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Atividades biol?gicas de extratos salinos de sementes de plantas da caatinga contra Aedes Aegypti e investiga??o da participa??o de prote?nas bioativasBarbosa, Patricia Batista Barra Medeiros 09 June 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-06-09 / A dengue ? a mais importante arbovirose da atualidade, sendo transmitida pela picada do mosquito Aedes aegypti. A aus?ncia de uma vacina profil?tica torna o controle da dengue pautado principalmente no controle do inseto vetor. Todavia os crescentes relatos de resist?ncia e os danos ambientais causados pelos inseticidas qu?micos t?m tornado urgente ? busca por alternativas seguras. Foram preparados 21 extratos brutos (EB) de sementes de plantas da Caatinga. Como extrator foi utilizado o fosfato de s?dio 50mM pH 8.0. Os extratos foram utilizados em bioensaios Aedes aegypti, ensaios de toxicidade e submetidos a uma caracteriza??o parcial para identificar a presen?a de mol?culas bioativas. As an?lises inseticidas foram realizadas por probit e as diferen?as entre os grupos foram constatada por Student?s t-test e ANOVA. Todos os extratos apresentaram atividade larvicida para L1 e L4 e, com exce??o do extrato de G. americana, levaram ao ?bito 100% das larvas (48h). Os EB de M. urundeuva, P. viridiflora, E. velutina, A. cearenses e E. contortisiliquum apresentaram os melhores resultados larvicidas. Do mesmo modo, todos os EB foram repelentes para a postura das f?meas gr?vidas. Os EB de D. grandiflora, E. contortisiliquum, A. cearenses, C. ferrea e C. retusa foram capazes de atrair as f?meas para a posturas quando em baixas concentra??es. Na concentra??o atrativa o EB de E. contortisiliquum foi capaz de levar a ?bito 52% das larvas L1 em 48 h, enquanto que o EB de A. cearenses resultou na morte de 100% dessas larvas em 24h. Os extratos de A. cearenses, P. viridiflora, E. velutina, M. urundeuva e S. brasiliensis tiveram atividade pupicida, enquanto que os extratos de P. viridiflora, E. velutina, E. contortisiliquum, A. cearenses, A. colubrina, D. grandiflora, B. cheilantha, S. spectabilis, C. pyramidalis, M. regnelli e G. americana tiveram a??o adulticidas. Todos os extratos apresentaram toxicidade para C. dubia e os EB de E. velutina e E. contortisiliquum n?o interferiram na viabilidade dos fibroblastos. Considerando todos os ensaios biol?gicos os extratos de A. cearenses, P. viridiflora, E. contortisiliquum, S. brasiliensis, E. velutina e M. urundeuva foram considerados os mais promissores. Em todos os extratos foram identificadas pelo menos duas prote?nas com potencial. O EB de E. contortisiliquum foi selecionado para ser fracionando, j? que n?o apresentou atividade pupicida, indicando que seu mecanismo de a??o larvicida e adulticida resultou da ingest?o de compostos ativos pelos insetos. Al?m disso, esse extrato apresentou o maior teor de prote?na (22 mg/mL) e a maior atividade inibit?ria para as tripsinas das larvas de A. aegypti. Como observado para o EB, as fra??es proteicas de E. contortisiliquum, tamb?m apresentaram atividade larvicida, mas n?o foram pupicida, com destaque para F2 que apresentou maio atividade larvicida e menor toxicidade ambiental do que o EB de origem. A redu??o na atividade proteol?tica das larvas alimentadas com o EB e as fra??es de E. contortisiliquum sugeriu que inibidores de tripsina seriam os respons?vel pela atividade larvicida. Embora o aumento na purifica??o de um inibidor de tripsina de E. contortisiliquum (ITEc) tenha resultado na perda da atividade larvicida, foi constatado que sua aus?ncia reduziu a efic?cia das fra??es, indicando que o ITEc contribui, mas n?o ? suficiente para a atividade larvicida do EB de E. contortisiliquum. Tamb?m n?o foi verificada atividade larvicida e adulticida na fra??o rica em vicilina, e nem evid?ncias da contribui??o dessa mol?cula para a atividade inseticida desse extrato. Os resultados mostram o potencial dos extratos salinos de sementes de planta da Caatinga e, em especial do EB e da F2 de E. contortisiliquum, no controle da popula??o de A. aegypti e indicam que a efic?cia desses extratos deve resultar da a??o conjunta de diferentes compostos ativos, inclusive de natureza proteica, que atuando em diferentes mecanismos s?o capazes de comprometer a viabilidade dos insetos e retardar o surgimento de resist?ncias. / Dengue fever, currently the most important arbovirus, is transmitted by the
bite of the
Aedes aegypti
mosquito. Given the absence of a prophylactic vaccine, the
disease can only be controlled by combating the vector insect. However, increasing
reports of resistance and environmental damage caused by insecticides have led to the
urgent search for new safer
alternatives.
Twenty
-
um
plant s
eed extracts from the
Caatinga
were prepared
, tested and
characterized
. Sodium phosphate (
50
mM pH 8.0)
was used as extractor. All extracts showed larvicidal
and
ovipositional deterrence
activity
.
Extracts of
D.
grandiflora,
E. contortisiliquum, A. cearenses
,
C. ferrea
and
C.
retusa
were able to attract females for posture when in low co
ncentration
. In the
attractive concentrations, the CE of
E. contortisiliquum
and
A. cearenses
were
able to
kill 52%
and 100% of the larvae
respectively
. The extracts of
A. cearenses
,
P.
viridiflora, E. velutina,
M. urundeuva
and
S. brasiliensis
were also pupicides, while
extracts of
P. viridiflora, E. velutina,
E. contortisiliquum
,
A. cearenses, A. colubrina,
D.
grandiflora
,
B. cheilantha
,
S. spectabilis, C. pyramidalis,
M. regnelli
e
G. americana
displayed adulticidal activity.
All extracts were toxic to
C. dubia
zooplankton
.
The EB
of
E. velutina
and
E. contortisiliquum
did not affect the viability of fibroblasts
.
In all
extracts were identified at least two potential insecticidal proteins such as enzyme
inhibitors, lectins and chitin
-
binding proteins and components of secondary metabolism
.
Considering all bioassays
, the extracts from
A. cearenses, P. viridiflora, E.
contortisiliquum
,
S. brasiliensis,
E.
velutina
and
M. urundeuva
were considered the
most promising
.
The
E. contortisiliquum
extracts was the only one who did not show
pupicida activity, indicating that its mechanism of action larvicide
and adulticidal
is
related only to the ingesti
on of toxic compounds by insect
,
so it was selected to be
fragmenting.
As observed for the CE
, th
e protein fractions of
E. contortisiliquum
also
showed larvicidal activity, highlighting that F2 showed higher larvicidal activity and
lower en
vironmental toxicity than the CE
source.
The reduction in the proteolytic
activity of larvae fed with crude extra
ct and fractions of
E. contortisiliquum
suggest
ed
that the trypsin inhibitors (
ITEc) would be resp
onsible for larvicidal activity
. However
the increase in the purification of this inhibitor resulted
in loss of larvicidal activity
, but
the absence
of
trypsin inhibitor
reduced the
effectiveness of the fractions
, indicating that
the ITEC contributes to the larvicidal activity of this extract. Not been observed
larvicidal activity and adulticide in rich fraction vicilin, nor evidence of the contribution
o
f this molecule for the larvicidal activity of the extract. The results show the potential
of seeds from plant extracts of Caatinga as a source of active molecules against insects
A. aegypti
at different stages of its development cycle, since they are comp
osed of
different active compounds, including protein nature, which act on different
mechanisms should result in the death of insec
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Atividade do óleo essencial de Lippia sidoides (Verbenaceae) e dos monoterpenos timol e carvacrol sobre larvas e pupas de Musca domestica Linnaeus, 1758 (Diptera: Muscidae)Melo, Diego Rodrigues 18 February 2014 (has links)
Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-02-01T11:42:20Z
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Previous issue date: 2014-02-18 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Objetivou-se avaliar a atividade inseticida do óleo essencial de Lippia sidoides e dos
monoterpenos timol e carvacrol sobre larvas e pupas de Musca domestica através de testes de
contato. Para a avaliação da mortalidade larval (ML) foram feitas observações 48h após o
tratamento e acompanhamento das larvas sobreviventes até o estágio adulto, e estes índices
foram incluídos na eficácia de tratamento larval (ETL). Para a eficácia de tratamento pupal
(ETP), foram calculados a mortalidade pupal (MP) após seis dias do tratamento e o percentual
de mal desenvolvimento dos adultos (PMD). Foram testadas oito concentrações do óleo
essencial e das substâncias puras, variando de 0,625 até 30,0 mg/ml. A análise dos constituintes
do óleo essencial mostrou o timol como seu componente majoritário (69,91%). As doses letais
(DL50 e DL90) para larvas e pupas foram estimadas e o carvacrol apresentou os menores valores,
seguido pelo timol e óleo de L. sidoides. Verificou-se ML de 100% a partir da concentração de
10,0 mg/ml para o carvacrol, 15,0 mg/ml para o óleo de L. sidoides e 30,0 mg/ml para o timol.
Já para a ETL foi observada 100% de eficácia a partir da concentração de 5,0 mg/ml para o
carvacrol e L. sidoides e 10,0 mg/ml para o timol. Com relação a MP, o óleo essencial de L.
sidoides não apresentou atividade pupicida. Entretanto, para as concentrações de 20,0 e 30,0
mg/ml foi observado PMD, o que contribuiu para ETP de 44 e 46%, respectivamente. Já para
o carvacrol a maior mortalidade foi alcançada na concentração de 20 mg/ml (58%) e para este
terpeno não houve PMD. Para o timol observou-se maior MP (74%) para a concentração de
30,0 mg/ml com PMD de 60%, o que contribuiu para ETP de 84%. Os produtos testados
apresentaram elevado potencial larvicida, o que os tornam promissores para o desenvolvimento
de formulações ambientalmente seguras e não tóxicas para o controle de larvas de M. domestica
e que, apesar de não terem sido totalmente efetivas no controle de pupas, seu uso para esse
estágio pode ser indicado em um programa de Manejo Integrado de Pragas. / This study aimed to evaluate the insecticidal activity of the essential oil of Lippia sidoides and
thymol and carvacrol monoterpenes against larvae and pupae of Musca domestica by contact
tests. For the evaluation of larval mortality (LM) observations were made 48 hours after
treatment and follow-up of surviving larvae to the adult stage, and these indices were included
in the effectiveness of larval treatment (ELT). For the effectiveness of pupal treatment (EPT)
were calculated pupal mortality (PM) after six days of treatment and the percentage of bad
development of adults (PBD). Eight concentrations of the essential oil and pure substances,
ranging from 0.625 to 30.0 mg/ml were tested. The analysis of the constituents of the essential
oil thymol showed as its major component (69.91 %). The lethal dose (LD50 and LD90) for
larvae and pupae were estimated and carvacrol showed the lowest values, followed by thymol
and L. sidoides oil. It was found LM 100% at concentrations of 10.0 mg/ml for carvacrol, 15.0
mg/ml for L. sidoides oil and 30.0 mg/ml to thymol. As for the ELT 100% efficacy was
observed starting at a concentration of 5.0 mg/ml for carvacrol and L. sidoides and 10.0 mg/ml
to thymol. With respect to PM, the essential oil of L. sidoides showed no pupicida activity.
However, for concentrations of 20.0 and 30.0 mg/ml was observed PBD, which contributed to
EPT of 44 and 46%, respectively. As for carvacrol the highest mortality was achieved at a
concentration of 20 mg/ml (58%) and to that terpene was not PBD. To thymol observed a higher
PM (74%) for the concentration of 30.0 mg/ml with the PBD 60%, which contributed to 84%
of EPT. The products tested showed high potential larvicide, which make them promising for
the development of formulations environmentally safe and non-toxic for the control of larvae
of M. domestica and that although they were not fully effective in the control pupae, their use
for this stage can be indicated in a program of Integrated Pest Management.
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