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Micropropagação e uso de marcadores moleculares na determinação do sexo do mamoeiro

Zaidan, Humberto Actis [UNESP] 19 July 2002 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2002-07-19Bitstream added on 2014-06-13T20:23:23Z : No. of bitstreams: 1 zaidan_ha_dr_jabo.pdf: 4337197 bytes, checksum: 7ae2ec067707658825aa60218487dc27 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O mamoeiro (Carica papaya L.) é uma planta normalmente propagada por sementes. Um dos seus principais cultivares é o Sunrise Solo, que em plantios comerciais, apresenta plantas hermafroditas e femininas em proporção 2:1, sendo que o sexo dessas plantas só pode ser identificado de 3 a 4 meses após o plantio, quando surgem os primeiros botões florais. Por outro lado, o cv. Cariflora, que é dióico, apresenta plantas masculinas e femininas, em proporção 1:1, e tem a vantagem de ser tolerante ao vírus do mosaico do mamoeiro. Um dos objetivos deste trabalho, foi desenvolver um protocolo de micropropagação, a partir de plantas matrizes do cv. Sunrise Solo que apresentassem características desejáveis como sexo hermafrodita bem definido. A imersão dos explantes em solução contendo rifampicina (300 mg.L-1), foi imprescindível para a obtenção de ápices caulinares provenientes do campo livres de contaminação por bactérias endógenas. Carvão ativado (1 g.L-1) inibiu totalmente o enraizamento in vitro do mamoeiro e proporcionou um maior desenvolvimento da parte aérea, em comparação com os meios sem carvão. O maior número de plântulas com rizogênese foi obtido com o uso de 0,8 mg.L-1 de AIB (Ácido 3-Indolbutírico), em meio MS (Murashige e Skoog) modificado, contendo a metade da concentração dos macronutrientes. Os mamoeiros clonados, crescendo em condições de campo, apresentaram características morfológicas e sexo das flores compatíveis com as plantas matrizes que as originaram, e apresentaram menor altura de inserção de flores no caule, quando comparados às plantas matrizes. Foram encontrados marcadores moleculares RAPD (DNA polimórfico amplificado ao acaso), SCAR (Região amplificada de sequência caracterizada) e fAFLP (Polimorfismo de comprimento de fragmentos amplificados, com marcação fluorescente) capazes de identificar precocemente o sexo das mudas... . / Papaya (Carica papaya L.) is usually propagated from seeds. One of the principal papaya cultivars is Sunrise Solo, which when planted commercially presents hermaphrodite and feminine plants at a ratio of 2:1, although these plants can only be sexed three or four months after planting, when the first floral buds emerge. The cultivar Cariflora is dioecious, presenting equal numbers of male and female plants, and is tolerant to the papaya ringspot virus (PRV). One of the objectives of the work presented in this thesis was to develop a micropropagation protocol for cv Sunrise Solo plants presenting desirable characteristics such as well-defined hermaphrodism. To produce shoot apices free from endogenous bacterial contamination the explants collected in the field were immersed in a solution containing 300 mg.L-1 rifampicin. Activated carbon added to the culture medium at 1 g.L-1 totally inhibited in vitro rooting and allowed greater development of the aerial parts of the plantlets than that which occurred on culture medium without activated carbon. The greatest number of plants with rhizogenesis was obtained in modified MS (Murashige and Skoog) medium containing half-strength of macronutrients supplemented with 0.8 mg.L-1 IBA (Indole-3-butyric acid). When grown in the field, the cloned papaya presented morphological and sexual characteristics typical of the plants from which they had been obtained. Random amplified polymorphic DNA (RAPD), Sequence Characterized Amplified Region (SCAR), and fluorescent Amplified Fragment Length Polymorphism (fAFLP) markers were found which were capable of the early sexing of seedlings. The UBC210438 RAPD marker was efficient at precociously sexing both cloned plants and the S1 progeny of cv. Sunrise Solo, as well as differentiating between male and female plants of cv Cariflora... (Complete abstract, access undermentioned eletronic address)
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Micropropagação e uso de marcadores moleculares na determinação do sexo do mamoeiro /

Zaidan, Humberto Actis. January 2002 (has links)
Orientadora: Eliana Gertrudes Macedo Lemos / Banca: Carlos Ruggiero / Banca: Maria Helena de Souza Goldman / Banca: Luiz de Souza Corrêa / Banca: Walter José Siqueira / Resumo: O mamoeiro (Carica papaya L.) é uma planta normalmente propagada por sementes. Um dos seus principais cultivares é o Sunrise Solo, que em plantios comerciais, apresenta plantas hermafroditas e femininas em proporção 2:1, sendo que o sexo dessas plantas só pode ser identificado de 3 a 4 meses após o plantio, quando surgem os primeiros botões florais. Por outro lado, o cv. Cariflora, que é dióico, apresenta plantas masculinas e femininas, em proporção 1:1, e tem a vantagem de ser tolerante ao vírus do mosaico do mamoeiro. Um dos objetivos deste trabalho, foi desenvolver um protocolo de micropropagação, a partir de plantas matrizes do cv. Sunrise Solo que apresentassem características desejáveis como sexo hermafrodita bem definido. A imersão dos explantes em solução contendo rifampicina (300 mg.L-1), foi imprescindível para a obtenção de ápices caulinares provenientes do campo livres de contaminação por bactérias endógenas. Carvão ativado (1 g.L-1) inibiu totalmente o enraizamento in vitro do mamoeiro e proporcionou um maior desenvolvimento da parte aérea, em comparação com os meios sem carvão. O maior número de plântulas com rizogênese foi obtido com o uso de 0,8 mg.L-1 de AIB (Ácido 3-Indolbutírico), em meio MS (Murashige e Skoog) modificado, contendo a metade da concentração dos macronutrientes. Os mamoeiros clonados, crescendo em condições de campo, apresentaram características morfológicas e sexo das flores compatíveis com as plantas matrizes que as originaram, e apresentaram menor altura de inserção de flores no caule, quando comparados às plantas matrizes. Foram encontrados marcadores moleculares RAPD (DNA polimórfico amplificado ao acaso), SCAR (Região amplificada de sequência caracterizada) e fAFLP (Polimorfismo de comprimento de fragmentos amplificados, com marcação fluorescente) capazes de identificar precocemente o sexo das mudas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: Papaya (Carica papaya L.) is usually propagated from seeds. One of the principal papaya cultivars is Sunrise Solo, which when planted commercially presents hermaphrodite and feminine plants at a ratio of 2:1, although these plants can only be sexed three or four months after planting, when the first floral buds emerge. The cultivar Cariflora is dioecious, presenting equal numbers of male and female plants, and is tolerant to the papaya ringspot virus (PRV). One of the objectives of the work presented in this thesis was to develop a micropropagation protocol for cv Sunrise Solo plants presenting desirable characteristics such as well-defined hermaphrodism. To produce shoot apices free from endogenous bacterial contamination the explants collected in the field were immersed in a solution containing 300 mg.L-1 rifampicin. Activated carbon added to the culture medium at 1 g.L-1 totally inhibited in vitro rooting and allowed greater development of the aerial parts of the plantlets than that which occurred on culture medium without activated carbon. The greatest number of plants with rhizogenesis was obtained in modified MS (Murashige and Skoog) medium containing half-strength of macronutrients supplemented with 0.8 mg.L-1 IBA (Indole-3-butyric acid). When grown in the field, the cloned papaya presented morphological and sexual characteristics typical of the plants from which they had been obtained. Random amplified polymorphic DNA (RAPD), Sequence Characterized Amplified Region (SCAR), and fluorescent Amplified Fragment Length Polymorphism (fAFLP) markers were found which were capable of the early sexing of seedlings. The UBC210438 RAPD marker was efficient at precociously sexing both cloned plants and the S1 progeny of cv. Sunrise Solo, as well as differentiating between male and female plants of cv Cariflora... (Complete abstract, access undermentioned eletronic address) / Doutor
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MULTIPLICAÇÃO IN VITRO DE MAMOEIRO TAINUNG 01

Schmildt, Omar 23 February 2006 (has links)
Made available in DSpace on 2016-12-23T14:37:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao.pdf: 478233 bytes, checksum: 59f53a87f76279d2bcf9fe36ad7f2a18 (MD5) Previous issue date: 2006-02-23 / Experiments were accomplished in establishment and multiplication medium with the objective of evaluating the micropropagation of the papaya tree (Carica papaya L.) Hybrid 'Tainung 01', generation F1, being used apical sections and apical sections of lateral buds of juvenile plants, cultivated in greenhouse. In the MS establishment medium, being used apical sections, different combinations of growth regulators were tested NAA (0.093; 0.931 and 1.862 mg L-1) and kinetin (5.38; 10.76 and 21.52 mg L-1) for identification of the best relationship for the survival, reactivity and callus mass. With the use of 0.093 mg L-1 of NAA combined with 5.38 mg L-1 of kinetin was obtained the best rosette of leaves formation with 100% of cultures reactivate, indicating there to be adaptation of the explants in vitro, besides to smallest callus formation, could be proven with the good reaction of these explants in MS multiplication medium with NAA to 0.093 mg L-1 and BAP to 0.45 mg L-1 during five subculture, with rate of constant multiplication of 5.288:1. In a second stage, with the use of apical sections of lateral buds, the adenine sulfate was evaluated in the multiplication medium. For the preparation of the establishment medium the best combination of the growth regulators was used NAA and kinetin obtained previously, while for the multiplication medium NAA was used to 0.093 mg L-1 and BAP to 0.45 mg L-1, and different levels of adenine sulfate (0; 30; 60; 90 and 120 mg L-1), associated with removal or not of the leaves of the rosette of leaves formed in the establishment medium. The tufts of shoots were subculture every 30 days in smaller tuft and, at the end of the fourth subculture they were made the evaluations of the fresh mass of the aerial part, number of capable shoots (&#8805; 5 mm) and no capable (< 5 mm) to the promoting root formation, and the visual aspect of the tufts of shoots. The best answers for the number of capable shoots to the promoting root formation (&#8805; 5 mm) they were found with the presence of the leaves, for the treatments 0, 30, 60 and 90 mg L-1 of adenine sulfate. It is recommended to use 30 mg L-1 of adenine sulfate in the multiplication medium for the quality and homogeneity of the produced aerial parts, with prolonged shoots and long petiole, with good pattern for subsequent promoting root formation. / Foram realizados experimentos em meio de estabelecimento e de multiplicação com o objetivo de avaliar a micropropagação do mamoeiro (Carica papaya L.) Híbrido Tainung 01 , geração F1, utilizando-se segmentos apicais e segmentos apicais de brotações laterais provenientes das plantas juvenis cultivadas em casa de vegetação. No meio de estabelecimento MS, utilizando-se segmentos apicais, foram testadas diferentes combinações dos reguladores de crescimento ANA (0,093; 0,931 e 1,862 mg L-1) e Cinetina (5,38; 10,76 e 21,52 mg L-1) para identificação da melhor relação para a sobrevivência, a reatividade e a massa de calo. Com a utilização de 0,093 mg L-1 de ANA combinado com 5,38 mg L-1 de Cinetina, obteve-se a melhor formação de roseta foliar com 100% de culturas reativas, indicando haver adaptação dos explantes in vitro, além da menor formação de calo, podendo ser comprovado com a boa reação destes explantes em meio de multiplicação MS com ANA a 0,093 mg L-1 e BAP a 0,45 mg L-1, durante cinco subcultivos, com taxa de multiplicação constante de 5,288:1. Numa segunda etapa, com a utilização de segmentos apicais de brotações laterais, avaliou-se a multiplicação em meio MS com diferentes níveis de sulfato de adenina. Para o preparo do meio de estabelecimento, utilizou-se a melhor combinação dos reguladores de crescimento ANA e Cinetina obtidos anteriormente, enquanto que para o meio de multiplicação, usou-se ANA a 0,093 mg L-1, BAP a 0,45 mg L-1 e diferentes níveis de sulfato de adenina (0; 30; 60; 90 e 120 mg L-1), associados com remoção ou não das folhas da roseta foliar formada no meio de estabelecimento. Os tufos de ramos foram subcultivados a cada 30 dias em tufos menores, e ao final do quarto subcultivo, foram feitas as avaliações da massa fresca da parte aérea, número de ramos aptos (&#8805; 5 mm) e não aptos (< 5 mm) ao enraizamento e o aspecto visual dos tufos de ramos. As melhores respostas para o número de ramos aptos ao enraizamento (&#8805; 5 mm) foram encontradas com a presença das folhas para os tratamentos 0, 30, 60 e 90 mg L-1 de sulfato de adenina. Recomenda-se utilizar 30 mg L-1 de sulfato de adenina no meio de multiplicação pela qualidade e homogeneidade das partes aéreas produzidas, com ramos alongados e pecíolos longos, com bom padrão para posterior enraizamento.

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