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Previous issue date: 2017-03-03 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Euphorbia umbellata (Pax) Bruyns tem seu látex utilizado, etnofarmacologicamente,
para tratamento de câncer, incluindo leucemias. Uma doença
maligna que atinge os leucócitos, com alta incidência, sendo o tipo de câncer
mais comum na infância. O tratamento quimioterápico é, na maioria dos casos,
o mais recomendado, mas apresenta-se como terapia muito agressiva e com
diversos efeitos colaterais. Por conseguinte, o objetivo deste trabalho foi o de
avaliar o potencial citotóxico da fração hexano do látex de Euphorbia umbellata
suas subfrações e da substância isolada, eufol, frente a linhagens modelo de
leucemia. Para tanto as células, Jurkat e HL-60, foram tratadas por 72 horas
com a fração hexano (1,25-75 μg/mL), subfrações éter de petróleo,
diclorometano, etanol e metanol (1,25-75 μg/mL) e com o eufol (10-50 μg/mL),
sendo sua viabilidade celular avaliada pelo ensaio de redução do MTT ao final
deste período. Para a subfração diclorometano (mais ativa) foi avaliada a
viabilidade celular no período de 24 e 48 horas, além de ter sido determinado o
índice de seletividade. Cabe ressaltar que a fração hexano e as subfrações
foram obtidas por fracionamento em extrator de Soxhlet, enquanto o eufol, por
precipitação ácida, seguida de cromatografia em coluna, e sendo identificado
por ressonância magnética nuclear e espectrometria de massas. A fração
hexano e as subfrações resultantes foram analisadas por cromatografia gasosa
acoplada ao espectrômetro de massas. A avaliação cromatográfica das
subfrações permitiu sugerir 10 substâncias, os triterpenos: eufol; lanosterol;
cicloartenol; tirucalol; taraxasterol e lupeol, os diterpenos: forbol-12,13,20-
triacetato; 4-β forbol e 3-desoxo-3- 16-dihidroxi-12-desoxiforbol-3-13-16-20-
tetracetato, e o esteroide sitosterol. Como resultado do ensaio citotóxico
obteve-se, para a fração hexano uma CI50 de 0,061 ± 1,226 μg/mL para as
células HL-60 e 4,624 ± 1,088 μg/mL para células Jurkat; para o eufol uma CI50
de 21,031 ± 1,778 μg/mL (HL-60) e 35,925 ± 5,011 μg/mL (Jurkat). Dentre as
subfrações a diclorometano apresentou o melhor perfil de resposta com valores
de 0,005±0,098 μg/mL (HL-60) e 0,200±0,957 μg/mL (Jurkat), revelando que o
tratamento é tempo dependente. Ademais a subfração diclorometano mostrouse
seletiva para o tratamento de leucemia com índices de seletividade superior
a 2. Portanto, conclui-se que a subfração diclorometano é a promissora para o
tratamento de leucemia, possivelmente por ação sinérgica dos terpenos nela
presente. / Euphorbia umbellata (Pax) Bruyns has its latex used, ethno-pharmacologically,
for the treatment of cancer, including leukemias. A malignant disease that
affects leukocytes, with high incidence, being the most common type of cancer
in childhood. Chemotherapy treatment is, normally, the most recommended, but
it presents as very aggressive therapy and with several side effects. Therefore,
the objective of this work was to evaluate the cytotoxic potential of the hexane
fraction of Euphorbia umbellata latex, the subfraction of that and the isolated
substance, euphol, against leukemia model lines. For this, the cells, Jurkat and
HL-60, were treated for 72 hours with the hexane fraction (1.25-75 μg/mL),
subfractions petroleum ether, dichloromethane, ethanol and methanol (1.25-75
μg/mL), and euphol (10-50 μg/mL), and their cell viability was evaluated by the
assay of MTT reduction at the end of this period. For the dichloromethane
subfraction (the most active), the cell viability was evaluated in the period of 24
and 48 hours, in addition, the selectivity index was determined. It should be
noted that the hexane fraction and subfractions were obtained by fractionation
in Soxhlet extractor, while euphol by acid precipitation, followed by column
chromatography, and being identified by nuclear magnetic resonance and mass
spectrometry. The hexane fraction was partitioned and the resulting
subfractions were analyzed by gas chromatography coupled to the mass
spectrometer. The chromatographic evaluation of the subfractions allowed to
suggest 10 substances, the triterpenes: euphol; lanosterol; cycloartenol;
tirucallol; taraxasterol and lupeol, the diterpenes: phorbol-12,13,20-triacetate; 4-
β-phorbol and 3-deoxo-3-16-dihydroxy-12-deoxyphorbol-3-13-16-20-tetracetate,
and the steroid sitosterol. As a result of the cytotoxic assay, an IC50 of 0.061 ±
1.226 μg/mL was obtained for HL-60 cells and 4.624 ± 1.088 μg/mL for Jurkat
cells; and for euphol an IC50 of 21.031 ± 1.778 μg/ml (HL-60) and 35.925 ±
5.011 μg/ml (Jurkat). Among the subfractions, the dichloromethane presented
the best response profile with values of 0,005±0,098 μg/mL (HL-60) and
0,200±0,957 μg/mL (Jurkat), revealing that the treatment is time dependent. In
addition, the dichloromethane subfraction was selective for the treatment of
leukemia with indexes of selectivity superior to 2.Therefore, it is concluded that
the subfraction dichloromethane is promising for the treatment of leukemia,
possibly by synergistic action of the terpenes in it.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:tede2.uepg.br:prefix/2452 |
| Date | 03 March 2017 |
| Creators | Cruz, Luiza Stolz |
| Contributors | Beltrame, Flávio Luis, Kanunfre, Carla Cristine, Paludo, Kátia Sabrina, Barison, Anderson |
| Publisher | Universidade Estadual de Ponta Grossa, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmaceuticas, UEPG, Brasil, Departamento de Ciências Farmacêuticas |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UEPG, instname:Universidade Estadual de Ponta Grossa, instacron:UEPG |
| Rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
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