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Meio condicionado de osso desmineralizado e liofilizado altera a expressão gênica de fibroblastos orais via receptores TGF-B in vitro

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Odontologia, Florianópolis, 2016 / Made available in DSpace on 2016-09-20T04:57:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2016 / A matriz óssea desmineralizada (MOD) é utilizada para o tratamento de defeitos ósseos. O meio condicionado obtido a partir de partículas ósseas de origem autógena tem o potencial de ativar a sinalização do fator de crescimento transformador-ß (TGF-ß) em células mesenquimais. O objetivo deste estudo foi determinar se o processamento do osso autógeno em MOD afeta a atividade do meio condicionado. Métodos: Blocos corticais suínos foram submetidos ao desengorduramento, à desmineralização com diferentes concentrações de ácido clorídrico (HCl), e a diferentes temperaturas durante sua etapa de preparo. Posteriormente, o osso foi liofilizado e particulado até a obtenção da matriz óssea desmineralizada. Fibroblastos gengivais e do ligamento periodontal foram expostos ao meio condicionado obtido a partir da matriz óssea desmineralizada (MOCD). Alterações na expressão dos genes alvos do fator de crescimento transformador-ß foram determinados. Resultados: O MOCD alterou consideravelmente a expressão dos genes alvos (ADM, PTX3, KANK4, IL11, NOX4, e BTBD11). Esta resposta foi observada nos fibroblastos gengivais e do ligamento periodontal. A etapa de desengorduramento diminuiu a atividade do MOCD. O inibidor seletivo SB431542 de receptores TGF-ß bloqueou os efeitos do MOCD sobre a expressão gênica. No entanto a dorsomorfina, inibidora seletiva dos receptores da proteína óssea morforgenética (BMP), não teve efeito semelhante. O meio ósseo condicionado obtido a partir da MOD comercial humana, também alterou a expressão gênica. Conclusão: Os achados sugerem que o meio condicionado obtido a partir da matriz óssea desmineralizada pode ativar a sinalização do fator de crescimento transformador-ß de fibroblastos gengivais e do ligamento periodontal. <br> / Abstract : Demineralized bone matrix (DBM) is used for the treatment of osseous defects. Conditioned medium from native bone chips can activate transforming growth fator-ß (TGF-ß) signaling in mesenchymal cells. The aim of this study was to determine whether processing of native bone into DBM affects the activity of the conditioned medium. Methods: Porcine cortical bone blocks were subjected to defatting, different concentrations of hydrochloric acid (HCl), and various temperatures. DBM was lyophilized, ground, and placed into culture medium. Human gingiva and periodontal fibroblasts were exposed to the respective conditioned medium obtained from DBM (DBCM). Changes in the expression of TGF-ß target genes were determined. Results: DBCM altered the expression of TGF-ß target genes (e.g., adrenomedullin, pentraxin 3, KN motif and ankyrin repeat domains 4, interleukin 11, NADPH oxidase 4, and BTB [POZ] domain containing 11) by at least five-fold. The response was observed in fibroblasts from both sources. Defatting lowered the activity of DBCM. The TGF-ß receptor type I kinase inhibitor SB431542 [4-(4 (benzo[d] 1,3]dioxol-5-yl)-5-(pyridin-2-yl)-1H-imidazol-2 yl)benzamide] but not the inhibitor of bone morphogenetic protein receptor dorsomorphin, blocked the effects of DBCM on gene expression. Moreover, conditioned medium obtained from commercial human DBM modulated the expression of TGF-ß target genes. Conclusion: The findings suggest that the conditioned medium obtained from demineralized bone matrix can activate TGF-ß signaling in oral fibroblasts.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufsc.br:123456789/168146
Date January 2016
CreatorsSchuldt Filho, Guenther
ContributorsUniversidade Federal de Santa Catarina, Bianchini, Marco Aurélio, Gruber, Reinhard
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
Format111 p.| il., tabs., grafs.
Sourcereponame:Repositório Institucional da UFSC, instname:Universidade Federal de Santa Catarina, instacron:UFSC
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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