FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / A terapia fotodinâmica antimicrobiana (TFDA) surge como um tratamento alternativo ao uso de antimicrobianos tradicionais diante da emergência de cepas resistentes a estes agentes. Este estudo está dividido em três capítulos, cujos objetivos foram: Capítulo 1) Comparar o efeito antimicrobiano da TFDA realizada com o fotossensibilizador azul de orto-toluidina (TBO) e duas diferentes fontes de luz vermelha {Laserbeam (LB) ou LumaCare (LC)} em biofilmes maduros de Streptococcus mutans; Capítulo 2) Quantificar as espécies reativas de oxigênio (ERO) encontradas a nível intracelular em biofilmes de S. mutans como resultado da TFDA realizada com TBO e a fonte de luz vermelha LC; e Capítulo 3) Avaliar os efeitos da TFDA realizada com TBO e a fonte de luz vermelha LC na viabilidade microbiana, na matriz de polissacarídeos extracelulares (PEC) e na topografia de biofilmes de S. mutans maduros e em formação. Biofilmes foram crescidos em discos de hidroxiapatita imersos em caldo de peptona caseína soja e extrato de levedura com 1% de sacarose por cinco dias. No capítulo 1, biofilmes maduros foram submetidos à TFDA utilizando o fotossensibilizador TBO (100 g/mL) e duas fontes de luz diferentes: LB (56,6 J/cm2) e LC (56,6 J/cm2; 158,5 J/cm2; 317,0 J/cm2; 475,6 J/cm2). No capítulo 2, os biofilmes foram expostos a terapia usando o LC nas densidades de energia 211.37 J/cm2 e 422.74 J/cm, e a produção de ERO como consequência da terapia foi determinada utilizando o marcador dihidrorodamina 123. No capítulo 3, as mesmas densidades de energia do capítulo 2 (211.37 J/cm2 e 422.74 J/cm2) foram testadas em biofilmes maduros e em formação. Verificamos que não existe diferença na redução da viabilidade bacteriana quando LB e LC são utilizados na mesma dose de energia, porém LC é superior nas exposições 317,0 J/cm2 e 475,6 J/cm2 (capítulo 1). A TFDA gerou 3x mais ERO que o grupo controle negativo. A TFDA nas densidades de energia 211.37 J/cm2 e 422.74 J/cm2 obteve reduções da viabilidade bacteriana de 2 a 5 logs, respectivamente, em biofilmes maduros, e de 6 a 6,5 logs em biofilmes em formação. A TFDA aplicada sobre biofilmes em formação, além de promover redução da viabilidade bacteriana, também reduziu a formação de PEC e o número de conglomerados bacterianos, além de promover a perda de estruturas de conexão dos PEC. (capítulo 3). Conclui-se que TFDA, nos parâmetros utilizados, apresenta-se como uma promissora abordagem terapêutica na inibição da formação de biofilmes de S. mutans e na inativação de biofilmes já estabelecidos.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de NÃvel Superior / Entendendo a importÃncia do papel dos receptores NMDA e do magnÃsio como modulador desse receptor no processo nociceptivo, nos propomos a estudar a importÃncia do efeito desse receptor nas dores orofaciais originadas pela inflamaÃÃo da ATM, mediada pela via trigeminal, analisando tambÃm o papel do magnÃsio o qual à um modulador da ativaÃÃo desse receptor. Foi avaliado o parÃmetro comportamental de nocicepÃÃo, pelo teste de hipernocicepÃÃo mecÃnica por von Frey eletrÃnico, sendo medido o limiar nociceptivo antes da injeÃÃo de carragenina e apÃs (4,6,10, 24 â 168h). O antagonista dos receptores NMDA, MK-801 (0,1 ; 0,5 e 0,25mg/kg) foi utilizado para determinar o grau de influencia do receptor NMDA, sendo administrado por via intra-peritoneal (i.p.) 30 min antes da injeÃÃo de carrageninna (Cg). Para determinar o papel do magnÃsio foi realizado um prÃ-tratamento atravÃs de uma suplementaÃÃo com cloreto de magnÃsio (MgCl2, 90 mg/kg, divido em 2 tomadas por via oral), durante 3, 5 e 7 dias. TambÃm provocamos uma deficiÃncia de magnÃsio atravÃs da administraÃÃo de uma dieta especial livre de magnÃsio e Ãgua mili-Q administrados ad-libidum por 9 dias. O limiar nociceptivo foi medido antes e depois de todos os tratamentos. Resultados: o prÃ-tratamento com o MK-801 (0,1 â 0,5mg/kg) inibiu a hipernocicepÃÃo, aumentando o limiar nociceptivo em 83% no pico de hipernocicepÃÃo (6 hora) (p<0.01), tendo seu efeito se prolongado atà 120 horas apÃs uma Ãnica administraÃÃo (16%; p<0.05). Com relaÃÃo ao tratamento com suplementaÃÃo com MgCl2, observou-se que houve um aumento significativo no limiar nociceptivo em 24% no pico de hipernocicepÃÃo (6 hora) dos animais que receberam MgCl2 durante 3 dias antes da injeÃÃo de carragenina, (p<0.001), um aumento em 56% no grupo com prÃ-tratamento com 5 dias (6 hora) (p<0.001) e um aumento de 65% no grupo que recebeu o Mgcl2 por 7 dias. No grupo depletado de magnÃsio tivemos um aumento na resposta nociceptiva quando comparado com o limiar inicial, havendo uma diminuiÃÃo de 18% (p<0,001) nesse limiar. Os animais deficientes de magnÃsio e injetados com carragenina apresentaram uma diminuiÃÃo persistente no limiar de hipernocicepÃÃo. TambÃm observou-se que o nÃvel plasmÃtico do magnÃsio foi significativamente maior em todos os grupos tratados, subindo atà 154% no 7 dia, quando comparado aos valores basais, e na deficiÃncia, os nÃveis de magnÃsio apÃs 9 dias chegou a ser 27% menor, comparando com o controle. Foi avaliado tambÃm a expressÃo relativa a subunidades NR1, NR2 e NR3 do receptor NMDA, atravÃs da analise de RT-PCR, na qual verificamos um aumento na expressÃo dos subtipos NR1 e NR3 (p<0.05) e uma diminuiÃÃo da NR2B (p<0.05) nos grupos que receberam a suplementaÃÃo com MgCl2. Em relaÃÃo aos animais deficientes de magnÃsio, esses nÃo apresentaram mudanÃa na subunidade NR2B, mas observou-se um aumento na subunidade NR1 e NR3 (p<0.05). Pelos achados de imunohistoquÃmica podemos sugerir que a deficiÃncia de magnÃsio causou um aumentou na imuno-marcaÃÃo da subunidade NR1 fosforilada tanto no grupo que recebeu salina intra-articular como no grupo que recebeu carragenina intra-articular. Jà em relaÃÃo ao parÃmetro inflamatÃrio de intensidade de influxo celular, observou-se um aumento significativo no nÃmero de cÃlulas na 6 , tendo uma diferenÃa mais significativa na 12 hora (p<0,01). Observamos, com esse estudo, que o receptor NMDA possui um efeito importante na nocicepÃÃo orofacial e que o magnÃsio à capaz de modular o comportamento nociceptivo e induz rearranjos nas subunidades desse receptor na regiÃo Sp5C. Este estudo levar à um melhor compreensÃo do processamento central da via nociceptiva trigeminal e o desenvolvimento de novas abordagens no tratamento da dor orofacial de origem da ATM. / Understanding the role of NMDA receptors and magnesium as a modulator of this receptor in the nociceptive process, we propose to study the importance of the effect of this receptor in orofacial pain caused by the TMJ inflammation, mediated via trigeminal, also analyzing the role of the magnesium which is a modulator of activation of this receptor. Nociceptive behavioral parameter was evaluated , the mechanical hypernociception was analyzed by von Frey electronic , nociceptive threshold was measured before and after injection carrageenan (4,6,10, 24 - 168 hours). The NMDA receptor antagonist, MK-801 (0.1 to 0.5 mg / kg) was used to determinate the NMDA receptor influence in nociceptive process, it was administered intraperitonialy intraperitoneally (i.p.) 30 min before carrageenan Cg injection . To determinate the role of magnesium was carried out a pre-treatment by a supplementation with magnesium chloride (MgCl2, 90 mg / kg, divided into two taken orally) for 3, 5 and 7 days. We also cause a magnesium deficiency by administration of a special diet free of magnesium and milli-Q water administered ad libitum for 9 days. The nociceptive threshold was measured before and after all treatments. Results: Pretreatment with MK-801 (1, 0.5 snd 0.25mg/kg) inhibited the hypernociception, increasing the nociceptive threshold at 83% at the peak of hypernociception (6th hour) (p <0.01), and its effect lasted until 120 hours after a single administration (16%, p <0.05). With respect to treatment with supplemental MgCl2, it was observed that there was a significant increase in the nociceptive threshold about 24% at the peak of hypernociception (6th hour) in animals that received MgCl2 for 3 days before injection of carrageenan (p <0.001), an increase from 56% in animals with pre-treatment with 5 days (6th hour) (p <0.001) and an increase of 65% in the group that received MgCl2 for 7 days. In the magnesium deficient group we observed an increase in nociceptive response when compared with the initial threshold, with a decrease of 18% (p <0.001) in that threshold. Animals deficient in magnesium and injected with carrageenan showed a persistent decrease in hipernociceptive threshold that last until the end of experiment. We also observed the plasma level of magnesium, it was significantly higher in all MgCl2 treated groups, rising to 154% by day 7 compared to baseline, and in the deficient group, magnesium levels decreased itÂs levels in 27%a after 9 days of magnesium free diet compared with the control. We also evaluate the expression of NMDA subunits NR1, NR2 and NR3 by RT-PCR analysis, which we found an increased expression of NR1 and NR3 subtypes (p <0.05) and a decrease in NR2B (p <0.05) in the groups receiving supplementation with MgCl2. For animals magnesium deficient, we observed no change in the NR2B subunit, but there was an increase in NR1 and NR3 subunit (p <0.05). By immunohistochemistry findings we suggest that magnesium deficiency caused an increase in immuno-labelilng of NR1 phosphorilated in both group, treated with intra-articular saline and the group injected with intra-articular carrageenan. In relation to inflammatory parameter the intensity of cell influx showed significant increase in the numbers of cells at 6 hour, having a more significant difference at 12 hour (p <0.01). We observed, with this study, that the NMDA receptor has an important role in orofacial nociception and that magnesium is able to modulate the nociceptive behavior and induces rearrangements of subunits receptor in Sp5C region. This study could lead to a better understanding of the central processing of trigeminal nociceptive pathway and development of new approaches in the treatment of orofacial pain of TMJ origin.

CoordenaÃÃo de AperfeÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / P16 is a tumor suppressor gene widely studied in lesions associated with human papillomavirus (HPV) since its overexpression is caused by viral protein E7. Furthermore, this molecule can interact with cyclin D1, an important regulator of cell cycle used a marker of tumor aggressiveness. The expression of the human Ki-67 protein is strictly associated with cell proliferation and consequently the degree of malignancy and prognosis of tumors. This study aimed to evaluate the immunohistochemical expression of p16, cyclin D1 and Ki67 in benign oral lesions showing Koilocytosis and squamous cell carcinoma (CEC) with or without microscopic evidence of viral infection. This is a retrospective study, quantitative and cross carried by lifting paraffin blocks performed in Oral Pathology Laboratory of the course of the Federal University of Cearà Dentistry, from 2008 to 2013. We selected 89 samples grouped in 25 fibroepithelial hyperplasia with Koilocytosis (HFE / Col); 16 oral squamous papillomas (PO); 28 oral squamous cell carcinomas (CEC), subdivided among patients younger than 50 years (CEC-50) and above 50 years (CEC + 50). Were used in 20 cases of fibroepithelial hyperplasia (HFE) as a negative control. In histological review of all groups, except for CEC + 50, cytological changes were found consistent with Koilocytosis (p <0.001). Females were the most prevalent in the whole sample is not, however, statistically significant (p = 0.830). The most affected age groups, in all groups, were the fourth and fifth decades of life, however, without statistical significance (p = 0701). The most common anatomical location in the HFE / Col was the alveolar ridge followed by buccal mucosa in the mouth floor PO and alveolar ridge, the CEC under age 50 the tongue and palate and in cases of CEC over 50 years the tongue, this last significantly (p = 0.015). All benign oral lesions and the group of CEC-50 showed high immunostaining for p16 and cyclin D1, which was statistically significant compared to the negative control (HFE) (p <0.001). The quantitative expression of Ki67 was significantly higher in CEC-50 in the control group (HFE) (p <0.001). We conclude that oral lesions with Koilocytosis (papilloma, HFE / Col and CEC-50) are positive for p16 and cyclin D1 suggests a possible association of pathogenesis with human papillomavirus. / O p16 à um gene supressor de tumor amplamente estudado nas lesÃes associadas ao PapilomavÃrus Humano (HPV) visto que sua superexpressÃo à causada pela proteÃna viral E7. AlÃm disso, esta molÃcula pode interagir com ciclina D1, importante regulador do ciclo celular, utilizado como marcador de agressividade tumoral. A expressÃo da proteÃna humana Ki67 està estritamente relacionada com a proliferaÃÃo celular e consequentemente com o grau de malignidade e prognÃstico das neoplasias. O presente estudo objetivou avaliar a expressÃo imunoistoquÃmica de p16, ciclina D1 e Ki67 em lesÃes orais benignas exibindo coilocitose e no carcinoma de cÃlulas escamosas (CEC) com ou sem evidÃncia microscÃpica de infecÃÃo viral. Trata-se de um estudo retrospectivo, quantitativo e transversal realizado por meio do levantamento de blocos parafinados realizado no LaboratÃrio de Patologia Bucal do curso de Odontologia da Universidade Federal do CearÃ, no perÃodo de 2008 a 2013. Foram selecionadas 89 amostras agrupadas em: 25 hiperplasias fibroepiteliais com coilocitose (HFE/Col); 16 papilomas escamosos orais (PO); 28 carcinomas de cÃlulas escamosas orais (CEC), subdividido entre pacientes abaixo de 50 anos (CEC-50) e acima de 50 anos (CEC+50). Utilizaram-se 20 casos de hiperplasias fibroepiteliais (HFE) como controle negativo. Na revisÃo histolÃgica de todos os grupos, exceto no CEC+50, foram encontradas alteraÃÃes citolÃgicas consistentes com coilocitose (p<0.001). O sexo feminino foi o mais prevalente em toda a amostra nÃo sendo, contudo, estatisticamente significante (p=0.830). As faixas etÃrias mais afetadas, em todos os grupos, foram a quarta e a quinta dÃcadas de vida, no entanto, sem significÃncia estatÃstica (p=0.701). A localizaÃÃo anatÃmica mais frequente no HFE/Col foi o rebordo alveolar seguida da mucosa jugal, no PO o assoalho bucal e rebordo alveolar, no CEC abaixo de 50 anos a lÃngua e palato e nos casos de CEC acima de 50 anos a lÃngua, este Ãltimo de forma significante (p=0.015). Todas as lesÃes orais benignas e o grupo de CEC-50 apresentaram elevada imunomarcaÃÃo para p16 e ciclina D1, sendo estatisticamente significante em relaÃÃo ao controle negativo (HFE) (p<0.001). A expressÃo quantitativa por Ki67 foi significantemente maior no CEC-50 em relaÃÃo ao grupo controle (HFE) (p<0.001). Conclui-se que as lesÃes orais com coilocitose (papiloma, HFE/Col e CEC-50) apresentam positividade para p16 e ciclina D1 sugerindo possÃvel associaÃÃo da patogÃnese com o papilomavÃrus humano.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / Alguns mediadores inflamatÃrios como a interleucina-10 (IL-10), a molÃcula do Ãxido nÃtrico (NO) e o hormÃnio estrÃgeno parecem participar do processo inflamatÃrio da doenÃa periodontal (DP). Este trabalho teve por objetivo: 1) revisar a relaÃÃo coma DP da IL-10, NO e estrÃgeno, assim como polimorfismos presentes nesses genes, respectivamente: IL10, isoformas das Ãxido nÃtrico sintases (NOS) e receptores de estrÃgeno (ESR) (capÃtulo 1); 2) investigar a associaÃÃo dos genes IL10, NOS2A e ESR2 na periodontite crÃnica (PC) e agressiva (PAg) (capÃtulo 2); 3) avaliar o tratamento periodontal prÃvio (TPP) e hÃbitos de higiene oral em portadores de periodontite agressiva generalizada (PAgG) (capÃtulo3). No estudo 1, foi realizada uma revisÃo de literatura incluindo estudos clÃnicos em humanos, com publicaÃÃes na lÃngua inglesa, que investigaram o papel da IL-10, do NO e estrÃgeno e polimorfismos genÃticos relacionados a esses mediadores na DP. No estudo 2, foram investigados os SNPs (Single Nucleotide Polymorphism ou polimorfismos de base Ãnica) -1087G>A (rs1800896), -819C>T (rs1800871) e -592C>A (rs1800872) no promotor do gene IL10, +2087G>A (rs2297518) no gene NOS2A e +1730G>A (rs4986938) no gene ESR2 em 50 pacientes com PAg, 61 pacientes com PC e 61 pacientes-controle. No estudo 3, foram avaliados 55 pacientes com PAgG mediante exame clÃnico periodontal, hÃbitos de higiene oral e tratamento periodontal prÃvio (TPP). Os resultados mostraram no estudo 1, que nÃveis elevados de IL-10 e NO estÃo correlacionados com a PC. Foram encontradas associaÃÃes dos SNPs -592 e -819 do gene IL10 com a periodontite crÃnica e do haplÃtipo ATA com a periodontite crÃnica e agressiva. Existem evidÃncias positivas do uso da terapia de reposiÃÃo com estrÃgeno sobre os tecidos periodontais em mulheres na pÃs-menopausa. No estudo 2, o genÃtipo +2087GG no gene NOS2A mostrou tendÃncia a uma associaÃÃo significante com a DP (p= 0,05; OR= 0,44; 95% IC= 0,20-0,95). NÃo foram encontradas associaÃÃes com DP na anÃlise de genÃtipos dos genes IL10 e ESR2 ou haplÃtipos do gene IL10. No estudo 3 os pacientes que nÃo utilizavam o fio dental apresentavam uma chance reduzida em 84% de terem realizado TPP (p= 0,005; OR= 0,16; 95% IC= 0,04-0,59). Conclui-se que concentraÃÃes elevadas de IL-10 e NO podem ser encontradas nos tecidos periodontais inflamados e existem associaÃÃes dos polimorfismos genÃticos no promotor do gene Interleucina-10 com a periodontite crÃnica e agressiva. IndivÃduos que carregam o genÃtipo GG no SNP +2087 do gene NOS2A tendem a serem mais protegidos contra o desenvolvimento de DP. Nos pacientes com PAgG houve uma relaÃÃo significativa entre o uso de fio dental e a presenÃa de TPP. / Some inflammatory mediators such as interleukin-10 (IL-10), the molecule of nitric oxide (NO) and the hormone estrogen can participate in the inflammatory periodontal disease (PD). This study aimed to: 1) review the relationship of IL 10, NO and estrogen as well as genetic polymorphisms linked to genes encoding IL 10, isoforms of NOS and estrogen receptors with the DP (Chapter 1); 2) to investigate the association of IL-10, NOS2A and ESR2 genes in chronic periodontitis (CP) and aggressive (AP) (Chapter 2); 3) assess the relationship between prior periodontal treatment (PPT) e oral hygiene habits in patients with generalized aggressive periodontitis (GAP) (chapter 3). In study 1 was carried out a literature review and included clinical studies in humans, with publications in the English language that investigated the role of IL 10, NO and estrogen and related genetic polymorphisms in PD. In study 2 were investigated SNPs (single nucleotide polymorphisms) -1087G> A (rs1800896), -819C> T (rs1800871) and -592C> A (rs1800872) in the IL10 gene, + 2087G> A (rs2297518) in NOS2A gene and + 1730G> A (rs4986938) in ESR2 gene in 50 AP patients, 61 CP patients and 61 control patients. In study 3, 55 patients with generalized aggressive periodontitis (GAP) were analyzed through clinical periodontal examination and collection of data of oral hygiene and prior periodontal treatment (PPT). Study 1 showed that levels of IL 10 and NO are correlated with the PC. Associations were found for SNPs -592 and -819 of the IL 10 gene with chronic periodontitis and haplotype ATA with chronic and aggressive periodontitis. There is positive evidence of the use of replacement therapy with estrogen on the periodontal tissues in postmenopausal women. In study 2 patients with genotype + 2087GG in NOS2A gene showed a trend toward a significant association with PD (p = 0.05; OR = 0.44; 95% CI = 0.20 to 0.95). There were no significant associations with PD in the genotype analysis of IL 10 and ESR2 genes or haplotypes of IL 10 gene. In study 3 patients who did not use dental floss had a reduced chance in 84% of undergoing TPP (p = 0.005; OR = 0.16; 95% CI = 0.04 to 0.59). It is concluded that high concentrations of IL-10 and NO can be found in inflamed periodontal tissues. Subjects with the GG genotype in the SPN +2087 NOS2A gene were protected against the development of PD. There was a significant relationship between the use of dental floss and the presence of previous periodontal treatment.

nÃo hà / Introduction: The increasing prevalence of chronic degenerative diseases, especially various types of malignant lesions, shows a major change in the morbidity and mortality of the world population profile. According to the World Health Organization (WHO), there were 14,1 million incident cases and 8,2 million cancer deaths in 2012. Oral cancer is a serious and growing problem in many parts of the world. Brazilian male population is considered the third highest risk for oral cancer in the world, after countries like France and India. The treatment of oral cancer is undoubtedly related to a decrease in quality of life (QOL), which can generate significant functional, aesthetic and emotional changes. The measurement of QOL allows monitoring, as well as understanding of the real impact of the disease and its treatment on patients lives. Objective: To measure the QOL of patients treated with primary surgery for oral cancer, through an analysis of preoperative and postoperative. Methods: A prospective cross-sectional study in which 54 patients treated with primary surgery for oral cancer from August 2012 to October 2013 were included. Patients were treated at the Hospital Haroldo JuaÃaba - Cancer Institute of Cearà (HHJ-ICC) in Fortaleza, CearÃ, Brazil. For analysis of QOL, the questionnaire of the University of Washington (UW-QOL) for head and neck cancer (CCP) at pre and post-operative was used. The clinicopathological profile and lifestyle were also collected. Categorical data were analyzed by means of confidence intervals and Fisher exact or Chi-square test. The variation in scores QOL the preoperative to the postoperative period was assessed using the Wilcoxon test (nonparametric data). Data were exported to the Statistical Packcage for Social Sciences and adopted a confidence of 95% (p<0,05) in all analyzes. Results: The prevalence was higher in males (72,2%; p=0,018) with a mean of 61,1Â13,9 years old, with the majority having completed elementary school (33,3%; p=0,001) or incomplete (33,3%; p=0,001) and natural in the state (63%; p<0,001). As for lifestyle, most of the selected patients were smokers (81,5%), alcoholic (63,0%) and worked out in the sun (77,8%). The lesions were more prevalent in language, followed by lip and oral floor and classified primarily as stage IV (40,8%) and I (34,7%). QOL analysis, comparing the first phase and immediate postoperative, showed a drop in appearance scores, activity, recreation, swallowing, chewing, talking, shoulder function, saliva, and especially the palate (p=0,001). As for the areas of pain, mood and anxiety had improved. On the importance of pain domains, mood and anxiety stood out, with statistical significance compared with the postoperative phase. In the postoperative period, the domains speech and shoulder function were also statistically significant compared to the previous time. In absolute terms had pain, anxiety and swallowing were quite cited preoperatively and chewing and swallowing postoperatively. Most patients rated their QOL related to health and general as good and very good in the postoperative period. Conclusion: The UW-QOL was an effective tool in the analysis of the sample. Although still the most widely used treatment, surgical resection in the treatment of oral malignant lesions contributed negatively to QOL, especially on the functional aspects of the stomatognathic system. Even with the worsening of individual domains, patients classified as positive their overall QOL and health-related postoperative. Clinical Relevance: Identification of the most affected areas and its importance throughout surgical treatment for subsequent performance in policies for prevention and care to these patients. The reflection and the search for new technologies in cancer treatment are necessary. / IntroduÃÃo: O aumento da prevalÃncia de doenÃas crÃnico-degenerativas, especialmente os vÃrios tipos de lesÃes malignas, mostra uma importante mudanÃa no perfil de morbidade e mortalidade da populaÃÃo mundial. De acordo com dados da OrganizaÃÃo Mundial de SaÃde (OMS), houve 14,1 milhÃes de casos incidentes e 8,2 milhÃes de mortes por cÃncer em 2012. O cÃncer de boca à um problema grave e crescente em vÃrias partes do mundo. A populaÃÃo masculina brasileira à considerada a terceira de maior risco para o cÃncer de boca no mundo, depois de paÃses como FranÃa e Ãndia. A terapÃutica do cÃncer oral Ã, sem dÃvida, relacionada a uma diminuiÃÃo na qualidade de vida (QV), podendo gerar significativas mudanÃas funcionais, estÃticas e emocionais. A mensuraÃÃo da QV permite o monitoramento, assim como a compreensÃo do real impacto da doenÃa e seu tratamento na vida dos pacientes. Objetivo: Mensurar a QV de pacientes tratados com cirurgia primÃria para cÃncer de boca, por meio de uma anÃlise prÃ-operatÃria e pÃs-operatÃria. MÃtodos: Estudo prospectivo transversal, no qual foram incluÃdos 54 pacientes tratados com cirurgia primÃria para cÃncer de boca no perÃodo de agosto de 2012 a outubro de 2013. Os pacientes foram atendidos no Hospital Haroldo JuaÃaba â Instituto do CÃncer do Cearà (HHJ-ICC) em Fortaleza, CearÃ, Brasil. Para anÃlise da QV, foi utilizado o questionÃrio da Universidade de Washington (UW-QOL) para cÃncer de cabeÃa e pescoÃo (CCP) no momento prà e pÃs-operatÃrio. O perfil clinicopatolÃgico e o estilo de vida tambÃm foram coletados. Os dados categÃricos foram analisados por meio de seus intervalos de confianÃa e teste Exato de Fisher ou Qui-quadrado. A variaÃÃo dos escores de QV do prÃ-operatÃrio ao pÃs-operatÃrio foi avaliada por meio do teste de Wilcoxon (dados nÃo-paramÃtricos). Os dados foram exportados para o Statistical Packcage for the Social Sciences e adotou-se uma confianÃa de 95% (p<0,05) para todas as anÃlises. Resultados: A prevalÃncia foi maior no sexo masculino (72,2%; p=0,018) com uma mÃdia de 61,1Â13,9 anos de idade, sendo a maioria com ensino fundamental completo (33,3%; p=0,001) ou incompleto (33,3%; p=0,001) e naturais do interior do estado (63%; p<0,001). Quanto ao estilo de vida, a maioria dos pacientes selecionados eram fumantes (81,5%), etilistas (63,0%) e trabalhavam expostos ao sol (77,8%). As lesÃes foram mais prevalentes em lÃngua, seguida por lÃbio e assoalho bucal e classificadas, principalmente, como estÃgio IV (40,8%) e I (34,7%). A anÃlise da QV, comparando a fase prÃvia e pÃs-operatÃria imediata, mostrou uma queda dos escores de aparÃncia, atividade, recreaÃÃo, deglutiÃÃo, mastigaÃÃo, fala, funÃÃo do ombro, saliva e, principalmente, o paladar (p=0,001). Jà os domÃnios da dor, humor e ansiedade tiveram uma melhora significativa. Quanto à importÃncia dos domÃnios dor, humor e ansiedade se destacaram, com significÃncia estatÃstica comparados com a fase pÃs-operatÃria. Jà no pÃs-operatÃrio, os domÃnios fala e funÃÃo do ombro tambÃm tiveram significÃncia estatÃstica comparativamente ao momento anterior. Em valores absolutos tivemos dor, ansiedade e deglutiÃÃo foram bastante citados no prÃ-operatÃrio e mastigaÃÃo e deglutiÃÃo no pÃs-operatÃrio. A maioria dos pacientes classificaram sua QV relacionada à saÃde e geral como boa e muito boa no pÃs-operatÃrio. ConclusÃo: O UW-QOL foi uma ferramenta eficaz na anÃlise da amostra estudada. Apesar de ainda ser o tratamento mais utilizado, a ressecÃÃo cirÃrgica no tratamento de lesÃes malignas orais contribuiu negativamente para a QV, principalmente nos aspectos funcionais do sistema estomatognÃtico. Mesmo com a piora dos domÃnios individuais, os pacientes classificaram como positiva sua QV geral e relacionada à saÃde no pÃs-operatÃrio. RelevÃncia clÃnica: IdentificaÃÃo dos domÃnios mais afetados e sua importÃncia ao longo do tratamento cirÃrgico, para posterior atuaÃÃo em polÃticas de prevenÃÃo e atenÃÃo a esses pacientes. A reflexÃo e a busca de novas tecnologias no tratamento oncolÃgico se faz necessÃrio.

CoordenaÃÃo de AperfeÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O nÃmero de estudos que correlacionam proteÃnas salivares e cÃrie dentÃria tÃm aumentado consideravelmente, no entanto, nÃo hà elementos suficientes que permitam qualificÃ-las como biomarcadores especÃficos para a doenÃa. O objetivo do estudo foi realizar uma anÃlise comparativa das proteÃnas da saliva de pacientes com cÃrie precoce da infÃncia (CPI) em diferentes nÃveis de severidade, visando à identificaÃÃo de potenciais biomarcadores salivares especÃficos para diagnÃstico desta patologia. Metodologia: 1) busca eletrÃnica foi realizada na base de dados PubMed Medline aplicando os termos: "cÃrie" e "proteÃnas e peptÃdeos salivares". Cento e vinte estudos foram identificados e 10 selecionados para a revisÃo; 2) Cento e vinte e seis crianÃas (24-71 meses de idade) foram selecionadas. As crianÃas foram examinadas de acordo com o Ãndice visual ICDAS II e divididas em 3 grupos (n = 42): Grupo livre de cÃrie (CF) (ICDAS 0), Grupo cÃrie de esmalte (EC) (ICDAS 1, 2 e 3) e Grupo cÃrie dentina (DC) (ICDAS 5 e 6). As amostras foram digeridas e analisadas por espectrometria de massa de varrimento multiplexado alternativo (MSE). As anÃlises foram realizadas com TransOmics Software, Anova e Volcano plot v-plot (p<0,05). Resultados: 1) Noventa por cento de artigos mostraram uma relaÃÃo entre proteÃnas salivares e presenÃa ou ausÃncia de cÃries; 2) Trezentos e uma proteÃnas foram identificadas e quantificadas. Destas, 122 proteÃnas foram expressas com diferenÃa estatÃstica significante em pelo menos um grupo: 84 foram identificados nos 3 grupos; uma proteÃna foi expressa apenas no CF e outro no EC; 11 foram expressas apenas no CF e EC, 15 no CF e DC, 10 no EC e DC. Das 122 proteÃnas, 54 proteÃnas foram, pelo menos, 5 vezes mais expressas na comparaÃÃo entre os grupos e foram consideradas como candidatas a biomarcadores. Destas 54, 18 proteÃnas com potencial mecanismo de aÃÃo relacionado a cÃrie dentÃria foram selecionadas e analisadas. ConclusÃo: A relaÃÃo entre proteÃnas salivares e presenÃa ou ausÃncia de cÃrie à notÃria e jà està estabelecida. Neste estudo,18 proteÃnas apresentaram uma relaÃÃo com a CPI, e a SAA1, AIMP1, IL36A, IL36G e CAH1 possuem um maior potencial para serem consideradas biomarcadores da cÃrie dentÃria. No entanto, estudos longitudinais ainda precisam ser realizados, a fim de estabelecer o papel de cada uma das proteÃnas estudadas e consolidar o seu papel como um biomarcador.

CoordenaÃÃo de AperfeÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Periodontitis is an immunoinflammatory disease in that the involvement of chemical mediators culminates in destruction of alveolar bone. Long recognized regarding its pathogenesis, however, frequently some patients do not respond insatisfactorily to conventional treatments, which makes pharmacological alternatives are sought. In this context, Matricaria recutita (MTR), known as chamomile, stands out in the literature for its anti-inflammatory and a variety of constituents, especially apigenin (APG) flavonoid. Thus, the present study evaluated the involvement of cytokines in the anti-inflammatory and antiresorptive activities of MTR in alveolar bone resorption (ABR) induced by ligature in rats. For this, we used the dry extract of MTR (apigenin content 128.5Â0.99 mg/g). The ABR was induced in 90 wistar rats (199.3  3.2 g) by ligation (nylon 3.0) of 2 upper left molar, and contralateral was used as control. The rats received v.o. Tween 80 (TW) or MTR (10, 30 and 90 mg/kg) daily until 11 d, when they were killed. The hemiarcadas were processed for macroscopic (mm2) or histometric, histological and immunohistochemical analyzes for the ligand of the receptor activator of nuclear factor kappa B (RANKL), osteoprotegerin (OPG) and tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP). Blood samples were collected for measurement of bone alkaline phosphatase (BALP), while the gingival tissue was used for measuring of mieloperoxidase activity (MPO; mg/g) and of tumor necrosis factor-alpha (TNF-a) and interleukin-1&#946; (IL-1&#946;) levels (pg/mg) by ELISA. Systemically, serum bone alkaline phosphatase (BALP), AST/ALT, urea and creatinine, and white blood count were made, and we evaluated of macroscopic aspects of liver, kidneys and spleen, in addition to variation in body mass. Was set at p <0.05 (#) for Normal, (*) for TW and (&#61540;) for MTR 10 mg/kg; Ethical aspects: the Ethics Committee for Animal Use-UFC 70/13. It was found that ligation for 11 days caused intense ABR with furcation lesion pronounced, resorption of alveolar bone and cementum in the region between the first and second molars, reduction of serum BALP, intense leukocyte infiltrate in the periodontium these animals, increasing significant MPO, TNF-&#61537;, IL-1&#946; in challenged area underlying gingival tissue, and increased to RANKL and TRAP immunostaining, and reduced to OPG. Systemically, there was leukocytosis with a predominance of mononuclear cells. No major changes in organs and weight of animals were observed. MTR prevented, significantly, the ligature-induced ABR [TW=5.5Â0.2; MTR (10)=4.4Â0.1*; (30)=2.9Â0.1*&#61540;; (90)=2.8Â0*&#61540;], corroborating the reduction of furcation lesions [Normal=10.4Â0.8; TW=137.4Â23.3#; MTR (90)=81.0Â9.6*#] and the preservation of the alveolar bone and cementum [(Normal=0(0-0); TW=3(1-3)#, MTR (90)=1(1-3)#*] compared to the TW group while no bone anabolic activity was showed because MTR dit not prevent the reduction of serum BALP induced by ligature [Normal=99.4Â3.4; TW=61.3Â2.6#; MTR (10)=70.6Â3.6#; (30)=74.5Â3.7#; (90)=78.5Â2.8#); p>0.05]. However, MTR significantly prevented the leukocyte infiltration and the increase of MPO activity [Normal=3.6Â0.5; TW=9.4Â0.9#; MTR (10)=10.2Â3.3; (30)=4.5Â0.8*; (90)=4.2Â0.7*], of TNF-a [Normal=0.2Â0; TW=1.2Â0.2#; MTR (10)=0.4Â0.2*; (30)=0.2Â0.1*; (90)=0.1Â0*] and of IL-1&#946; [Normal=1.5Â0.3; TW=8.0Â1.4#; MTR (10)=8.9Â1.9#; (30)=1.8Â1.0*&#61540;; (90)=1.5Â0.9*&#61540;] levels caused by ligature, and reduced immunostaining for RANKL and TRAP, and increased for OPG, comparing to TW group. Additionally, MTR prevented the leukocytosis caused by ligation and did not alter liver, kidney, spleen conditions or the variation of body mass. In short, the MTR prevented the ABR by reducing TNF-a and IL-1&#946;, thus preventing the osteoclast activation due RANK-RANKL-OPG axis, without interfering with bone anabolism. / A periodontite à uma doenÃa imunoinflamatÃria onde a participaÃÃo de mediadores quÃmicos culmina em destruiÃÃo de osso alveolar. Muito se reconhece a respeito de sua patogÃnese, contudo, frequentemente alguns pacientes respondem de forma insatisfatÃria aos tratamentos convencionais, o que faz com que alternativas farmacolÃgicas sejam buscadas. Neste contexto, a Matricaria recutita (MTR), conhecida como camomila, destaca-se na literatura por sua propriedade anti-inflamatÃria e sua variedade de constituintes, especialmente o flavonoide apigenina. Assim, o presente estudo avaliou a participaÃÃo de citocinas nas atividades anti-inflamatÃria e antirreabsortiva da MTR na reabsorÃÃo Ãssea alveolar (POA) induzida por ligadura em ratos. Para isso, utilizou-se extrato seco de MTR (teor de apigenina de 128,5Â0,99 mg/g). A POA foi induzida em 90 ratos Wistar (199,3Â3,2 g) por ligadura (nÃilon 3.0) do 2 molar superior esquerdo, e contralateral como controle. Os ratos receberam v.o. Tween 80 (TW) ou MTR (10, 30 e 90 mg/kg) diariamente atà o 11 d, quando foram mortos. As hemiarcadas foram processadas para macroscopia (mm2) ou para anÃlises histomÃtrica, histolÃgica e imunohistoquÃmica para o ligante do receptor ativador do fator nuclear kappa-B (RANKL), a osteoprotegerina (OPG) e a fosfatase Ãcida resistente ao tartarato (TRAP). Amostras de sangue foram coletadas para dosagem de fosfatase alcalina Ãssea (FAO), enquanto que o tecido gengival foi utilizado para a dosagem da atividade de mieloperoxidase (MPO; mg/g), do fator de necrose tumoral-alfa (TNF-a) e da interleucina-1&#946; (IL-1&#946;) (pg/mg) por ELISA. Sistemicamente, foram feitas dosagens sÃricas AST/ALT, ureia e creatinina, avaliados leucograma, os aspectos macroscÃpicos de fÃgado, rins e baÃo, alÃm da variaÃÃo de massa corpÃrea. Considerou-se p<0,05 (#) para Normais, (*) para TW e (&#61540;) para MTR 10 mg/kg; Aspectos Ãticos: ComissÃo de Ãtica para Uso de Animais-UFC n 70/13. Verificou-se que a ligadura durante 11 dias causou intensa POA, com lesÃo pronunciada de furca e reabsorÃÃo de osso alveolar e cemento na regiÃo entre o primeiro e segundo molares, reduÃÃo dos nÃveis sÃricos de FAO, intenso infiltrado leucocitÃrio no periodonto destes animais, aumento significante de MPO, de TNF-a, de IL-1&#946; no tecido gengival subjacente à Ãrea desafiada, alÃm de imunomarcaÃÃo aumentada para RANKL e TRAP, e reduzida para OPG. Sistemicamente, observou-se leucocitose com predomÃnio de mononucleares. NÃo foram observadas alteraÃÃes importantes de ÃrgÃos e peso dos animais. MTR foi capaz de prevenir, de forma significante, a POA induzida por ligadura [TW=5,5Â0,2; MTR (10)=4,4Â0,1*; (30)=2,9Â0,1*&#61540;; (90)=2,8Â0*&#61540;], sendo corroborada pela reduÃÃo das lesÃes de furca [Normal=10,4Â0,8; TW=137,4Â23,3#; MTR (90)=81,0Â9,6#*] e preservaÃÃo de osso alveolar e cemento [(Normal=0(0-0); TW=3(1-3)#; MTR (90)=1(1-3)#*] em comparaÃÃo ao grupo TW, embora nÃo demonstrou atividade anabÃlica Ãssea por nÃo prevenir a reduÃÃo dos nÃveis sÃricos de FAO induzida pela ligadura [Normal=99,4Â3,4; TW=61,3Â2,6#; MTR (10)=70,6Â3,6#; (30)=74,5Â3,7#; (90)=78,5Â2,8#); p>0,05]. Entretanto, MTR preveniu significantemente o infiltrado leucocitÃrio e o aumento da atividade de MPO [Normal=3,6Â0,5; TW=9,4Â0,9#; MTR (10)=10,2Â3,3; (30)=4,5Â0,8*; (90)=4,2Â0,7*], dos nÃveis de TNF-a [Normal=0,2Â0; TW=1,2Â0,2#; MTR (10)=0,4Â0,2*; (30)=0,2Â0,1*; (90)=0,1Â0*] e de IL-1&#946; [Normal=1,5Â0,3; TW=8,0Â1,4#; MTR (10)=8,9Â1,9#; (30)=1,8Â1,0*&#61540;; (90)=1,5Â0,9*&#61540;], proporcionando imunomarcaÃÃo reduzida para RANKL e TRAP, e aumentada para OPG, em comparaÃÃo ao grupo TW. Adicionalmente, a MTR preveniu a leucocitose causada pela ligadura e nÃo alterou as condiÃÃes hepÃticas, renais, esplÃnicas e a variaÃÃo de massa corpÃrea. Em suma, a MTR preveniu a POA via reduÃÃo de TNF-a e IL-1&#946;, prevenindo, assim, a ativaÃÃo osteoclÃstica decorrente do eixo RANK-RANKL-OPG, sem interferir no anabolismo Ãsseo.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / A cÃrie precoce da infÃncia (CPI) à caracterizada pela presenÃa de uma ou mais lesÃes em superfÃcie dentÃria de crianÃas menores de 6 anos de idade, sendo considerada um problema de saÃde pÃblica. Streptococcus mutans (SM) à considerado o principal agente etiolÃgico da doenÃa e possui vÃrios atributos de virulÃncia que permitem sua sobrevivÃncia na cavidade oral e, portanto, sua seleÃÃo em situaÃÃes de estresse nesse ambiente. Neste contexto, este trabalho teve por objetivos: (a) padronizar um mÃtodo de extraÃÃo e purificaÃÃo de RNA total para viabilizar estudos de expressÃo gÃnica bacteriana de lesÃes de cÃrie dentinÃria in vivo (capÃtulo 1); (b) identificar e quantificar SM metabolicamente ativo e analisar a expressÃo dos genes de virulÃncia atpD, fabM, nox, pdhA e aguD em lesÃes dentinÃrias ativas e inativas (capÃtulo 2). Foi realizada a coleta de 29 amostras de dentina cariada ativa e de 16 amostras de lesÃes dentinÃrias inativas de crianÃas com CPI. As amostras foram submetidas à extraÃÃo e purificaÃÃo do RNA total por um mÃtodo padronizado, com base no uso de lise mecÃnica e kit de extraÃÃo comercial e, em seguida, submetidas Ãs reaÃÃes de transcriÃÃo reversa (RT) para obtenÃÃo do DNA complementar (cDNA). Com o intuito de comprovaÃÃo da especificidade dos primers para os genes de virulÃncia de SM em amostras in vivo, 06 amostras de cDNA foram amplificadas e submetidas ao sequenciamento de Sanger para cada primer. ApÃs verificaÃÃo da especificidade, reaÃÃes em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real da transcriÃÃo reversa (RT-qPCR) foram executadas para todas as amostras. Os resultados obtidos mostraram que o RNA bacteriano pÃde ser extraÃdo em adequada quantidade e qualidade pelo protocolo padronizado, viabilizando seu uso em estudos de expressÃo de genes bacterianos em dentina cariada (CapÃtulo 01). Os resultados da RT-qPCR mostraram que, apesar da baixa quantificaÃÃo em relaÃÃo aos estreptococos e bactÃrias totais, SM viÃveis foram detectados com quantificaÃÃo semelhante em lesÃes ativas e inativas (p>0.05). Apesar disso, maior expressÃo dos genes de virulÃncia pdhA e aguD foi detectada nas lesÃes inativas (p&#8804;0,05) (CapÃtulo 02). Concluiu-se que, apÃs padronizaÃÃo de uma tÃcnica eficaz de extraÃÃo de RNA, reaÃÃes de RT-qPCR foram executadas com eficiÃncia para identificaÃÃo, quantificaÃÃo e expressÃo gÃnica de SM em amostras de dentina humana cariada. SM estavam viÃveis nos dois grupos de lesÃes, porÃm sà nas lesÃes dentinÃrias inativas mostraram maior expressÃo dos genes pdhA e aguD, provavelmente para viabilizar sua atividade metabÃlica nas condiÃÃes menos favorÃveis à sua sobrevivÃncia, inerentes a este substrato. / Early childhood caries (ECC) is characterized by the presence of one or more lesions on dental surface of children under 6 years old, being considered a public health issue. Streptococcus mutans (SM) is considered the main etiologic agent of the disease and has several virulence features that allow its survival in the oral cavity and, therefore, its selection under environmental stress situations. In this context, this research had as objectives; (a) to describe a method of total RNA extraction and purification to conduct studies on bacterial gene expression from in vivo dentine caries lesions (Chapter 01); (b) to identify and quantify the metabolically active SM and analyze the expression of its virulence genes atpD, fabM, nox, pdhA and aguD on active and arrested dentin lesions (Chapter 02). Twenty-nine samples of active dentin caries and 16 samples of arrested dentin lesions were collected from children with ECC. The samples were submitted to extraction and purification of total RNA through a customized method, based on the use of a mechanical lysis and a commercial extraction kit and submitted to reverse transcriptase (RT) reaction to obtain complementary DNA (cDNA). Next, to demonstrate the primers specificity for the virulence genes on in vivo samples, 06 cDNA samples were submitted to Sangerâs sequencing for each primer. After verifying the specificity, RT-qPCR (quantitative real-time reverse transcription polymerase chain reaction) were executed for all the samples. The results showed that the bacterial RNA could be extracted in appropriate quantity and quality through the customized protocol, making its use on gene expression studies on dentin affected by caries (Chapter 01). The RT-qPCR results showed that, despite the low quantification, if compared to total streptococci and total bacteria, SM was detected as metabolically active with similar quantification on active and arrested lesions (p>0.05). Despite that, a higher expression of the virulence genes pdhA and aguD was detected on arrested lesions (p&#8804;0,05) (Chapter 02). It was concluded that after standardization of an effective RNA extraction technique, reactions of RT-qPCR were efficiently executed for SM identification, quantification, and gene expression on samples of human dentin affected by caries. This bacterium proved to be viable, however, only inactive lesions showed larger expression of the genes pdhA and aguD, probably to make its metabolic activity viable, even in unfavorable survival conditions.

nÃo hà / The aim of this in vitro study was to evaluate the performance of anacardic acid as a cavity-cleaning agent in adhesive restorations. Three cleaning agents were used: distilled water (DW), chlorhexidine digluconate solution at 2% (CHX) and anacardic acid (AA). Each cleaning agent was used in two strategies adhesive: after acid etching with phosphoric acid with etch&rinse adhesive or prior to the primer application in self-etch adhesive. Scanning electron microscopy (SEM) analysis was performed to evaluate the morphology of dentin substrate when it was exposed to phosphoric acid or anacardic acid, and when exposed to DW, CHX or AA with the two adhesive strategies. Additionally, spectrophotometry analysis was performed (FTIR) to assess the occurrence of chemical interactions between AA and CHX cleaning agents with dentine. The bond strength to dentin was evaluated by microtensile test, in a total of six experimental groups (2 adhesive strategies x 3 cleaning agents). Flat dentin surfaces were prepared in extracted human teeth. After the use of each cleaning agent and the respective adhesive procedure, teeth were incrementally restored with resin composite up to of 5 mm built-up. The specimens were stored in 37ÂC distilled water for 24 h, and were sectioned longitudinally in either direction to obtain the specimens in the form of beams with cross-section area of 1 mm2. Each specimen was tensioned until fracture to with 0.5 mm &#824; min speed in a universal testing machine. The fracture mode was observed using a stereoscope at 60x and 10% of the specimens had their surfaces covered with gold and evaluated under SEM. The bond strength values were statistically evaluated using two-way ANOVA with a 5% significance level. The morphological analysis showed that AA is not able to demineralize dentin and does not alter the substrate surface morphology. The resulting dentin morphological pattern was than that caused by phosphoric acid. FTIR analysis showed that there was a chemical interaction between the AA and dentin as well as it was found an interaction between DG and dentin. Concerning the microtensile bond strength results, there was no statistically significant difference between groups (p> 0.05). The highest percentage of failures was mixed fracture in each group. The anacardic acid did not affect the bond strength after 24 h of storage and analysis showing that it can be used as cavity-cleaning agent. / O objetivo deste estudo in vitro foi avaliar o desempenho do Ãcido anacÃrdico como agente de limpeza cavitÃria em restauraÃÃes adesivas. Foram utilizados trÃs agentes de limpeza: Ãgua destilada (AD), soluÃÃo de digluconato de clorexidina a 2% (CHX) e soluÃÃo de Ãcido anacÃrdico (AA). Cada agente de limpeza foi utilizado em duas estratÃgias adesivas: apÃs o condicionamento com Ãcido fosfÃrico, na tÃcnica adesiva de condicionamento total, e previamente à aplicaÃÃo do primer na tÃcnica adesiva autocondicionante. Realizou-se uma anÃlise atravÃs de microscopia eletrÃnica de varredura (MEV), no intuito de avaliar a morfologia do substrato quando exposto ao Ãcido fosfÃrico ou ao AA, e quando exposto aos agentes de limpeza, nas duas estratÃgias adesivas propostas. Adicionalmente, foi realizada uma anÃlise atravÃs de espectrofotometria (FTIR) para se avaliar a ocorrÃncia de interaÃÃes quÃmicas entre os agentes de limpeza CHX e AA com a dentina. A resistÃncia de uniÃo à dentina foi avaliada pelo teste de microtraÃÃo, num total de seis grupos experimentais (duas estratÃgias adesivas x trÃs agentes de limpeza). SuperfÃcies dentinÃrias planas foram preparadas em dentes humanos extraÃdos e, apÃs o uso de cada agente e o respectivo procedimento adesivo, os dentes foram restaurados com resina composta, de forma incremental atà atingir uma altura de material restaurador de 5 mm. Os espÃcimes foram armazenados em Ãgua destilada a 37ÂC por 24 h, e foram seccionados longitudinalmente em sentidos perpendiculares entre si para que se obtivessem espÃcimes em forma de palitos com Ãrea de secÃÃo transversal de 1 mmÂ. Cada espÃcime foi tracionado a uma velocidade mÃdia de 0,5 mm &#824; min em uma mÃquina de ensaios universal. O modo de fratura foi observado sob uso de lupa com 60x de aumento e 10% dos espÃcimes tiveram suas superfÃcies recobertas com ouro e avaliadas em MEV. Os valores de resistÃncia de uniÃo foram estatisticamente avaliados pelo ANOVA dois critÃrios, com nÃvel de significÃncia de 5%. Na anÃlise morfolÃgica, foi observado que o AA nÃo à capaz de desmineralizar o substrato dentinÃrio e nÃo altera sua morfologia superficial. Encontrou-se um padrÃo morfolÃgico resultante na dentina diferente daquele provocado pelo Ãcido fosfÃrico. A anÃlise por FTIR mostrou que houve interaÃÃo quÃmica entre o AA e a dentina, assim como foi encontrada interaÃÃo entre DG e o substrato dentinÃrio. Em relaÃÃo aos resultados de microtraÃÃo, nÃo houve diferenÃa estatisticamente significante entre os grupos (p>0.05). O maior percentual de falhas foi de fratura mista em cada grupo. O Ãcido anacÃrdico nÃo afetou a resistÃncia de uniÃo apÃs 24 h de armazenagem e as anÃlises indicam que ele pode ser usado como agente de limpeza cavitÃria.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / Proporcionar maior durabilidade aos procedimentos adesivos quando executados sobre a dentina à considerado um desafio. Portanto, o uso de agentes bioativos pode ser uma estratÃgia promissora para preservar a camada hÃbrida. Dessa forma, a presente tese foi constituÃda por cinco capÃtulos que objetivaram, respectivamente: 1) Avaliar o efeito de soluÃÃes de desinfecÃÃo cavitÃria bioativas na resistÃncia de uniÃo de sistema adesivo autocondicionante à dentina apÃs termociclagem; 2) Avaliar a efetividade da biomodificaÃÃo dentinÃria com epigalocatequina-3-galato (EGCG) na resistÃncia de uniÃo de sistema adesivo autocondicioante ao longo do tempo; 3) Avaliar a influÃncia da incorporaÃÃo de EGCG nas propriedades fÃsico-quÃmicas de um sistema adesivo autocondicionante; 4) Promover o desenvolvimento e a caracterizaÃÃo de partÃculas polimÃricas para liberaÃÃo controlada de epigalocatequina-3-galato, usando dois tipos de de Ãcido polilÃtico glicÃlico (PLGA); e 5) Avaliar o efeito da incorporaÃÃo de micropartÃculas de PLGA carregadas com EGCG nas propriedades fÃsico-quÃmicas de sistema adesivo convencional de 2 passos. Como abordagens metodolÃgicas foram realizados 5 estudos in vitro. No CapÃtulo 1, a superfÃcie dentinÃria de 18 dentes foram tratadas com Ãgua destilada, fluoreto de sÃdio (NaF) ou clorexidina (CHX). EspÃcimes em forma de palito foram confeccionados e submetidos ao teste de resistÃncia de uniÃo (ÂTBS), apÃs 24 horas e 60.000 ciclos tÃrmicos. No CapÃtulo 2, a superfÃcie dentinÃria de 27 dentes foram tratadas com Ãgua destilada, EGCG ou CHX. EspÃcimes em forma de palito foram confeccionados e submetidos ao teste de ÂTBS, apÃs 24 h, 6 meses e 12 meses de armazenamento. Para o CapÃtulo 3, o EGCG foi incorporado diretamente, em concentraÃÃes de 0,01% e 0,1%, a um sistema adesivo autocondicionante de 1 passo e, em seguida, foram realizados os testes de sorÃÃo (S) e solubilidade (SL), grau de conversÃo (GC) e resistÃncia flexural (RF). No CapÃtulo 4, micropartÃculas foram desenvolvidas a partir de uma tÃcnica de atomizaÃÃo por secagem e, em seguida, foram determinadas o tamanho e a morfologia das partÃculas, o rendimento, a eficÃcia de encapsulaÃÃo e carregamento de EGCG e a liberaÃÃo da catequina pelas micropartÃculas. Por fim, no CapÃtulo 5, alÃm da incorporaÃÃo direta de EGCG a 0,01% e 0,1%, foram incorporadas tambÃm micropartÃculas de dois tipo de PLGA (PLGA 50:50 E PLGA 75:25) carregadas com EGCG, na concentraÃÃo de 0,5%, 1% e 2%. Inicialmente foi realizado o ensaio de liberaÃÃo de EGCG e, em seguida, foram avaliados o GC, a RF, o mÃdulo de elasticidade (ME), a S, a SL e a ÂTBS. Os dados obtidos foram submetidos a teste de AnÃlise de VariÃncia e eventuais diferenÃas estatÃsticas foram analisadas pelo teste de Holm-Sidak. O nÃvel de significÃncia adotado foi de 5%. Os resultados mostraram que o NaF manteve a resistÃncia de uniÃo apÃs a termociclagem (p=0,336) (CapÃtulo 1). Os grupos tratados com EGCG e CHX nÃo interferiram na resistÃncia de uniÃo apÃs 24 h (p>0,05), e mantiveram a resistÃncia de uniÃo apÃs 6 e 12 meses (p<0,05) (CapÃtulo 2). NÃo houve diferenÃa estatÃstica entre os valores de WS, GC e RF quando os grupos foram comparados (p>0,05). Contudo, a incorporaÃÃo de EGCG reduziu significativamente a SL (p<0,05) (CapÃtulo 3). NÃo houve diferenÃa estatÃstica entre os grupos em relaÃÃo aos valores de GC, ME, S, SL e ÂTBS imediata. (p>0,05). Os valores de RF foram significativamente elevados pela incorporaÃÃo de micropartÃculas polimÃricas carregadas com EGCG na concentraÃÃo de 1% (p<0.05). As micropartÃculas confeccionadas com PLGA 50:50 e PLGA 75:25 apresentaram um padrÃo de liberaÃÃo pulsÃtil (CapÃtulo 4). A incorporaÃÃo de micropartÃculas polimÃricas carregadas com EGCG ao sistema adesivo obteve a maior taxa de liberaÃÃo de EGCG entre todos os grupos (p<0,05) (CapÃtulo 5). Portanto, conclui-se que as estratÃgias de biomodificaÃÃo dentinÃria alÃm de nÃo prejudicarem as propriedades fÃsicas dos sistemas adesivos estudados, podem tambÃm manter as interfaces de uniÃo mais estÃveis ao longo do tempo.