CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de NÃvel Superior / Clostridium difficile (C. difficile) is the major cause of colitis associated with the use of antibiotics, with significant morbidity and mortality. The enteric nervous system (ENS) is located in the gastrointestinal tract (GIT) and has an important function of regulating the digestive system. The P2X7 receptor participates in the regulation of cellular permeability, cytokine release and apoptosis, processes that are involved in the pathogenesis of C. difficile induced disease.The aim of this study was to analyze the role of the P2X7 receptor in enteritis induced by C. difficile toxin A (TcdA). The mouse ileal loop was injected with saline (Sodium Chloride 0.9% - Control) or TcdA (50 μg / loop) in mice previously treated with the inhibitors: BBG (50 mg/kg) or A438079 (10 μM) i.p.injection 1 h prior to TcdA (TcdA + BBG; TcdA + A438079) or saline injection. The animals were euthanized after 4h latter and the ileal loop collected for the following analyzes: immunofluorescence for ChAT, NOS, P2X7 and calretinin in membrane preparations, immunohistochemistry for GFAP, HuC / D, S-100β, TUNEL and PCR for P2X7. The results demonstrated that TcdA significantly reduced myenteric plexus neurons in 66.42% when compared to the control, while in the membrane preparations a significant reduction of the immunoreactive neurons to ChAT was observed in 23.21% and Calretinin 28.17%. However, there was a 21.23% increase in labeling for the P2X7 receptor over the control. In the ileal tissue there was an increase of 411.95% and 22.40% respectively in the P2X7 positive area and in the gene expression. In relation to the glial markers, an increase of 125.71% and 144.30% was observed for GFAP and S-100β, respectively. In animals treated with inhibitors P2X7; BBG and A438079, as observed an improvement in histological parameters . In addition , a significant reduction in the number of apoptotic cells decrease in GFAP and S-100β-labeled cells, and cytokines ( TNF-α, IL-1β, IL -6 and IL-8) levels, compared to the control. This was associated with a significant increase in the HuC/D positive area . From these results, it is concluded that TcdA promotes changes in the enteric nervous system, increasing neuronal death and activating glial cells, and that the P2X7 receptor plays an important role in the changes induced by C. difficile TcdA. / O Clostridium difficile (C. difficile) à a maior causa de colite associada ao uso de antibiÃticos, com significante morbidade e mortalidade. O sistema nervoso entÃrico (SNE) està localizado no trato gastrointestinal (TGI) e possui importante funÃÃo de regulaÃÃo do sistema digestÃrio. O receptor P2X7 presente nas cÃlulas gliais entÃricas (CGE) e no SNE participa na regulaÃÃo da permeabilidade celular, liberaÃÃo de citocinas e apoptose, processos que estam envolvidos na patogÃnese do C. difficile. O objetivo deste estudo foi analisar o papel do receptor P2X7 na enterite induzida pela toxina A (TcdA) do C. difficile. A alÃa ileal dos camundongos foi injetada com salina (Cloreto de SÃdio 0,9%- Controle) ou TcdA (50 μg/alÃa) em camundongos previamente tratados com os inibidores: BBG (50 mg/kg) ou A438079 (10 μM) via intraperitoneal 1h antes da injeÃÃo da TcdA ou salina. Os animais foram eutanaziados apÃs 4h da injeÃÃo e a alÃa ileal coletada para as seguintes analises: imunofluorescÃncia para ChAT, NOS, P2X7 e calretinina nos preparados de membrana, imunohistoquÃmica para GFAP, HuC/D, S-100β, TUNEL e PCR para P2X7. Os resultados demonstraram que a TcdA reduziu significativamente em 66,42% os neurÃnios do plexo mioentÃrico quando comparado ao controle, enquanto nos preparados de membrana observou-se uma reduÃÃo significativa dos neurÃnios imunorreativos a ChAT em 23,21% e Calretinina 28,17%, contudo, houve um aumento de 21,23% da marcaÃÃo para o receptor P2X7 em relaÃÃo ao controle. No tecido ileal verificou-se um aumento de 411,95% e 22,40% respectivamente na Ãrea positiva para P2X7 e na expressÃo gÃnica. Em relaÃÃo aos marcadores gliais, observou-se um aumento de 125,71% e 144,30% para GFAP e S-100β, respectivamente. Nos animais tratados com os inibidores de P2X7: BBG e o A438079 observou-se uma melhora dos parÃmetros histolÃgicos, uma reduÃÃo significativa do nÃmero de cÃlulas apoptÃticas, das cÃlulas marcadas para GFAP e S-100β, das citocinas: TNF-α, IL-1β, IL-6 e IL-8 com relaÃÃo ao controle e um aumento significativo na Ãrea positiva para HuC/D em relaÃÃo a TcdA. A partir desses resultados, concluiu-se que a TcdA promoveu alteraÃÃes no sistema nervoso entÃrico, aumentando a morte neuronal e ativando as cÃlulas da glia, e que o receptor P2X7 tem participaÃÃo importante nas alteraÃÃes induzidas pela TcdA do C. difficile.

The obesity is a complex phenomenon that occurs in an important parcel of the world-wide population, in special in the adult women of lower incomes. The obesity also can be seen as a physical attribute, perceived, interpreted and influenced for the social system. The aim of this study was to understand the perceptions and experiences of women attended in a health family center of the city of Fortaleza with obesity diagnosis. This is study is about a qualitative inquiry with phenomenologic-hermeneutic approach, whose adopted methodology strategy was the joint enters the interviews in depth and the free comment. 8 interviews with women between 28 and 56 years had been carried through, with average of age of 44 years. All presented obesity degree II (BMI= 35,0-39,9kg/m2), and had related the experience with the excess of weight at least for 5 years, moreover they presented hypertension, diabetes, dyslipidemia and osteomuscular problems, the majority was married,house owner and had children. The average of family remuneration was 1-2 minimum wages. The education level was between secondary education and the incomplete fundamental education. The categorization of the empirical material indicated four thematic axles, and from which the axles had been tracings analysis central offices. 1) Body Self-perception ; 2)Etnoethyology of the obesity; 3) Stigma and the Repercussions in the distinct spheres of the life; 4) Treading the Ways of the Cure. Each thematic axle was unfolded in different dimensions. The results had disclosed that the women perceive her excess weight, however they are not classified as obese. The medicine use, the feeding and important moments of life had been considered basic for the explanation of the profile of obesity in the group. Under the women âweighâ stigma and discriminations attributed by their appearance. Finally for the deponents the obesity is an illness that has cure. In this direction, the study it calls attention for importance the multidimensionality of the obesity. Such understanding is basic for the proposal of plans and strategies of attendance in the field of the health politics. / A obesidade à um fenÃmeno complexo que acomete uma parcela importante da populaÃÃo mundial, em especial as mulheres adultas de menor estrato de renda. A obesidade tambÃm pode ser vista como um atributo fÃsico, percebido, interpretado e influenciado pelo sistema social. O objetivo deste estudo foi compreender as percepÃÃes e experiÃncias de mulheres usuÃrias de um centro de saÃde da famÃlia do municÃpio de Fortaleza com diagnÃstico de obesidade. Trata-se de uma investigaÃÃo qualitativa com enfoque fenomenolÃgico-hermenÃutico, cuja estratÃgia metodolÃgica adotada foi a articulaÃÃo entre as entrevistas em profundidade e a observaÃÃo livre. Foram realizadas 8 entrevistas com mulheres entre 28 e 56 anos, com mÃdia de idade de 44 anos. Todas apresentavam obesidade grau II (IMC= 35,0-39,9kg/m2), e referiram a experiÃncia com o excesso de peso hà mais de 5 anos, alÃm disso apresentavam hipertensÃo, diabetes, dislipidemias e problemas osteomusculares, A maioria era casada, dona de casa e tinham filhos. A mÃdia de remuneraÃÃo familiar observada foi de um a dois salÃrios mÃnimos. O nÃvel de escolaridade ficou entre o ensino mÃdio e o fundamental incompleto. A categorizaÃÃo do material empÃrico indicou quatro eixos temÃticos, e a partir dos quais foram traÃados os eixos centrais de anÃlise. 1) Auto-percepÃÃo do corpo; 2) Etnoetiologia da obesidade; 3) Estigma e as RepercussÃes nas distintas esferas da vida; 4) Trilhando os Caminhos da Cura. Cada eixo temÃtico foi desdobrado em diferentes dimensÃes. Os resultados revelaram que as mulheres se percebem com excesso de peso, porÃm nÃo se classificam como obesas. O uso de medicamentos,a alimentaÃÃo e passagens importantes da vida foram consideradas fundamentais para a explicaÃÃo do perfil de obesidade no grupo. Sobre as mulheres âpesamâ estigmas e discriminaÃÃes atribuÃdos a sua aparÃncia. Finalmente para as depoentes a obesidade à uma doenÃa que tem cura. Nesse sentido, o estudo chama atenÃÃo para importÃncia da multidimensionalidade da obesidade. Tal compreensÃo à fundamental para a proposiÃÃo de planos e estratÃgias de atendimento no campo das polÃticas de saÃde.

CoordenaÃÃo de AperfeÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / The hostâs protective mechanisms are mediated by the ability of immunonutrients in defense mechanisms, such as the inflammatory response and antioxidant capacity. Among the most investigated are glutamine, arginine and polyunsaturated fatty acids derived from fish oil, anti-inflammatory agents which act on the synthesis of eicosanoids and regulate the immune response. This study is clinical, prospective, randomized, controlled, double-blind, aimed to identify whether there is any effect arising from nutraceutical preconditioning with use of a supplement containing L-alanyl-glutamine, and arginine mixture of oils containing fatty acids ω3 (EPA, DHA and ALA) on the oxidative stress and immunomodulation in surgical trauma. The supplement was administered in one dose of 200ml/day during the preoperative period (7 days before surgery) in patients undergoing abdominoplastia. Laboratory evaluations were performed before administration of the supplement (7 days before surgery â T0), before the anesthetic induction (T1), in the 1nd postoperative day (T2) and in the 3nd postoperative day (T3). The sample (25 patients) was divided into 2 groups: SNO1 - skim milk (0% fat) and SNO2 â suplement group: Supplement with ω6: ω3 ratio of 1,4:1 and ω9: ω6 ratio of 3,2:1, Arginine (10g/day), L-alanyl-glutamine (15g/day). Values of lymphocytes, leukocytes, TBARS, glutathione peroxidase activity and concentration of total antioxidants in the three times of both groups were analyzed. There was no statistically significant difference between the control and study groups for variables lymphocytes, leukocytes, TBARS, glutathione peroxidase activity. There was a statistically significant difference between the control group and related to the concentration of total antioxidant study. Therefore, oral nutritional supplements containing L-alanyl-glutamine, arginine and oil mixture with a high ratio ω9: ω6 and low ratio ω6:ω3 containing ω3 acids (ALA, DHA and EPA) has nutraceutical effect of preconditioning the values of total antioxidants in surgical trauma in patients undergoing total abdominoplasty. / Os imunonutrientes sÃo responsÃveis pela modulaÃÃo dos mecanismos de defesa e por prepararem o organismo a possÃveis agressÃes futuras. Dentre os mais investigados estÃo a glutamina, a arginina e os Ãcidos graxos poliinsaturados derivados do Ãleo de peixe, agentes anti-inflamatÃrios que atuam na sÃntese de eicosanÃides e regulam a resposta imune. O presente estudo à clÃnico, prospectivo, randomizado, controlado, duplo-cego, cujo objetivo foi identificar se existe algum efeito decorrente do prÃ-condicionamento nutracÃutico com uso de um suplemento contendo L-alanil-glutamina, arginina e mistura de Ãleos contendo Ãcidos graxos ω3 (EPA, ALA e DHA) sobre a imunomodulaÃÃo e o estresse oxidativo no trauma cirÃrgico. O suplemento foi administrado em uma dose de 200ml/dia, durante o perÃodo prÃ-operatÃrio (7 dias antes da cirurgia), em pacientes a serem submetidos à abdominoplastia. AvaliaÃÃes laboratoriais foram realizadas antes da administraÃÃo do suplemento (7 dias antes da cirurgia- T0), antes da induÃÃo anestÃsica (T1) e no 1 pÃs-operatÃrio (T2) e no 3 pÃs-operatÃrio (T3). Vinte e cinco pacientes foram distribuÃdos em 2 grupos: SNO1 â suplemento desnatado (0% de gordura), SNO2 - suplemento com elevada relaÃÃo ω9:ω6, de 3,2:1 e baixa relaÃÃo ω6:ω3, de 1,4:1, Arginina (10g) e L-alanil-glutamina (15g). Foram analisados valores de linfÃcitos, leucÃcitos, TBARS, atividade de glutationa peroxidase e concentraÃÃo de antioxidantes totais nos trÃs tempos de ambos os grupos. NÃo houve diferenÃa estatisticamente significante entre os grupos controle e estudo para as variÃveis linfÃcitos, leucÃcitos, TBARS, atividade de glutationa peroxidase. Houve diferenÃa estatisticamente significante entre os grupos controle e estudo relacionado a concentraÃÃo de antioxidantes totais. Portanto, a suplementaÃÃo nutricional oral utilizando L-alanil-glutamina, arginina e mistura de Ãleos, com elevada relaÃÃo ω9:ω6 e baixa relaÃÃo ω6:ω3, contendo os Ãcidos ω3 (ALA, EPA e DHA) possui efeito prÃ-condicionante nutracÃutico sobre os valores de antioxidantes totais no trauma cirÃrgico de pacientes submetidos a abdominoplastia total.

nÃo hà / ABSTRACT Endocrine-metabolic disorders (EMD) are frequent and associated with severe comorbidities and mortality. Chronics leep restriction relates to EMD and potentially aggravates health problems including EMD. Vitamin D is important for organ functions and adiponectin is essential for the regulation of lipid metabolism. This study evaluates clinical characteristics of patients with EMD and risk factors in connection with vitamin D and adiponectin levels. The objectives were to investigate the profile of EMD patients regarding vitamin D status and risk factors associated with vitamin D abnormalities and to examine clinical characteristics of EMD patients with insufficient sleep, and risk factors associated with adiponectin levels. This is a cross-sectional investigation of patients with EMD from the Centro Integrado de HipertensÃo e Diabetes, consecutively recruited in the period of 2010-2011. Vitamin D and adiponectin levels were determined. Insufficient sleep, characterized as habitual <6h of sleep, was identified. Physical exercise status was investigated. Two-hundred-fifty patients aged 29-82 years (58.2Â11.3), 58.4% female were studied. Arterial hypertension (AH, 76.4%), type 2 diabetes (T2D, 79.2%) and glucose intolerance (13.2%) were present. Overweight (42.8%) and obesity (43.6%) were common. Among AH patients, 59.7% were women and mostly in menopause (87.7%). Most patients with AH also had T2D (79.6). Individuals with Vitamin D insufficiency/deficiency had higher diastolic pressure. Patients with Vitamin D insufficiency/deficiency showed a commensurate increase of gamma glutamyl transpherase (GGT, p=0.005). Multiple logistic regression analysis showed that menopause, T2D, arterial hypertension and reduced exercise were independently associated with lower levels of vitamin D. In another study, 332 patients (18 to 80 y) with EMD underwent clinical evaluation, and adiponetin levels were determined. Older age and increased adiponectin levels were associated with reduced hours of sleep. The association between insufficient sleep and adiponectin levels was maintained after adjusting for gender, age, menopause, BMI, arterial hypertension, ADA classification and physical exercise level (p=0.001). In conclusion, patients with arterial hypertension, T2D, menopause and sedentary life style are at high risk of vitamin D insufficiency/deficiency. Individuals with EMD that have Vitamin D insufficiency/deficiency present higher levels of GGT and potentially more liver toxicity. Insufficient sleep is common in patients with EMD. High adiponectin levels are independently associated with insufficient sleep. A compensatory mechanism may explain the latter findings. / Os distÃrbios endÃcrino-metabÃlicos (DEM) sÃo frequentes e associam-se a comorbidades graves e aumento da mortalidade. O sono insuficiente, potencialmente, tem efeito negativo sobre a saÃde incluindo os trantornos endÃcrino-metabÃlicos. A vitamina D à importante para o funcionamento geral do organismo e a adiponectina à um hormÃnio essencial para a regulaÃÃo do metabolismo lipÃdico. Este à um estudo transversal que tem por objetivo investigar o perfil dos pacientes com DEM, o status da vitamina D e da adiponectina, a presenÃa da restriÃÃo crÃnica do sono e os fatores de riscos associados. Foram estudados pacientes do Centro Integrado de Diabetes e HipertensÃo, recrutados consecutivamente no perÃodo de 2010-2011. Os nÃveis de vitamina D e de adiponectina foram determinados. A restriÃÃo crÃnica do sono ou sono insuficiente foi caracterizada como sono habitual <6h de sono >4 vezes/semana. A presenÃa de exercÃcio fÃsico regular ou vida sedentÃria foi investigada. Foram estudados duzentos e cinquenta pacientes com idade entre 29-82 anos (58,2  11,3) sendo 58,4% do sexo feminino. HipertensÃo arterial (HA, 76,4%), diabetes 2 (DM2, 79,2%) e intolerÃncia à glicose (13,2%) estavam presentes. Excesso de peso (42,8%) e obesidade (43,6%) eram frequentes. Entre os pacientes com HA, 59,7% eram mulheres e com comumente na menopausa (87,7%). A maioria dos pacientes com HA tambÃm tinha diabetes tipo 2 (79,6). Os indivÃduos com insuficiÃncia/deficiÃncia de vitamina D apresentavam nÃveis mais elevados de pressÃo diastÃlica. Aqueles com insuficiÃncia/deficiÃncia de vitamina D apresentavam um aumento da gama-glutamil-transpherase (GGT, p 0,005). A anÃlise de regressÃo mÃltipla mostrou que a menopausa, diabetes tipo 2, HA e exercÃcio fÃsico associaram-se de forma independente com nÃveis mais baixos de vitamina D. Em uma segunda fase, restriÃÃo crÃnica do sono e os nÃveis de adiponetina foram avaliados em 332 pacientes (18 a 80 anos). NÃveis mais elevados de adiponectina associaram-se com a idade mais avanÃada (p=0.02) e com a restriÃÃo crÃnica do sono (0,005). A associaÃÃo entre os nÃveis de adiponectina e sono insuficiente foi mantida apÃs o ajuste para sexo, idade, menopausa, IMC, hipertensÃo arterial, classificaÃÃo ADA e nÃvel de exercÃcio fÃsico (p = 0,001). Em conclusÃo, os pacientes com hipertensÃo arterial, diabetes tipo 2, menopausa e estilo de vida sedentÃrio estÃo em alto risco insuficiÃncia/deficiÃncia de vitamina D. IndivÃduos com DEM que tÃm insuficiÃncia/deficiÃncia de vitamina D apresentam nÃveis mais elevados de GGT e potencialmente mais toxicidade hepÃtica. RestriÃÃo crÃnica do sono à comum em pacientes com DEM. Idade mais avanÃada e a restriÃÃo crÃnica do sono associam-se de forma independente com nÃveis de adiponectina mais elevados. Um mecanismo compensatÃrio pode explicar os Ãltimosachados. .

coordenadoria de aperfeiÃoamento de pessoal de ensino superior / In the present study were used mixtures of oils at nutraceutical concentrations of low &#969;6: &#969;3 ratio that favors an anti-inflammatory action and high &#969;9: &#969;6 ratio that has antioxidant activity. The aim was to assess whether oral nutritional supplement with high &#969;9: &#969;6 ratio and low &#969;6: &#969;3 ratio, &#969;3 containing acids (ALA, EPA and DHA) and arginine, has the effect as a pre-conditionant on the nutraceutical antioxidant modulation and lipid profile in surgical trauma in a population of patients undergoing radical prostatectomy. This is a randomized clinical trial, double-blind paired. Supplementation was administered in two doses of 200 ml / day during the preoperative period (5 days before surgery). The sample was divided into 3 groups. G1 - control (0% fat supplement), G2 - arginine (supplement with &#969;6: &#969;3 ratio of 8:1), G3 - arginine (supplement with &#969;9: &#969;6 ratio of 3.2:1 and &#969;6: &#969;3 ratio of 1.4: 1). Parameter analyzed were antioxidants (catalase, superoxide dismutase 1, and superoxide dismutase 2) and lipid profile. Laboratory evaluations were done in the pre-surgery 5 days before the procedure and anesthesia, and 2 Postoperative. There was no statistical difference between groups in the time parameter and antioxidants. Lipid profile (cholesterol, LDL, triglycerides, VLDL) were statistically different in time and not supplement. In parameter HDL showed no statistical difference. / No presente estudo foram utilizadas misturas de Ãleos em concentraÃÃes nutracÃuticas com razÃo de &#969;6:&#969;3 baixa que favorece uma aÃÃo antiinflamatÃria e a razÃo de &#969;9:&#969;6 alta com aÃÃo antioxidante. O objetivo do trabalho foi avaliar se o suplemento nutricional oral, com alta relaÃÃo &#969;9:&#969;6 e baixa relaÃÃo &#969;6:&#969;3, contendo os Ãcidos &#969;3 (ALA, EPA e DHA) e arginina, possui o efeito como prÃ-condicionantenutracÃutico sobre a modulaÃÃo antioxidante e no perfil lipÃdico no trauma cirÃrgico, numa populaÃÃo de pacientes submetidos a prostatectomia radical.Trata-se de um estudo clÃnico randomizado, duplo-cego e emparelhado. A suplementaÃÃo foi administrada em duas doses de 200 ml/dia, durante o perÃodo prÃ-operatÃrio (5 dias antes da cirurgia). A amostra foi distribuÃda em 3 grupos.G1 â controle (suplemento 0% de gordura), G2 â arginina e (suplemento com relaÃÃo &#969;6:&#969;3 8:1), G3 â arginina e (suplemento com &#969;9:&#969;6 3,2:1 e &#969;6:&#969;3 1,4:1). Foram analisados parÃmetros antioxidantes (catalase, superÃxido dismutase1, e superÃxido dismutase 2) e perfil lipÃdico. As avaliaÃÃes laboratoriais foram realizadas no perÃodoprÃ-cirÃrgico 5 dias antes do procedimento e na induÃÃo anestÃsica, e 2Â pÃs operatÃrio. NÃo houve diferenÃa estatÃstica entre grupos e momentos nos parÃmetros antioxidantes. No perfil lipÃdico (colesterol, LDL, triglicerÃdeos, VLDL) houve diferenÃa estatÃstica de momento e nÃo de suplemento. No parÃmetro HDL nÃo houve diferenÃa estatÃstica.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de NÃvel Superior / The malate-aspartate shuttle allows the hydrogen ions of the cofactor NADH produced in the cytosol to reach the electron transport chain in the mitochondria and generate energy. The objective of this study was to determine the effects of oral L-glutamine and the stable dipeptide, l-alanyl-glutamine, on the expression of the mitochondrial key enzymes of the malate-aspartate shuttle in rat distal small intestine on 30 minutes of ischemia followed by 30 minutes of reperfusion. In order to demonstrate the possible changes in (malate desidrogenase) MDH 1, 2 and (aspartate desidrogenase) GOT 1, 2 in the rat intestine tissues, the mRNA levels for those enzymes were analyzed by real-time PCR. Results showed that although there were fluctuations in tissue MDH and GOT values of the samples assessed with glutamine versus L-alany-glutamine supplementation versus a calcium caseinate supplementation, no significant differences were observed

A desnutriÃÃo pode afetar a arquitetura intestinal, causando atrofia da mucosa e comprometendo o turnover epitelial. Embora o intestino seja capaz de responder compensatoriamente à desnutriÃÃo, os mecanismos moleculares pelos quais o intestino responde à privaÃÃo proteica nÃo estÃo completamente esclarecidos. A quinase celular intestinal (ICK) à uma proteÃna altamente conservada do tipo serina/treonina e um novo componente das vias de sinalizaÃÃo que regulam a proliferaÃÃo celular na cripta intestinal. Para avaliar o papel da resposta intestinal compensatÃria à privaÃÃo proteica, regulada pela ICK, foi medida a ativaÃÃo de vias moleculares relacionadas à proliferaÃÃo e sobrevivÃncia celulares, como a via canÃnica Wnt/&#946;-catenina, a via da proteÃna alvo da rapamicina em mamÃferos (mTOR), vias da proteÃna-quinase ativada por mitÃgeno (MAPK) e da proteÃna quinase B (PKB/Akt), bem como a expressÃo de marcadores para cÃlulas-tronco intestinais (LgR-5 e Bmi1) por imunoblotting num modelo in vivo em camundongos fÃmeas C57BL/6J submetidas à uma dieta hipoproteica (contendo 2% de proteÃna) por cinco dias e controles nutridos recebendo dieta padrÃo. TambÃm foi realizado um estudo in vitro utilizando cÃlulas HCT-8 de adenocarcinoma ileocecal humano desafiadas com meio padrÃo com restriÃÃo de soro fetal bovino (0-1%) para avaliar a resposta da ICK na presenÃa ou nÃo de fatores trÃficos intestinais como glutamina (2mM), alanil-glutamina (10 e 50 mM) e zinco (10 e 50&#956;M), alÃm de caseÃna e albumina sÃrica bovina (BSA) na concentraÃÃo de 0,25 e 0,5% no meio, respectivamente. A anÃlise de RNAm foi feita para avaliar o transcrito de ICK por q-PCR, apÃs privaÃÃo proteica. No intuito de avaliar o efeito dessa quinase sobre a proliferaÃÃo celular e apoptose, foi realizado o silenciamento do gene da ICK com uso de RNA de interferÃncia em cÃlulas HCT-8. A viabilidade celular foi avaliada com base na exclusÃo do azul de tripan. Posteriormente, foram realizados testes de western blot para caspase 3 e 9, PARP-clivada, alÃm de anexina V por citometria de fluxo para avaliar apoptose, assim como western blot para via Wnt/&#946;-catenina e ciclina D1 no intuito de medir os mecanismos relacionados à proliferaÃÃo celular. Dessa forma, foi identificado um aumento significativo e transitÃrio nos nÃveis intestinais de ICK na desnutriÃÃo induzida pela raÃÃo hipoproteica, concomitante com a ativaÃÃo de vias moleculares relacionadas à proliferaÃÃo e sobrevivÃncia, bem como o aumento da expressÃo de marcadores para cÃlulas-tronco intestinais. Esse trabalho tambÃm documentou que a privaÃÃo proteica, induzida por baixa concentraÃÃo de soro, aumenta a expressÃo de ICK em cÃlulas HCT-8, efeito que foi revertido pela adiÃÃo de BSA no meio. O mesmo resultado, nÃo foi observado com outros compostos como glutamina, alanil-glutamina e zinco. Apesar do aumento da expressÃo da ICK apÃs privaÃÃo proteica, nÃo houve diferenÃa significativa da sua transcriÃÃo quando comparado com os controles. O silenciamento do gene de ICK reduziu significativamente a sinalizaÃÃo da via Wnt-&#946;-catenina e ciclina D1 em cÃlulas HCT-8 com aumento da apoptose por um mecanismo dependente de caspases. Os resultados sugerem que o aumento da expressÃo de ICK em resposta à privaÃÃo proteica à um mecanismo de proteÃÃo que limita a apoptose e suporta a proliferaÃÃo celular epitelial na desnutriÃÃo. / Malnutrition can affect the intestinal architecture, causing mucosal atrophy and compromising epithelial turnover. Although the gut is able to compensatorily respond to malnutrition, the molecular mechanisms by which the gut responds to protein deprivation are not completely understood. The intestinal cell kinase (ICK) is a highly conserved serine/threonine protein and a novel component of the signaling pathways that regulate cell proliferation in the intestinal crypt. In order to evaluate the role of the intestinal compensatory response to protein deprivation mediated by ICK, the activation of molecular pathways related to cell proliferation and survival were measured in C57BL/6J mice subjected to low protein diet (containing 2% protein) for five days and received standard chow-fed controls. We analyzed the intestinal canonical Wnt/&#946;-catenin pathway, mammalian target of rapamycin (mTOR), mitogen-activated protein kinase (MAPK) and protein kinase B (PKB/Akt) by immunoblotting. We also measured the expression of intestinal stem cells markers (LGR-5 and Bmi1). We also conducted an in vitro study using human ileocecal adenocarcinoma cells (HCT-8) starved with low serum (0-1%) to evaluate the ICK response with or without gut trophic factors, such as glutamine (2 mM), alanyl-glutamine (10 and 50mM), and zinc (10 and 50&#956;M), casein and bovine serum albumin (BSA) at a concentration of 0.25 or 0.5% in the medium, respectively. We also assessed ICK mRNA transcript by q-PCR after protein deprivation. In order to evaluate the effect of this kinase on cell proliferation and apoptosis, the ICK gene was silenced using interference RNA in HCT-8 cells. Cell viability was measured by trypan blue exclusion. Furthermore, caspase 3 and 9, cleaved PARP, analyzed by western blot, and annexin V, measured by flow cytometry, were used to assess apoptosis. In order to measure ICK effect on cell proliferation, we analyzed Wnt/&#946;-catenin and cyclin D1 pathways by western blot. We identified a significant and transient increase in ICK intestinal levels following low-protein induced malnutrition, concomitant with the activation of molecular pathways related to proliferation and survival, as well as increased expression of intestinal stem cell markers. This work also documented that the protein deprivation, induced by low serum concentration, increased the expression of ICK in HCT-8 cells, an effect that was reversed by BSA in the medium. This reverse effect was not seen with other compounds such as glutamine, alanyl-glutamine or zinc. Despite the increase in ICK expression after protein deprivation, no significant difference in its transcripts was found, when compared with controls. The silencing of the ICK gene significantly decreased Wnt/&#946;-catenin and cyclin D1 signaling activation in HCT-8 cells with increased apoptosis by a caspase dependent mechanism. Our results suggest that the increased ICK expression in response to protein deprivation is a protective mechanism that limits cell apoptosis and supports epithelial cell proliferation following malnutrition. Keywords: Malnutrition. Protein deprivation. Intestinal cell kinase. &#946;

Este trabalho utilizou a medida da uréia sérica para a predição do valor biológico de proteína para cães. Foram utilizados nove cães filhotes, que foram submetidos a três diferentes experimentos. No primeiro experimento o objetivo foi determinar o pico máximo de uréia plasmática após a alimentação. Os animais foram alimentados com uma dieta contendo 30% de proteína. Após a alimentação os animais foram submetidos a cinco coletas de sangue, realizadas em um espaço de 1h entre cada coleta. Este experimento determinou, de forma significativa, que o pico máximo de uréia após a alimentação é 3:01h. Portanto este foi o horário para a coleta nos experimentos subseqüentes. No segundo experimento os animais foram alimentados com dietas contendo níveis crescentes de proteína, objetivando relacionar diferentes níveis de proteína, com valores de uréia sérica. Foram utilizadas dietas contendo 19, 24, 30, 36, e 41% de proteína. Foi demonstrado, de forma significativa (P<0,001), um crescimento linear nos níveis de uréia plasmática a medida em que aumentou o teor de proteína. O terceiro experimento relacionou diferentes níveis de inclusão de aminoácidos com os seus respectivos níveis resultantes de uréia plasmática. Foram utilizadas relações met-cis/lisina de 0,58, 0,62, 0,66 e 0,70. Foi demonstrado, de forma significativa (P<0,0001), que aumentando-se à inclusão de aminoácidos, diminuíram linearmente os níveis de uréia sérica, supondo que níveis maiores de inclusão de aminoácidos possam vir a ser benéficos para cães em crescimento.

Nos últimos tempos, cresceu consideravelmente o número de pesquisadores que se dedicam a estudar e desvendar lacunas ainda não esclarecidas no que se refere à interação entre a nutrição e a imunologia. Um dos grandes motivos para essa demanda é a crescente restrição do uso de antimicrobianos promotores de crescimento ao mesmo tempo em que a intensificação dos sistemas de produção torna-se imperativa para aumentar a produção de alimentos no mundo. O ácido linoléico conjugado (CLA) se refere aos isômeros posicionais e geométricos do ácido linoléico (cis-9, cis-12 18:2) com a diferença que no primeiro, as duplas ligações estão separadas apenas por uma ligação simples entre 2 carbonos. Os isômeros que recebem maior atenção são o cis-9, trans-11 e o trans-10, cis-12 CLA. Estudos têm demonstrado que estes isômeros possuem atividade nutracêutica uma vez que são capazes de melhorar os parâmetros imunológicos de diferentes espécies animais, em diversos modelos experimentais. Objetivou-se com o presente trabalho avaliar o efeito do CLA na resposta imune e no desempenho de leitões recém-desmamados. Para isso, foram testados 3 níveis de inclusão de CLA (0, 1 e 2%) na presença ou ausência de desafio imunológico com LPS. O nível de 1% de CLA promoveu uma maior produção de imunoglobulinas G pelos leitões, mostrando sua influência na resposta imune humoral. Entretanto, o CLA não afetou nem o desempenho e nem os outros parâmetros imunológicos testados (proliferação de linfócitos, porcentagem de linfócitos T CD4+ e CD8+, proteínas plasmáticas, eritrograma, leucograma, frequência respiratória e temperatura retal após o desafio com LPS). O LPS causou estresse imunológico nos leitões desafiados, evidenciada pelo pior desempenho zootécnico, aumento da temperatura retal e frequência respiratória além de ser responsável por alterações nos valores de proteínas plasmáticas, eritrograma e leucograma. Apesar de o CLA ter se mostrado um potente estimulador do sistema imune humoral, não foi eficiente na reversão ou amenização do quadro de depressão instaurado pelo desafio imunológico com LPS. / In recent years, the number of researchers dedicated to study and reveal gaps that remain unclear with regard to the interaction between nutrition and immunology, increased considerably. One of the major reasons for this demand is the increasing antibiotic growth promoters restriction while the intensification of animal production systems becomes imperative to increase food production in the world. The conjugated linoleic acid (CLA) refers to the positional and geometric linoleic acid (cis-9, cis-12 18:2) isomers with the difference that in the first, the double bonds are separated only by a single bond between two carbons. The isomers that receive most attention are the cis-9, trans-11 and trans-10, cis-12 CLA. Trials have shown that these isomers have nutraceutical activity once they are able to improve the immunological parameters of different animal species in various experimental models. The objective of this trial was to evaluate the effect of CLA on immune response and performance of weanling piglets. For that, it were tested three CLA inclusion levels (0, 1 and 2%) in the presence or absence of LPS immunological challenge. The 1% CLA level caused a greater production of immunoglobulin G by piglets, showing its influence on humoral immune response. However, CLA did not affect neither the performance nor the other tested immune parameters (lymphocyte proliferation, the percentage of CD4+ and CD8+ cells, plasma proteins, red and white blood cells count, respiratory rate and rectal temperature after LPS challenge). LPS caused immune depression in challenged piglets, as evidenced by the worst performance, increased rectal temperature and respiratory rate besides being responsible for changes in serum proteins and red and white blood cells count. Although the CLA has proven to be a powerful humoral immune system stimulator, it was not effective in reversing or softening the depression established by the LPS immunological challenge.

Atualmente se busca formular dietas que além de desempenhar o papel nutritivo, promova benefícios à saúde dos animais de companhia. O estudo da fibra na dieta para animais carnívoros é recente e a literatura escassa. Para investigar os efeitos da fibra dietética na dieta de gatos, foi realizado um experimento no qual foram avaliadas a digestibilidade aparente dos nutrientes; as respostas pós-prandiais de glicose, colesterol e triglicerídeos; os efeitos sobre as características fecais e alguns parâmetros de saúde intestinal, como concentração de ácidos graxos de cadeia curta nas fezes e histologia da mucosa do cólon. Foram formuladas uma dieta controle e três dietas contendo diferentes fontes de fibra: polpa de beterraba, farelo de trigo e fibra de cana-de-açúcar. As dietas com adição de fibras foram formuladas para conter níveis semelhantes de FDT. O estudo seguiu um delineamento em blocos casualizados, sendo os blocos representados pelos dois períodos experimentais, cada um constituído por 3 gatos e 4 dietas, totalizando 24 gatos. Os coeficientes de digestibilidade aparente da MS, MO e EB foram menores nas dietas com fibra (P < 0,05). A polpa de beterraba e o farelo de trigo não afetaram a digestibilidade da PB, sendo que a polpa de beterraba também não diminuiu a digestibilidade do EE. A dieta com fibra de cana-de-açúcar provocou redução significativa nos coeficientes de digestibilidade da MS, MO, PB, EE e EB (P < 0,05). A concentração média e a área abaixo da curva da glicose foram estatisticamente menores no grupo da fibra de cana-de-açúcar (P < 0,05) em relação às demais dietas. A dieta com polpa de beterraba foi a que produziu maiores concentrações de acetato (P = 0,0117) propionato (P = 0,0005), lactato (P = 0,0051) e ácidos graxos totais (P = 0,0008). A análise morfométrica da mucosa do cólon nos quatro grupos não foi diferente estatisticamente. A digestibilidade dos nutrientes foi menos prejudicada com a inclusão da polpa de beterraba e mais prejudicada com a adição da fibra de cana-de-açúcar. Por outro lado, a dieta com fibra de cana-de-açúcar demonstrou características promissoras no controle da glicemia. A polpa de beterraba causou efeitos desejáveis no cólon, através da produção de ácidos graxos de cadeia curta, embora não tenha alterado as características histológicas da mucosa colônica dos gatos em curto prazo. / Currently, one seeks to formulate diets which perform the nutritive role and also promote health benefits to companion animals. The study on fiber in carnivorous animals’ diets is recent and the literature is scarce. In the purpose to investigate the effects of dietary fiber on cats’ diets, it has been realized an experiment which assessed the apparent nutrient digestibility; the glucose, cholesterol, and triglycerides postprandial responses; the effects on fecal features, and also some intestinal health parameters such as short-chain fatty acids concentration in faeces and colonic mucosa histology. It was formulated a control diet and three diets containing different fiber sources, beet pulp, wheat bran and sugar cane fiber. The addition of fiber were formulated to contain similar level of TDF. The study followed a randomized block design, with the blocks represented by the two experimental periods, each consisting of three cats and four diets, totaling 24 cats. The apparent digestibility coefficients of DM, OM, and GE were lower in diets which contained fiber (P < 0.05). The beet pulp and wheat bran did not affect the digestibility of CP, and beet pulp did not decrease the EE. The diet with sugar cane fiber caused significant reduction in digestibility of DM, OM, CP and EB (P < 0.05). The average concentration of glucose and the area under the glucose curve were statistically lower in the group of sugar cane fiber (P < 0.05). The diet with beet pulp was the one which produced the biggest acetate (P = 0.0117), propionate (P = 0.0005), and lactate concentrations (P = 0.0051), even as total fatty acids (P = 0.0008). Morphometric analysis of colonic mucosa in the four groups was not statistically different. Nutrient digestibility was less impaired by the inclusion of beet pulp and most affected by the addition of sugar cane fiber. On the other hand, the diet with sugar cane fiber has shown promising features to control blood glucose. The beet pulp caused effects in the colon, through the production of short chain fatty acids, altough did not alter the histological features of colonic mucosa of cats in the short term.