Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2008. / Submitted by Larissa Ferreira dos Angelos (ferreirangelos@gmail.com) on 2009-09-17T18:05:41Z No. of bitstreams: 1 2008_PatriciaARuiz.pdf: 2601617 bytes, checksum: 4686577ef653070fd88f7853247e0ae7 (MD5) / Approved for entry into archive by Gomes Neide(nagomes2005@gmail.com) on 2010-07-20T19:05:16Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_PatriciaARuiz.pdf: 2601617 bytes, checksum: 4686577ef653070fd88f7853247e0ae7 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-07-20T19:05:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_PatriciaARuiz.pdf: 2601617 bytes, checksum: 4686577ef653070fd88f7853247e0ae7 (MD5) Previous issue date: 2008 / A angiogênese tem sido implicada na patogênese das lesões periapicais e para que ela ocorra é necessária a atuação de potentes fatores pró-angiogênicos e a participação das MMPs na degradação da matriz extracelular. O objetivo deste estudo foi investigar a imunoexpressão da MMP-9, do VEGF e do FvW em granulomas periapicais (GP), cistos periapicais (CP) e cistos periapicais residuais (CPR) no intuito de verificar a participação da angiogênese no desenvolvimento destas lesões. A análise quantitativa do VEGF nas células do tecido conjuntivo revelou número de médio de células imunorreativas semelhante nos GP e CP (564,9 e 565,0, respectivamente) e maior que nos CPR (443,9), não havendo diferença estatisticamente significativa. Lesões com intenso infiltrado inflamatório apresentaram maior número de células imunorreativas ao VEGF em comparação com lesões que apresentavam leve infiltrado inflamatório (p<0.01). No revestimento epitelial, o VEGF revelou forte expressão tanto em CP (55%) quanto em CPR (70%), padrão observado também nos casos de epitélio atrófico (66,7%) e hiperplásico (55,6%), não havendo diferença estatisticamente significativa entre o dois tipos de cistos (p>0.05) e entre os cistos de revestimento epitelial atrófico e hiperplásico (p>0.05). O número médio de vasos imunorreativos ao FvW foi maior nos CP (250,8) que nos GP (210,4) e nos CPR (217,0), sem haver diferença estatisticamente significativa entre os grupos (p>0.05). Lesões que apresentavam intenso infiltrado inflamatório exibiram maior número de vasos imunomarcados que aquelas com leve ou moderado infiltrado inflamatório (p<0.05). Não houve correlação entre a quantidade de células imunorreativas para o VEGF e o número de vasos imunomarcados com o anticorpo anti-FvW (r=0.224; p=0,118). A MMP-9 revelou marcada tendência à forte expressão na maioria dos casos de GP (70%) e CP (70%) e fraca expressão nos casos de CPR (60%). Houve associação entre a forte expressão da MMP-9 nas células endoteliais e um intenso infiltrado inflamatório (p=0,055). Além disso, foi observado maior número de células imunopositivas para o VEGF (p<0.01) e maior número de vasos imunorreativos para o FvW (p=0,051) em lesões com forte expressão de MMP-9. Os resultados do presente estudo sugerem que o VEGF pode atuar como importante estímulo à expressão de MMP-9 em células endoteliais de vasos sangüíneos, influenciando o processo de angiogênese em granulomas periapicais, cistos periapicais e cistos periapicais residuais. Adicionalmente, a intensidade do infiltrado inflamatório desempenha importante influência no número de vasos sangüíneos, identificados através da expressão do FvW, na expressão de MMP-9 em células endoteliais e na expressão de VEGF em células do tecido conjuntivo, nas lesões do presente estudo. Por fim, a forte expressão do VEGF no revestimento epitelial dos cistos periapicais residuais sugere a existência de um potencial de crescimento nestas lesões, provavelmente em virtude da manutenção de um status de permeabilidade vascular aumentada. ______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Angiogenesis has been related to the pathogenesis of periapical lesions. So that it occurs is necessary the action of powerful angiogênic factors and the participation of MMPs in the degradation of the extracellular matrix. The purpose of this study was to investigate the immunoexpression of MMP-9, VEGF and vWF in periapical granulomas (PG), periapical cysts (PC) and residual periapical cysts (RPC) to ensure the participation of angiogenesis in the development of these injuries. The quantitative analysis of VEGF in the connective tissue cells revealed similar average number of cells expressing this factor in PG and PC (564,9 e 565,0, respectively) and higher than in RPC (443,9), without statistically significant difference. There was a positive association between the intensity of the inflammatory infiltrate and the average number of cells expressing VEGF (p<0.01). In the epithelial lining, VEGF was strongly expressed by both PC (55%) as RPC (70%), pattern observed also in cases of atrophic (66,7%) and hyperplastic epithelium (55,6%), without difference statistically significant between the two types of cysts (p>0.05) and between atrophic and hyperplastic epithelial lining cysts (p>0.05). The average number of vessels expressing vWF was higher in PC (250,8) than in PG (210,4) and the RPC (217,0), without statistically significant difference between groups (p>0.05). Injuries showing intense inflammatory infiltrate exhibited greater number of vessels immunoreactive than those with mild or moderate inflammatory infiltrate (p<0.05). There was no correlation between the number of cells immunoreactive to VEGF and the number of vessels immunoreactive to the anti-vWF (r=0.224, p=0.118). The MMP-9 showed marked tendency to strong expression in most cases of GP (70%) and PCs (70%) and low expression in cases of CPR (60%). There was strong association between the expression of MMP-9 on endothelial cells and an intense inflammatory infiltrate (p=0055). Moreover, it was observed greater number of cells immunexpressing VEGF (p<0.01) and highest number of vessels immunoreactive to vWF (p=0051) in lesions with strong expression of MMP-9. The results of this study suggest that VEGF can act as an important stimulus for expression of MMP-9 in endothelial cells of blood vessels, influencing the angiogenic process in PG, PC and PRC. Additionally, the intensity of the inflammatory infiltrate plays important influence on the number of blood vessels, identified by the expressions of vWF, in the expression of MMP-9 in endothelial cells and the expression of VEGF in connective tissue cells in the lesions of this study. Finally, the strong expression of VEGF in the epithelial lining of the RPC suggests that there is a potential for growth in these injuries, probably because of the maintenance of a increased vascular permeability status.

A leucoplasia se caracteriza por apresentar, microscopicamente, hiperceratose, acantose ou displasia epitelial. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a velocidade de proliferação celular destes distúrbios de maturação epitelial por meio da Técnica de AgNOR. A amostra foi constituída de 50 blocos de parafina distribuídos em 5 grupos de acordo com seu diagnóstico histopatológico em hiperceratose, hiperceratose com acantose, acantose, displasia epitelial e epitélio normal. Para cada grupo foram avaliadas as células da camada basal e suprabasal e a quantificação das AgNORs foi realizada através da média dos pontos de AgNOR por núcleo, da área média dos pontos de AgNOR por núcleo e do percentual médio de células com 1, 2, 3 e 4 ou mais pontos de AgNOR por núcleo. Verificou-se que a média de pontos de AgNOR por núcleo aumentou gradualmente do epitélio normal, hiperceratose com acantose, hiperceratose, acantose até a displasia epitelial. Na comparação em relação à área média dos pontos de AgNOR por núcleo observou-se diferença significativa entre o epitélio normal e os demais grupos. Verificou-se ainda que em todos os grupos há o predomínio de células com 1 AgNOR, e o epitélio normal apresentou valor superior No entanto, a displasia epitelial apresentou maior percentual de células com 4 ou mais AgNORs por núcleo, demonstrando o maior potencial de transformação maligna, uma vez que este parâmetro pode representar um sinal de malignidade. Todavia, os três métodos de quantificação não foram capazes de distinguir os distúrbios de maturação epitelial entre si. A partir dos resultados encontrados, pode-se concluir que os distúrbios de maturação epitelial estudados apresentam ritmo de proliferação celular semelhante e que, dentre eles, a acantose e displasia epitelial têm comportamento de maior risco. Portanto, uma leucoplasia que apresente qualquer um dos distúrbios de maturação epitelial no diagnóstico histopatológico, a conduta clínica deve ser semelhante.

AgNORs, e expressão do Epidermal Growth Factor Receptor (EGFR) em células epiteliais de ameloblastomas. Onze casos de ameloblastomas foram submetidos à técnica de hematoxilina e eosina, para análise morfológica; à técnica de impregnação com prata para quantificação das AgNORs e à marcação com anticorpo anti-Epidermal Growth Factor Receptor. Os resultados não revelaram diferenças estatisticamente significativas quanto à quantificação das AgNORs. A expressão do EGFR nas ilhas epiteliais de ameloblastoma não se mostrou uniforme, sendo possível identificar ilhas marcadas e ilhas sem marcação. A localização da marcação também foi variável nas diferentes ilhas epiteliais, sendo a marcação predominante a de citoplasma e raras as de membrana, essas geralmente eram nas ilhas epiteliais de menor tamanho. Concluiu-se que o tumor apresenta um crescimento irregular, com as ilhas de menor tamanho podendo estar associadas a uma maior atividade proliferativa, contribuindo para a infiltração do tumor.

O objetivo do presente estudo é mapear e quantificar as populações de células CD 20, CD 8 e CD 4+ em Hiperplasias inflamatórias (HI) e estabelecer relação com a infecção por Candida sp. Foram utilizados 41 casos de HI do Laboratório de Patologia Bucal da UFRGS. Novos cortes de todos os casos foram submetidos à técnica de coloração do PAS, criando – se 2 grupos: com e sem infecção por Candida sp. Seguiu – se a marcação imunohistoquímica com os anticorpos monoclonais anti CD 20, anti CD 8 e anti CD 4, para se avaliar a localização, a distribuição e quantificação das células positivamente marcadas em 3 campos consecutivos (400x), escolhidos sobre a área de maior concentração do infiltrado inflamatório. Os resultados da recontagem dos campos mostraram que o examinador estava calibrado pelo teste “t”de Student. As células CD 8+ apresentaram localização próxima às hifas de Candida sp. e foram mais numerosas no grupo com infecção (diferença estatisticamente significante p= 732 x 10-20). As células CD 20 e CD 4 positivas não apresentaram relação com a infecção por Candida sp. Concluiu – se que as células CD 8+ apresentaram localização relacionada às hifas de Candida sp., além de uma razão células positivamente marcada/ linfócitos totais estatisticamente mais alta no grupo com infecção por Candida sp.

Resumo não disponível

Resumo não disponível

Os glicocorticóides inalados vêm sendo amplamente utilizados em diversas abordagens terapêuticas. Apesar de suas inúmeras vantagens, esta terapia pode levar à irritação e inflamação dos tecidos especialmente nos sítios primários de contato. Em virtude da inexistência de estudos que avaliam a repercussão do uso de corticosteroides inalatórios sobre os tecidos moles da cavidade bucal, este trabalho propõe-se a avaliar o efeito da Budesonida inalatória em diferentes concentrações sobre a mucosa palatina de ratos Wistar. Para realização deste estudo foram utilizadas amostras parafinadas provenientes do estudo realizado por Daudt et al., 2011. Cada amostra foi avaliada quanto a proliferação celular pela técnica histoquímica (AgNORs), a porcentagem de células inflamatórias imunomarcadas por CD18 e a espessura epitelial por HE. Não foram encontrados resultados estatisticamente significantes quanto a análise da proliferação celular e imunomarcação pelo CD18 quando comparamos os grupos-teste e o grupo controle. No entanto, foram encontradas diferenças estatisticamente significantes (p=0,0027) na camada de queratina, onde o grupo controle apresentou a espessura desta camada menor em relação aos grupos testados. O mesmo resultado não foi encontrado no epitélio, onde não foram observadas diferenças estatisticamente significantes entre o grupo controle e os grupos-teste. Com este estudo pode-se sugerir que a inalação de glicocorticoide possui efeito sobre a fibromucosa palatina, observada no espessamento da camada de queratina e que esta resposta resulta em nenhuma ação danosa às estruturas da fibromucosa bucal. / The inhaled glucocorticoids have been widely used in various therapeutic approaches .Despite of its many benefits, this therapy can lead to irritation and inflammation of the tissues especially in the primary sites of contact. Due to the lack of studies that evaluate the impact of the use of inhaled corticosteroids on the soft tissues of the oral cavity, this study aims to evaluate the effect of inhaled Budesonide in different concentrations on the palatal mucosa of Wistar rats . For this study paraffin samples from the study by Daudt et al (2011) were used. Each sample was assessed for cell proliferation by immunohistochemical technique (AgNORs), the percentage of inflammatory cells immunostained for CD18 and epithelial thickness by HE . No statistically significant results for the analysis of cell proliferation by CD18 immunostaining and were found when comparing the test groups and the control group. However, were found statistically significant differences ( p = 0.0027 ) in the keratin layer , where the control group had the smallest thickness of this layer relative to the tested groups. The same result was not found in the epithelium, where no statistically significant differences between the control and test groups were observed. With this study it can be concluded that inhaled glucocorticoids have effect on the oral mucosa palate observed in the thickening of the keratin layer and that this response results in no harmful to the oral mucosa of the oral structures action.

O objetivo do presente estudo é mapear e quantificar as populações de células CD 20, CD 8 e CD 4+ em Hiperplasias inflamatórias (HI) e estabelecer relação com a infecção por Candida sp. Foram utilizados 41 casos de HI do Laboratório de Patologia Bucal da UFRGS. Novos cortes de todos os casos foram submetidos à técnica de coloração do PAS, criando – se 2 grupos: com e sem infecção por Candida sp. Seguiu – se a marcação imunohistoquímica com os anticorpos monoclonais anti CD 20, anti CD 8 e anti CD 4, para se avaliar a localização, a distribuição e quantificação das células positivamente marcadas em 3 campos consecutivos (400x), escolhidos sobre a área de maior concentração do infiltrado inflamatório. Os resultados da recontagem dos campos mostraram que o examinador estava calibrado pelo teste “t”de Student. As células CD 8+ apresentaram localização próxima às hifas de Candida sp. e foram mais numerosas no grupo com infecção (diferença estatisticamente significante p= 732 x 10-20). As células CD 20 e CD 4 positivas não apresentaram relação com a infecção por Candida sp. Concluiu – se que as células CD 8+ apresentaram localização relacionada às hifas de Candida sp., além de uma razão células positivamente marcada/ linfócitos totais estatisticamente mais alta no grupo com infecção por Candida sp.

A leucoplasia se caracteriza por apresentar, microscopicamente, hiperceratose, acantose ou displasia epitelial. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a velocidade de proliferação celular destes distúrbios de maturação epitelial por meio da Técnica de AgNOR. A amostra foi constituída de 50 blocos de parafina distribuídos em 5 grupos de acordo com seu diagnóstico histopatológico em hiperceratose, hiperceratose com acantose, acantose, displasia epitelial e epitélio normal. Para cada grupo foram avaliadas as células da camada basal e suprabasal e a quantificação das AgNORs foi realizada através da média dos pontos de AgNOR por núcleo, da área média dos pontos de AgNOR por núcleo e do percentual médio de células com 1, 2, 3 e 4 ou mais pontos de AgNOR por núcleo. Verificou-se que a média de pontos de AgNOR por núcleo aumentou gradualmente do epitélio normal, hiperceratose com acantose, hiperceratose, acantose até a displasia epitelial. Na comparação em relação à área média dos pontos de AgNOR por núcleo observou-se diferença significativa entre o epitélio normal e os demais grupos. Verificou-se ainda que em todos os grupos há o predomínio de células com 1 AgNOR, e o epitélio normal apresentou valor superior No entanto, a displasia epitelial apresentou maior percentual de células com 4 ou mais AgNORs por núcleo, demonstrando o maior potencial de transformação maligna, uma vez que este parâmetro pode representar um sinal de malignidade. Todavia, os três métodos de quantificação não foram capazes de distinguir os distúrbios de maturação epitelial entre si. A partir dos resultados encontrados, pode-se concluir que os distúrbios de maturação epitelial estudados apresentam ritmo de proliferação celular semelhante e que, dentre eles, a acantose e displasia epitelial têm comportamento de maior risco. Portanto, uma leucoplasia que apresente qualquer um dos distúrbios de maturação epitelial no diagnóstico histopatológico, a conduta clínica deve ser semelhante.

AgNORs, e expressão do Epidermal Growth Factor Receptor (EGFR) em células epiteliais de ameloblastomas. Onze casos de ameloblastomas foram submetidos à técnica de hematoxilina e eosina, para análise morfológica; à técnica de impregnação com prata para quantificação das AgNORs e à marcação com anticorpo anti-Epidermal Growth Factor Receptor. Os resultados não revelaram diferenças estatisticamente significativas quanto à quantificação das AgNORs. A expressão do EGFR nas ilhas epiteliais de ameloblastoma não se mostrou uniforme, sendo possível identificar ilhas marcadas e ilhas sem marcação. A localização da marcação também foi variável nas diferentes ilhas epiteliais, sendo a marcação predominante a de citoplasma e raras as de membrana, essas geralmente eram nas ilhas epiteliais de menor tamanho. Concluiu-se que o tumor apresenta um crescimento irregular, com as ilhas de menor tamanho podendo estar associadas a uma maior atividade proliferativa, contribuindo para a infiltração do tumor.