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Identificação, caracterização molecular e avaliação da expressão do gene de uma proteína elicitora de defesa de trichoderma spp. / Identification, molecular characterization and evaluation of gene expression of a protein elicitors of defense of Trichoderma spp.

FREITAS, Rachel Silveira 30 June 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2014-07-29T15:16:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO RACHEL SILVEIRA FREITAS.pdf: 844126 bytes, checksum: 0544e2973ae364fb2429cc263d62f87a (MD5) Previous issue date: 2011-06-30 / Species of the genus Trichoderma have been used as biocontrol agents against different pathogens. The mechanisms employed by Trichoderma species against these pathogens ranging from competition for nutrients, production of non-volatile and volatile antibiotics in the production of hydrolytic enzymes, in a mechanism denominated mycoparasitism. In addition to its characteristics, many strains of Trichoderma are competent rhizosphere are able to colonize and grow in association with plant roots. The root colonization by Trichoderma spp., often is associated with the induction of local and systemic resistance. Whereas fungi of the genus Trichoderma have been described as inducers of defense responses and systemic resistance in association with maize (Zea mays), cucumber, tomato and cotton, it was our interest to analyze the interaction between Trichoderma spp. and beans. Therefore, this study aimed to identify and evaluate gene expression of protein elicitors of defense (SM1) in different isolates of Trichoderma spp. obtained from Cerrado soils. Eight isolates were selected and all showed a band of approximately 250pb, corresponding to the expected size of the gene Sm1 from T. Virens. The complete sequence of SM1 gene was obtained using as template cDNA and genomic DNA of T. harzianum. The amplification products containing an ORF of 417 bp and the protein predicted from this sequence has 138 amino acids. The ORF showed identity with sequences of other protein elicitors isolated from Trichoderma spp., and also proteins belonging to the family of cerato-platanin. Studies of the expression of SM1 with the isolate Trichoderma 37 showed that this protein is expressed in different carbon sources. / Espécies do gênero Trichoderma têm sido utilizadas como agentes de controle biológico contra diferentes tipos de fitopatógenos. Os mecanismos utilizados pelas espécies de Trichoderma contra esses fitopatógenos vão desde a competição por nutrientes, produção de antibióticos voláteis e não voláteis à produção de enzimas hidrolíticas, em um mecanismo denominado micoparasitismo. Em adição a estas características, muitas linhagens de Trichoderma são rizosfera competentes e são capazes de colonizar e crescer em associação com as raízes das plantas. A colonização da raiz pelo Trichoderma spp., frequentemente, é associada com a indução de resistência local e sistêmica. Considerando que fungos do gênero Trichoderma já foram descritos como indutores de resposta de defesa e resistência sistêmica em associação com milho (Zea mays), pepineiro, tomateiro e algodoeiro, foi nosso interesse analisar a interação entre Trichoderma spp., e feijoeiro. Sendo assim, este trabalho teve por objetivo identificar e avaliar a expressão do gene de uma proteína elicitora de defesa (Sm1) em diferentes isolados de Trichoderma spp. obtidos de solos do Cerrado. Oito isolados foram selecionados e todos apresentaram uma banda de aproximadamente 250pb, correspondendo ao tamanho esperado do gene Sm1 de T. virens. A seqüência completa do gene da Sm1 foi obtida utilizando como molde cDNA e DNA genômico de T. harzianum. Os produtos da amplificação contém uma ORF de 417 pb e a proteína predita a partir dessa seqüência tem 138 aminoácidos. Esta ORF apresentou identidade com seqüência de proteínas elicitoras de outros isolados de Trichoderma spp. e também com proteínas pertencentes a família das ceratoplataninas. Estudos de expressão da Sm1 com isolado Trichoderma 37 mostrou que esta proteína é expressa em diferentes fontes de carbono.

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