Liquid Chromatography). Os produtos das sínteses foram identificados e quantificados por cromatografia liquida (HPLC). Verificou-se que os extratos enzimáticos bruto de K. lactis e K. fragilis possuem atividade de p-frutosiltransferase e p-frutosilhidrolase e, observou-se a produção de um polímero insolúvel em água nas condições de reação. A enzima produzida por K. bulgaricus apresentou atividade p-frutosiltransferase e 'Pfrutosilhidrolase, sendo que a atividade de p-frutosilhidrolase é maior do que a Pfrutosiltransferase. A enzima foi caracterizada como inulinase, cuja relação S/I(S=atividade de invertase e I = atividade inulinolítica) é igual a 3,86. A purificação da enzima foi realizada através da precipitação com etanol (70% de saturação a -15°C), seguida por cromatografia de troca aniônica, obtendo-se um fator de purificação e rendimento de 1,45 e 67,77% e 9,18 e 52,09%, respectivamente. Durante o estudo da ação de transfrutosilação verificou-se a formação de oligossacarídeos, caracterizados como frutooligossacarídeos, identificados principalmente como kestose e nistose. A reação foi conduzida numa faixa de pH 4,0 a 6,0, temperatura de 30 a 50°C, tempo de 60 horas e concentração de sacarose a 50%. Na condição de pH 6,0 e temperatura de 50°C, obteve-se uma concentração máxima de frutooligossacarídeos de 51,68 g/l (94% de kestose e 6% de nistose) / Abstract: Oligosaccharides are a class of compounds with a great potential for application in the food industry, so that they have been studied by many researchers. The fructooligosaccharides which contains low calories, are noncariogenic, and suitable for diabetics and estimulate particularlly the production of bifidobacteria. The objective of this work is to study the characteristics of inulinases with transfructosilation activity produced by differents microrganisms. The effect of pH, temperature and time reaction in the fructooligosaccharides production were studied. The enzymes are produced by fermentation with the following microrganisms: K/uyveromyces bu/garicus ATCC 16045, K/uyveromyces /actis K/uyveromyces fragilis. During fermentation the enzymatic activity, pH, ART and dry weight are analyzed. The enzyme purification was carried out with ethanol and FPLC (Fast Protein Liquid Chromatography), using Q-Sepharose Fast Flow column chromatography. The synthesis products were identified and mesured by liquid chromatography (HPLC). It was observed that the raw enzymatic material of K. /actis and K. fragilis showed f3-fructosiltransferase and ?-fructosilhidrolase activity, as well as the production of a water insoluble polymer. Also, the enzyme produced by K. bu/garicus showed of ?-fructosiltransferase and ?-fructosilhidrolase activity, however the f3-fructosilhidrolase activity was higher than ?-fructosiltransferase. The enzyme was characterized as inulinase, with ratio S/I (S=invertase activity and I =inulinase activity) equals to 3.86. The purification was carried out by precipitation with ethanol (70% of saturation at -15°C), followed by anionic exchange chromatography. Purification factors and efficiencies were respectively 1.45 and 67.77% for the first step and 9.18 and 52.09% for second one. During the study of the transfructosilation activity it was observed that the production of oligosaccharides, which were characterized as frutooligosaccharides, identified mainly as kestose and nistose. The reaction was carried out in the following conditions: p~ of 4.0-6.0, temperature of 30-50°C, reaction time of 60 hours and sucrose concentration of 50%. The maximum concentration of frutooligosaccharides was 51.68 g/L(94% kestose and 6% nistose), obtained at pH 6.0 and temperature at 50°C / Mestrado / Mestre em Engenharia de Alimentos
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Novos agentes silitantes e suas aplicações na modificação da silica gel cromatografica

Silva, Cesar Ricardo 02 August 2018 (has links)
Orientadores: Claudio Airoldi, Isabel C. S. F. Jardim / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-02T18:53:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_CesarRicardo_D.pdf: 6982986 bytes, checksum: c28ab02b1db6ac81bc52fd0e807b9727 (MD5) Previous issue date: 2002 / Doutorado
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Imobilização por radiação gama de fase estacionaria liquida sobre suporte de silica para uso em cromatografia liquida de alta eficiencia (CLAE)

Anazawa, Tania Akiko 14 July 2018 (has links)
Orientador : Isabel Cristina Sales Fontes Jardim / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-14T02:25:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Anazawa_TaniaAkiko_M.pdf: 4508581 bytes, checksum: 833b979ae17d73a3c7f4647fd9f2d2b4 (MD5) Previous issue date: 1992 / Mestrado
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Desenvolvimento de colunas para UPLC

Lima, Maria Aparecida Fernandes de 14 July 2018 (has links)
Orientador : Kenneth Elmer Collins / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-14T16:24:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lima_MariaAparecidaFernandesde_D.pdf: 10046914 bytes, checksum: 95b231f08dea27247ac1ce1168ba65a0 (MD5) Previous issue date: 1988 / Doutorado
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Determinação de carotenoides provitamina a por cromatografia em coluna aberta e cromatografia liquida de alta eficiencia

Carvalho, Paulo Roberto Nogueira 13 July 2018 (has links)
Orientador : Carol Hollingworth Collins / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-13T23:11:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carvalho_PauloRobertoNogueira_M.pdf: 2513560 bytes, checksum: 7b0e1a1a46b3bbfe873fe35a0d257029 (MD5) Previous issue date: 1990 / Mestrado
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Estudo de bioequivalencia de duas formulações de comprimidos de fluconazol em voluntarios sadios

Moraes, Leonardo Augusto 26 November 1997 (has links)
Orientador: Gilberto de Nucci / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-23T06:49:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Moraes_LeonardoAugusto_M.pdf: 991347 bytes, checksum: ed940f006679cb2603c9baa7e1eb201b (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: A avaliação da eficácia e segurança, bem como da qualidade farmacêutica são pré-requisitos para o registro de drogas em muitos países. Neste contexto, a qualidade da formulação não é unicamente caracterizada por investigaçõe:s "in vitro", mas também por estudos de biodisponibilidade em voluntários sadios, que determinam importância na identificação de formas farmacêuticas que ap'resentam falhas terapêuticas e na seleção de similares disponíveis no mercado. o United States Food and Drug Administration (US FDA), define que duas formulações farmacêuticas são consideradas equivalentes quanpo a concentração plasmática da droga versus tempQ,. quando administradas na mesma dose molar, nas mesmas condições, não apresentem diferenças significativas em relação a velocidade e extensão de absorção. (Bio -International 94) Neste trabalho, avaliamos a bioequivalência de duas formulações de comprimidos de fluconazol: Fluconal, comprimidos 150mg, (Laboratório Libbs, formulação teste) versus Zoltec, comprimidos 15Qmg, (Laboratório Pfizer, formulação referência), em dezoito voluntários sadios do sexo masculino. O protocolo clínico apresentava delineamento aleatório cruzado de dois períodos, com intervalo de quatorze dias entre. as doses, aprovado pelo comitê de ética do Hospital Universitário da Universidade Federal do Ceará - UFC. A concentração plasmática de fluconazol foi determinada por Cromatografia Líquida de Alta Resolução com detecção ultravioleta. Os parâmetros farmacocinéticos obtidos de cada formulação de fluconazol, foram: área sob a curva da concentração plasmática em função do tempo (AUC [O-48h]), concentração plasmática máxima obtida (CMAX), tempo empregado para ser alcançada a GMAX (tmax), área sob a curva extrapolada para o infinito (AUC [0- ) Todos os parâmetros farmacocinéticos foram analisados por métodos estatísticos paramétricos e não-paramétricos. As médias geométricas das razões individuais Zoltec/Fluconal foram 96.7 para AUC[O-48h] (IC 90% (81.7 - 114), 100.7 para AUC[o-oo] (IC90% 85.6 - 118), e 77.4 para Cmax (IC90% 66.7 - 133). A média aritmética para as diferenças individuais de T max foi 1.7h, com IC 90% com valores estatisticamente diferentes de zero. . De acordo com os resultados obtidos e requerimentos determinados pelo FDA (USA), concluímos serem as duas formulações não bioequivalentes, tanto na extensão quanto na velocidade de absorção / Abstract: The bioequivalence study of two fluconazole tablet formulations: Fluconal (from Laboratório Libbs), and Zoltec (from Laboratório Pfizer) were compared in eighteen healthy male volunteers who received a single dose of 150 mg of each formulation, in an open randomized two period crossover fashion with a fourteen day washout interval between doses. Plasma samples. were obtained over a 48h interval and fluconazol concentrations were determined by HPLC with UV detection. Fromthe plasma fluconazole concentration vs time curves, AUC [O-48h] (area under the concentration vs time curves from O to 48h), Cmax (maximum achieved concentration), T max (time to achieve Cmax) and AUC (area under the concentration vs time curves extrapolated to infinity) were obtained. Ali these variables were analysed using both parametric and non-parametric statistics. Geometric mean Zoltec/Fluconal individual percent ratios were 96.7% (IC 90% 81.7 -114) for AUC[O-48h], 100.7% (IC 90% 85.6 -118), for AUC, 77.4% (IC 90% 66.7 - 133) for Cmax. Although the AUC[0-48] geometric mean ratio (fluconallzoltec) was inside both the FDA (0.8-1.25) and European Community (0.71.43) proposed limits, we cannot affirm that Libbs fluconal is bioequivalent to Pfizer Zoltec according to the extension of absorption, the reason for that being two fold: 1st the calculated area obtained with the [0-48] was less than the 80% of the extrapolated area [0- ] and 2 nd - the number of volunteers was nout enough, since the power obtained for the statistical analysis was 0.52 (Iess than 0.8 as required). This implies in a possible type two error (not detecting a statistical difference due to power weakness) / Mestrado / Mestre em Farmacologia
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Desarrollo y validación prospectiva de una técnica analítica por cromatografía líquida de alta performance (HPLC) para el Enalapril 10 mg tabletas recubiertas

Morales de la Cruz, César January 2004 (has links)
La validación de un método analítico, constituye un instrumento importante para garantizar la calidad del medicamento, En el presente trabajo se demostró la aplicabilidad del método analítico propuesto por la USP 26, aun introduciendo cambios significativos, para el análisis del Enalapril Maleato por cromatografía liquida de alta Performance (HPLC) en el Perú, el cual seguidamente se validó. Con el cual se establece una evidencia documentada de que el método analítico es capaz de cumplir en forma consistente y repetitiva las especificaciones establecidas. Se presentan los resultados obtenidos en la validación del método analítico por cromatografía liquida de alta performance (HPLC). Previo al inicio de la validación, se realizó un ensayo de adaptabilidad del sistema, con el cual se comprobó el buen funcionamiento del sistema de bombeo, inyector, horno y detector. El método fue validado, siguiendo una metodología de trabajo elaborado previamente en un protocolo de validación, donde se analizaron diferentes parámetros como son: Selectividad, Linealidad, Precisión, Exactitud, Rango y la adecuación del sistema. Definidas las condiciones, se inicia los análisis para la evaluación de los parámetros de validación y se demuestra mediante el diseño experimental y los procedimientos estadísticos empleados, que el método analítico propuesto es selectivo, porque no se evidencian que los productos de degradación interfieran en el análisis del principio activo, además se obtiene un porcentaje de pureza de pico del 100%; es lineal porque se obtiene un coeficiente de correlación r = 0,99987; es precisa ya que para la repetibilidad se obtiene una RSD de 0,64%; y para la reproducibilidad se obtiene una RSD de 0,88%; y finalmente es exacto porque se obtiene un porcentaje de recuperación de 99,88%. Cumpliendo los parámetros de validación establecidos en las obras oficiales, se comprobó de esta forma la validez del método analítico. / --- The validation of an analytic method, constitutes an important instrument to guarantee the quality of the medication, Presently work was demonstrated the applicability of the analytic method proposed by the USP 26, even introducing significant changes, for the analysis of the Enalapril Maleato for cromatografía liquidates of high Performance (HPLC) in the Peru, the one which subsequently you been worth. With which settles down a documented evidence that the analytic method is able to complete in consistent and repetitive form the established specifications. The results are presented obtained in the validation of the analytic method by cromatografía it liquidates of high performance (HPLC). Previous to the beginning of the validation, one carries out a rehearsal of adaptability of the system, with which was proven the good operation of the system of pumping, injector, oven and detecting. The method was validated, following a work methodology elaborated previously in a validation protocol, where different parameters were analyzed like they are: Selectivity, Linealidad, Precision, Accuracy, Range and the adaptation of the system. Defined the conditions the analyses begin for the evaluation of the validation parameters and it is demonstrated by means of the experimental design and the procedures statistical employees that the Selective proposed analytic method because they are not evidenced that the degradation products interfere in the analysis of the active principle, a percentage of purity of pick of 100% is also obtained; it is lineal because one obtains a correlation coefficient r = 0,99987; it is he/she specifies since for the repetibilidad a RSD of 0,64% it is obtained; and for the reproducibilidad a RSD of 0,88% is obtained; and finally it is exact because one obtains a percentage of recovery of 99,88%. Completing the established validation parameters in the official works, he/she was proven this way the validity of the analytic method. / Tesis
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Desarrollo y validación prospectiva de una técnica analítica por cromatografía líquida de alta performance (HPLC) para el Enalapril 10 mg tabletas recubiertas

Morales de la Cruz, César January 2004 (has links)
La validación de un método analítico, constituye un instrumento importante para garantizar la calidad del medicamento, En el presente trabajo se demostró la aplicabilidad del método analítico propuesto por la USP 26, aun introduciendo cambios significativos, para el análisis del Enalapril Maleato por cromatografía liquida de alta Performance (HPLC) en el Perú, el cual seguidamente se validó. Con el cual se establece una evidencia documentada de que el método analítico es capaz de cumplir en forma consistente y repetitiva las especificaciones establecidas. Se presentan los resultados obtenidos en la validación del método analítico por cromatografía liquida de alta performance (HPLC). Previo al inicio de la validación, se realizó un ensayo de adaptabilidad del sistema, con el cual se comprobó el buen funcionamiento del sistema de bombeo, inyector, horno y detector. El método fue validado, siguiendo una metodología de trabajo elaborado previamente en un protocolo de validación, donde se analizaron diferentes parámetros como son: Selectividad, Linealidad, Precisión, Exactitud, Rango y la adecuación del sistema. Definidas las condiciones, se inicia los análisis para la evaluación de los parámetros de validación y se demuestra mediante el diseño experimental y los procedimientos estadísticos empleados, que el método analítico propuesto es selectivo, porque no se evidencian que los productos de degradación interfieran en el análisis del principio activo, además se obtiene un porcentaje de pureza de pico del 100%; es lineal porque se obtiene un coeficiente de correlación r = 0,99987; es precisa ya que para la repetibilidad se obtiene una RSD de 0,64%; y para la reproducibilidad se obtiene una RSD de 0,88%; y finalmente es exacto porque se obtiene un porcentaje de recuperación de 99,88%. Cumpliendo los parámetros de validación establecidos en las obras oficiales, se comprobó de esta forma la validez del método analítico. / The validation of an analytic method, constitutes an important instrument to guarantee the quality of the medication, Presently work was demonstrated the applicability of the analytic method proposed by the USP 26, even introducing significant changes, for the analysis of the Enalapril Maleato for cromatografía liquidates of high Performance (HPLC) in the Peru, the one which subsequently you been worth. With which settles down a documented evidence that the analytic method is able to complete in consistent and repetitive form the established specifications. The results are presented obtained in the validation of the analytic method by cromatografía it liquidates of high performance (HPLC). Previous to the beginning of the validation, one carries out a rehearsal of adaptability of the system, with which was proven the good operation of the system of pumping, injector, oven and detecting. The method was validated, following a work methodology elaborated previously in a validation protocol, where different parameters were analyzed like they are: Selectivity, Linealidad, Precision, Accuracy, Range and the adaptation of the system. Defined the conditions the analyses begin for the evaluation of the validation parameters and it is demonstrated by means of the experimental design and the procedures statistical employees that the Selective proposed analytic method because they are not evidenced that the degradation products interfere in the analysis of the active principle, a percentage of purity of pick of 100% is also obtained; it is lineal because one obtains a correlation coefficient r = 0,99987; it is he/she specifies since for the repetibilidad a RSD of 0,64% it is obtained; and for the reproducibilidad a RSD of 0,88% is obtained; and finally it is exact because one obtains a percentage of recovery of 99,88%. Completing the established validation parameters in the official works, he/she was proven this way the validity of the analytic method.
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Estudo de biodisponibilidade relativa de duas formulações de felodipina em plasma humano utilizando cromatografia liquida acoplada a espectrometria de massas

Migliorança, Luis Henrique 12 June 2005 (has links)
Orientador: Gilberto de Nucci / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-06T06:05:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Miglioranca_LuisHenrique_M.pdf: 3126825 bytes, checksum: 2c21ff2875a4ccdf7b161478ecc7b5a3 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Foi desenvolvido um método rápido, sensível, robusto e específico para determinação e quantificação da felodipina, em plasma sanguíneo humano por cromatografia líquida acoplada com espectrometria de massas usando nimodipina como padrão interno. A felodipina foi extraída em plasma humano, utilizando o procedimento de extração líquido/líquido com éter dietílicolhexano (80:20 v/v) como eluente. O método inclui uma corrida cromatográfica de 5 minutos usando uma coluna analítica Cg(100 mm x 4,6 mm d.i.) e a curva de calibração foi linear de 0,02 nglmL a 10 ng/mL (r2 > 0,994). A precisão entre as corridas, determinadas pelo desvio padrão relativo de replicatas dos controles de qualidades, foi 5,7% (0,06 ng/mL), 7,1% (0,6 ng/mL) e 6,8% (7,5 ng/mL). A exatidão entre as corridas foi:!: 0;2,1 e 3,1% para as concentrações acima mencionadas, respectivamente / Abstract: A rapid, sensitive,robust and specificmethodwas developed for the determinationand quantitation of felodipine, in human blood plasma by liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometryusing nimodipine as internalstandardoFelodipinewas extractedfrom 0.5mL human plasma by use of a liquid/liquidprocedureusing diethyIetherlhexane(80/20:v/v) as eluent. The method inc1uded a chromatographicrun of 5 minutes using a Cs analytical column (100 mm x 406mm iod.)and the calibrationcurve was linear over the range from 0.02 nglmL to 10nglmL(~ > 0.994). The between-run precision, determined as relative standard deviation ofreplicate qualitycontroIs,was 5.7%(0.06 ng/mL),7.1% (0.6ng/mL)and 6.8% (7.5 ng/mL). The between-runaccuracy was :I: 0, 2.1 and 3.1% for the above-mentioned concentrations,respectively / Mestrado / Mestre em Farmacologia

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