Sabe-se que a cada ano cerca de dois bilhões de pessoas consomem bebidas alcoólicas, e no Brasil há uma estimativa de que aproximadamente 11,2% da população é dependente de álcool, o que representa mais de cinco milhões de pessoas. Básicamente se pode dizer que todos os órgãos são afetados pela exposição crônica e aguda, mas as miopatias alcoólicas atingem de 1/3 a 2/3 dos alcoólatras e são as das doenças musculares mais frequentes. A literatura apresenta vários suplementos nutricionais que prometem melhora na performance de atividade físicas promovendo conservação ou hipertrofia das fibras musculares, mas estudos mais profundos tem demonstrado que apenas as suplementações de creatina e β- hidroxi-β-metilbutirato (HMB) demonstraram efeitos sobre a otimização dos ganhos de força e massa muscular, Os trabalhos com HMB afirmam que esta substância diminui a degradação proteica muscular e estimula a síntese proteica, entre outras atividades. Considerando os prejuízos causados pelo álcool no tecido muscular e os benefícios produzidos pelo HMB no mesmo tecido pensou-se na realização de um trabalho associando as duas substâncias para responder as seguintes perguntas: a-) o álcool e o HMB alteram do peso dos animais, atuando individualmente e em conjunto? b-) o álcool e o HMB alteram a área das fibras musculares do EDL e do sóleo, atuando individualmente e em conjunto? c-) se as alterações ocorrerem elas são semelhantes nos músculos EDL e sóleo? Para isso foram utilizados 25 ratos (Rattus novergicus), machos, adultos (com aproximadamente 90 dias de idade (407g) divididos em 4 grupos: Grupo Controle Placebo, Grupo Experimental Álcool (25%), Grupo β-Hidroxi β-Metilbutirato (0,3g/Kg) e Grupo Álcool + β-Hidroxi β- Metilbutirato. Foram retiradas amostras dos músculos sóleo e extensor longo dos dedos e submetidas a coloração de HE. Foi realizado a morfometria de duzentas fibras de cada músculo de cada animal. Estas fibras tiveram as suas áreas calculadas. Os dados obtidos foram submetidos ao tratamento estatístico. Os dados encontrados nesta pesquisa permitiram concluir que: : a-) o álcool alterou, de maneira negativa o peso dos animais, mas o HMB não, mesmo quando atuou em conjunto com o álcool, ou seja, o HMB não conseguiu anular o efeito negativo do álcool; b-) o álcool alterou, de maneira negativa a área das fibras dos músculos EDL e sóleo, e o HMB não, mas quando ele atuou em conjunto, conseguiu anular o efeito negativo do álcool; c-) as alterações produzidas pela ação do álcool e HMB, individualmente ou em conjunto foram semelhantes nos músculos EDL e sóleo. / It is known that every year about two billion people consume alcoholic beverages, and in Brazil there is an estimate that approximately 11.2% of the population is dependent on alcohol, which is more than five million people. Basically you can say that all organs are affected by chronic and acute exposure, but alcoholic myopathy reach 1/3 to 2/3 of alcoholics, and are the most frequent muscular diseases. The literature contains several nutritional supplements that promise improvement in physical activity performance promoting conservation or hypertrophy of muscle fibers, but further study has shown that only creatine supplementation and β-hydroxy-β-methylbutyrate (HMB) have shown effects on optimization the strength gains and muscle mass, works with HMB claim that this substance decreases muscle protein degradation and stimulates protein synthesis, among other activities. Considering the damage caused by alcohol in muscle tissue and the benefits produced by the HMB in the same fabric was thought in achieving a work combining the two substances to answer the following questions: a-) alcohol and HMB alter the weight of the animals, acting individually and together? b-) alcohol and HMB alter the area of the muscle fibers of the soleus and EDL individually and jointly acting? c) if changes occur they are similar in EDL and soleus muscles? For this we used 25 rats (Rattus norvegicus), adult male (approximately 90 days old (407 g) divided in 4 groups: Control Group Placebo Experiment Group Alcohol (25%), Group β-hydroxy β-methylbutyrate (0.3g / kg), and Group Alcohol + β-hydroxy β-methylbutyrate. soleus and samples were taken long extensor muscles of the fingers and subjected to HE staining. morphometry was performed two hundred fibers of each muscle of each animal. These fibers had calculated their areas the data were subjected to statistical analysis the data found in this study showed that: a-) alcohol changed in a negative way the weight of the animals, but the HMB not even when he served in together with the alcohol, i.e., HMB could not nullify the negative effects of alcohol; b) alcohol changed in a negative way the area of the fibers of the EDL and soleus muscles, and HMB not, but when he acted together, could nullify the negative effect of alcohol; c) the changes produced by the action of alcohol and HMB, individually or together were similar in EDL and soleus muscles.

Sabe-se que a cada ano cerca de dois bilhões de pessoas consomem bebidas alcoólicas, e no Brasil há uma estimativa de que aproximadamente 11,2% da população é dependente de álcool, o que representa mais de cinco milhões de pessoas. Básicamente se pode dizer que todos os órgãos são afetados pela exposição crônica e aguda, mas as miopatias alcoólicas atingem de 1/3 a 2/3 dos alcoólatras e são as das doenças musculares mais frequentes. A literatura apresenta vários suplementos nutricionais que prometem melhora na performance de atividade físicas promovendo conservação ou hipertrofia das fibras musculares, mas estudos mais profundos tem demonstrado que apenas as suplementações de creatina e β- hidroxi-β-metilbutirato (HMB) demonstraram efeitos sobre a otimização dos ganhos de força e massa muscular, Os trabalhos com HMB afirmam que esta substância diminui a degradação proteica muscular e estimula a síntese proteica, entre outras atividades. Considerando os prejuízos causados pelo álcool no tecido muscular e os benefícios produzidos pelo HMB no mesmo tecido pensou-se na realização de um trabalho associando as duas substâncias para responder as seguintes perguntas: a-) o álcool e o HMB alteram do peso dos animais, atuando individualmente e em conjunto? b-) o álcool e o HMB alteram a área das fibras musculares do EDL e do sóleo, atuando individualmente e em conjunto? c-) se as alterações ocorrerem elas são semelhantes nos músculos EDL e sóleo? Para isso foram utilizados 25 ratos (Rattus novergicus), machos, adultos (com aproximadamente 90 dias de idade (407g) divididos em 4 grupos: Grupo Controle Placebo, Grupo Experimental Álcool (25%), Grupo β-Hidroxi β-Metilbutirato (0,3g/Kg) e Grupo Álcool + β-Hidroxi β- Metilbutirato. Foram retiradas amostras dos músculos sóleo e extensor longo dos dedos e submetidas a coloração de HE. Foi realizado a morfometria de duzentas fibras de cada músculo de cada animal. Estas fibras tiveram as suas áreas calculadas. Os dados obtidos foram submetidos ao tratamento estatístico. Os dados encontrados nesta pesquisa permitiram concluir que: : a-) o álcool alterou, de maneira negativa o peso dos animais, mas o HMB não, mesmo quando atuou em conjunto com o álcool, ou seja, o HMB não conseguiu anular o efeito negativo do álcool; b-) o álcool alterou, de maneira negativa a área das fibras dos músculos EDL e sóleo, e o HMB não, mas quando ele atuou em conjunto, conseguiu anular o efeito negativo do álcool; c-) as alterações produzidas pela ação do álcool e HMB, individualmente ou em conjunto foram semelhantes nos músculos EDL e sóleo. / It is known that every year about two billion people consume alcoholic beverages, and in Brazil there is an estimate that approximately 11.2% of the population is dependent on alcohol, which is more than five million people. Basically you can say that all organs are affected by chronic and acute exposure, but alcoholic myopathy reach 1/3 to 2/3 of alcoholics, and are the most frequent muscular diseases. The literature contains several nutritional supplements that promise improvement in physical activity performance promoting conservation or hypertrophy of muscle fibers, but further study has shown that only creatine supplementation and β-hydroxy-β-methylbutyrate (HMB) have shown effects on optimization the strength gains and muscle mass, works with HMB claim that this substance decreases muscle protein degradation and stimulates protein synthesis, among other activities. Considering the damage caused by alcohol in muscle tissue and the benefits produced by the HMB in the same fabric was thought in achieving a work combining the two substances to answer the following questions: a-) alcohol and HMB alter the weight of the animals, acting individually and together? b-) alcohol and HMB alter the area of the muscle fibers of the soleus and EDL individually and jointly acting? c) if changes occur they are similar in EDL and soleus muscles? For this we used 25 rats (Rattus norvegicus), adult male (approximately 90 days old (407 g) divided in 4 groups: Control Group Placebo Experiment Group Alcohol (25%), Group β-hydroxy β-methylbutyrate (0.3g / kg), and Group Alcohol + β-hydroxy β-methylbutyrate. soleus and samples were taken long extensor muscles of the fingers and subjected to HE staining. morphometry was performed two hundred fibers of each muscle of each animal. These fibers had calculated their areas the data were subjected to statistical analysis the data found in this study showed that: a-) alcohol changed in a negative way the weight of the animals, but the HMB not even when he served in together with the alcohol, i.e., HMB could not nullify the negative effects of alcohol; b) alcohol changed in a negative way the area of the fibers of the EDL and soleus muscles, and HMB not, but when he acted together, could nullify the negative effect of alcohol; c) the changes produced by the action of alcohol and HMB, individually or together were similar in EDL and soleus muscles.

A presença de Candida albicans nos biofilmes microbianos da superfície interna das próteses totais superiores está relacionada com uma doença inflamatória no palato, a estomatite protética. Constituinte da defesa inata do hospedeiro, o epitélio bucal, por sua vez, tem a capacidade de reconhecer e reagir aos fatores fúngicos a fim de evitar a invasão pelo microrganismo. O objetivo deste trabalho foi avaliar in vitro o efeito direto e indireto de C. albicans viável sobre as células epiteliais de palato humano (CEPH) ao longo do tempo. Objetivamos correlacionar os eventos de agressão, apoptose e invasão das CEPH provocados pelo fungo, com as respostas de defesa epitelial mediante produção de óxido nítrico (NO) e expressão gênica do peptídeo antimicrobiano &#x3B2;-defensina 2 (hBD-2). Material e Métodos: As CEPH foram obtidas, parte pelo método explante e parte pelo método enzimático, e mantidas em co-cultivo sobre uma camada de sustentação feederlayer (fibroblastos gengivais humanos mitoticamente inativados). Após desafios das CEPH com C. albicans ATCC 90028 por contato direto fungo-epitélio (D.D.) e indireto pelo sobrenadante da cultura do fungo hifal (D.I.), proporções de desafio de 0,01/1; 0,025/1 e 0,1/1 levedura/queratinócito (FUN/EPI) e tempos experimentais de 3, 6 e 10 h foram determinados; via ensaios de viabilidade celular por imunofluorescência (LIVE/DEAD), e análise qualitativa da invasão celular pelo fungo por meio do método colorimétrico com laranja de acridina. A apoptose epitelial foi determinada pela marcação nuclear fluorescente com Hoechtst 33258. A produção de óxido nítrico (NO) e a expressão de RNAm de hBD-2 foram avaliados por reação colorimétrica de Griess e RT-qPCR, respectivamente. Os resultados foram expressos como média ± desvio padrão e submetidos aos testes estatísticos ANOVA Fatorial, Teste de Contraste; ou Teste de Mann-Whitney (p<0,05). Resultados: Em 3 h, foi detectado aumento da apoptose das células epiteliais em relação ao Meio (epitélio não desafiado, p<0,05), na proporção 0,1/1 FUN/EPI, a qual manteve-se ao longo do tempo, com o aumento da concentração fúngica e independente de D.D. e D.I. O início da invasão intraepitelial pelo fungo foi observado no tempo de 6 h, em especial na proporção 0,025/1 FUN/EPI, coincidindo com discreto aumento da concentração de NO e expressão máxima de hBD-2 pelas CEPH desafiadas diretamente (p<0,05). Entretanto, nos estágios tardios (10 h) foram observados redução de NO e retorno da expressão de hBD-2 ao basal, com intensificação da invasão epitelial. Conclusão: Estes resultados sugerem que os fatores secretados por C. albicans foram suficientes para agressão das CEPH, com indução da apoptose, mesmo na ausência do contato direto fungo-epitélio. As CEPH, por sua vez, apresentaram respostas de defesa após 6 h de desafio fúngico, por meio da liberação de NO e expressão de hBD-2, porém com necessidade da interação direta fungo-epitélio. A ativação da via de apoptose das CEPH ocorreu previamente à ativação destes mecanismos de defesa epitelial. / The presence of the fungus Candida albicans in the microbial biofilm underlying maxillary prosthesis is related to an inflammatory reaction of the palatal mucosa, the denture stomatitis. As a component of the host innate defense, the oral epithelium has the ability to recognize and react to fungal factors in order to prevent the microrganism invasion. The aim of this study was to in vitro evaluate the direct and indirect effect of viable C. albicans on the human palatal epithelial cells (HPEC) over time. The aggressive events, such as apoptosis and HPEC invasion by the fungus, were correlated with epithelial defense responses through the nitric oxide (NO) production and antimicrobial peptides &#x3B2;-defensin (hBD-2) mRNA expression. Methods: The HPEC were obtained by explant and enzymatic methods, and were maintained in co-culture on a feeder-layer support (mitotically inactivated human gingival fibroblasts). After the HPEC challenges with C. albicans ATCC 90028 by direct contact fungus-epithelium (D.D.) and indirect contact by supernatant from hyphal fungus (D.I.), defiance ratios of 0.01/1, 0.025/1 and 0.1/1 yeast/keratinocyte (FUN/EPI) and experimental times of 3, 6 and 10 h were determined. These conditions were standardized by cell viability immunofluorescence assay (LIVE/DEAD), and cell invasion qualitative analysis (colorimetric method with acridine orange). The apoptotic cells were determined by fluorescent nuclear staining with Hoechtst 33258. The nitric oxide (NO) production and hBD-2 gene expression were evaluated by Griess colorimetric reaction and RT-qPCR, respectively. The results were expressed as mean ± standard deviation and were analyzed using the factorial ANOVA, Contrast Test; or Mann-Whitney Test (p<0,05). Results: At 3 h, the apoptotic epithelial cells under 0.1/1 FUN/EPI increased compared to epithelium unchallenged (p<0,05) that remained over time with increasing concentration and independent of D.D. and D.I. The onset of intraepithelial invasion by the fungus was observed at 6 h, especially in the ratio of 0.025/1 FUN/EPI under D.D., coinciding with a slight increase of NO concentration and maximum hBD-2 mRNA expression by HPEC (p<0,05). However, in later stages (10 h), the NO reduction and return of hBD-2 gene expression to basal, with epithelial invasion intensification, were observed. Conclusion: These results suggest that factors secreted by C. albicans were enought to HPEC injury, with apoptosis induction, even in the absence of direct contact fungus-epithelium. On the other hand, HPEC presented defense responses after 6 h of fungal challenge through NO release and hBD-2 expression, but with requirement of direct interaction fungus-epithelium. The HPEC apoptosis occurred prior to the activation of these mechanisms of epithelial defense.

A presença de Candida albicans nos biofilmes microbianos da superfície interna das próteses totais superiores está relacionada com uma doença inflamatória no palato, a estomatite protética. Constituinte da defesa inata do hospedeiro, o epitélio bucal, por sua vez, tem a capacidade de reconhecer e reagir aos fatores fúngicos a fim de evitar a invasão pelo microrganismo. O objetivo deste trabalho foi avaliar in vitro o efeito direto e indireto de C. albicans viável sobre as células epiteliais de palato humano (CEPH) ao longo do tempo. Objetivamos correlacionar os eventos de agressão, apoptose e invasão das CEPH provocados pelo fungo, com as respostas de defesa epitelial mediante produção de óxido nítrico (NO) e expressão gênica do peptídeo antimicrobiano &#x3B2;-defensina 2 (hBD-2). Material e Métodos: As CEPH foram obtidas, parte pelo método explante e parte pelo método enzimático, e mantidas em co-cultivo sobre uma camada de sustentação feederlayer (fibroblastos gengivais humanos mitoticamente inativados). Após desafios das CEPH com C. albicans ATCC 90028 por contato direto fungo-epitélio (D.D.) e indireto pelo sobrenadante da cultura do fungo hifal (D.I.), proporções de desafio de 0,01/1; 0,025/1 e 0,1/1 levedura/queratinócito (FUN/EPI) e tempos experimentais de 3, 6 e 10 h foram determinados; via ensaios de viabilidade celular por imunofluorescência (LIVE/DEAD), e análise qualitativa da invasão celular pelo fungo por meio do método colorimétrico com laranja de acridina. A apoptose epitelial foi determinada pela marcação nuclear fluorescente com Hoechtst 33258. A produção de óxido nítrico (NO) e a expressão de RNAm de hBD-2 foram avaliados por reação colorimétrica de Griess e RT-qPCR, respectivamente. Os resultados foram expressos como média ± desvio padrão e submetidos aos testes estatísticos ANOVA Fatorial, Teste de Contraste; ou Teste de Mann-Whitney (p<0,05). Resultados: Em 3 h, foi detectado aumento da apoptose das células epiteliais em relação ao Meio (epitélio não desafiado, p<0,05), na proporção 0,1/1 FUN/EPI, a qual manteve-se ao longo do tempo, com o aumento da concentração fúngica e independente de D.D. e D.I. O início da invasão intraepitelial pelo fungo foi observado no tempo de 6 h, em especial na proporção 0,025/1 FUN/EPI, coincidindo com discreto aumento da concentração de NO e expressão máxima de hBD-2 pelas CEPH desafiadas diretamente (p<0,05). Entretanto, nos estágios tardios (10 h) foram observados redução de NO e retorno da expressão de hBD-2 ao basal, com intensificação da invasão epitelial. Conclusão: Estes resultados sugerem que os fatores secretados por C. albicans foram suficientes para agressão das CEPH, com indução da apoptose, mesmo na ausência do contato direto fungo-epitélio. As CEPH, por sua vez, apresentaram respostas de defesa após 6 h de desafio fúngico, por meio da liberação de NO e expressão de hBD-2, porém com necessidade da interação direta fungo-epitélio. A ativação da via de apoptose das CEPH ocorreu previamente à ativação destes mecanismos de defesa epitelial. / The presence of the fungus Candida albicans in the microbial biofilm underlying maxillary prosthesis is related to an inflammatory reaction of the palatal mucosa, the denture stomatitis. As a component of the host innate defense, the oral epithelium has the ability to recognize and react to fungal factors in order to prevent the microrganism invasion. The aim of this study was to in vitro evaluate the direct and indirect effect of viable C. albicans on the human palatal epithelial cells (HPEC) over time. The aggressive events, such as apoptosis and HPEC invasion by the fungus, were correlated with epithelial defense responses through the nitric oxide (NO) production and antimicrobial peptides &#x3B2;-defensin (hBD-2) mRNA expression. Methods: The HPEC were obtained by explant and enzymatic methods, and were maintained in co-culture on a feeder-layer support (mitotically inactivated human gingival fibroblasts). After the HPEC challenges with C. albicans ATCC 90028 by direct contact fungus-epithelium (D.D.) and indirect contact by supernatant from hyphal fungus (D.I.), defiance ratios of 0.01/1, 0.025/1 and 0.1/1 yeast/keratinocyte (FUN/EPI) and experimental times of 3, 6 and 10 h were determined. These conditions were standardized by cell viability immunofluorescence assay (LIVE/DEAD), and cell invasion qualitative analysis (colorimetric method with acridine orange). The apoptotic cells were determined by fluorescent nuclear staining with Hoechtst 33258. The nitric oxide (NO) production and hBD-2 gene expression were evaluated by Griess colorimetric reaction and RT-qPCR, respectively. The results were expressed as mean ± standard deviation and were analyzed using the factorial ANOVA, Contrast Test; or Mann-Whitney Test (p<0,05). Results: At 3 h, the apoptotic epithelial cells under 0.1/1 FUN/EPI increased compared to epithelium unchallenged (p<0,05) that remained over time with increasing concentration and independent of D.D. and D.I. The onset of intraepithelial invasion by the fungus was observed at 6 h, especially in the ratio of 0.025/1 FUN/EPI under D.D., coinciding with a slight increase of NO concentration and maximum hBD-2 mRNA expression by HPEC (p<0,05). However, in later stages (10 h), the NO reduction and return of hBD-2 gene expression to basal, with epithelial invasion intensification, were observed. Conclusion: These results suggest that factors secreted by C. albicans were enought to HPEC injury, with apoptosis induction, even in the absence of direct contact fungus-epithelium. On the other hand, HPEC presented defense responses after 6 h of fungal challenge through NO release and hBD-2 expression, but with requirement of direct interaction fungus-epithelium. The HPEC apoptosis occurred prior to the activation of these mechanisms of epithelial defense.