Στην χρόνια νεφρική ανεπάρκεια, η μειωμένη διήθηση του πλάσματος οδηγεί στην αυξημένη συγκέντρωση τοξινών στο αίμα. Αυτό προκαλεί δυσλειτουργία του ενδοθηλίου, η οποία περιλαμβάνει την φλεγμονή, την αθηροσκλήρωση και τελικά την υπέρταση.
Στο πλαίσιο της μελέτης της δράσης των μη διηθούμενων τοξινών, χρησιμοποιήθηκε ορός ασθενών πριν και μετά την αιμοκάθαρση. Ως in vitro σύστημα μελέτης, χρησιμοποιήθηκε πρωτογενής καλλιέργεια ενδοθηλιακών κυττάρων από ομφάλια φλέβα ανθρώπου (HUVEC) και ελέγχθηκε η επίδραση ορού πριν και μετά την αιμοκάθαρση, στον πολλαπλασιασμό, την απόπτωση, την μετανάστευση και την «επούλωση πληγών» των κυττάρων αυτών. Επίσης, μελετήθηκε η έκφραση των μεταλλοπρωτεϊνασών MMP-2 και MMP-9 και των αναστολέων τους TIMP-1 και 2 σε επίπεδο mRNA και πρωτεΐνης καθώς και η έκφραση του κολλαγόνου IV και της ελαστίνης. Χρόνο- και δοσο-εξαρτώμενα πειράματα έδειξαν ότι ο μετά-ορός, σε σχέση με τον προ-ορό, επάγει τον πολλαπλασιασμό, την μετανάστευση και την διαδικασία της «επούλωσης πληγών» των ενδοθηλιακών κυττάρων με στατιστικά σημαντικό τρόπο, ενώ βρέθηκε να μειώνει την απόπτωση. Επίσης βρέθηκε ότι ο προ- ορός, σε σχέση με τον μετά- ορό, επάγει με στατιστικά σημαντικό τρόπο, την έκφραση και ενεργότητα των MMP-2 και MMP-9, ενώ καταστέλλει την έκφραση καθώς και τα επίπεδα των αναστολέων TIMP-1 και TIMP-2. Τέλος καταστέλλει την έκφραση των βασικών συστατικών της εξωκυττάριας ύλης, του κολλαγόνου IV και της ελαστίνης.
Συμπερασματικά, ο ορός πριν την αιμοκάθαρση φαίνεται να συμμετέχει στην δυσλειτουργία του ενδοθηλίου, καταστέλλοντας τον πολλαπλασιασμό και την μετανάστευση και επάγοντας ταυτόχρονα την απόπτωση των ενδοθηλιακών κυττάρων. Παράλληλα ο προ-ορός καταστρέφει την εξωκυττάρια ύλη των ενδοθηλιακών κυττάρων επάγοντας τις MMP-2 και -9, καταστέλλοντας τους αναστολείς τους TIMP-1 και -2 και μειώνοντας ταυτόχρονα την έκφραση του κολλαγόνου IV και της ελαστίνης. / In chronic renal disease, reduced glomerular filtration results to increased toxin concentration in blood. This leads, among others, to endothelial dysfunction which concludes inflammation, atherosclerosis and finally hypertension.
In this study, in order to investigate the effect of non-filtrated toxins, we used pre-haemodialysis and post-haemodialysis serum (control) from end-stage renal patients. As in vitro system of study we used the primary endothelial cell culture from human umbilical vein (HUVEC) and the effect of pre- and post- haemodialysis serum on cell proliferation, migration, apoptosis and wound healing was investigated. In addition, the expression of matrix metalloproteases MMP-2 and MMP-9 and their inhibitors TIMP-1 and TIMP-2 was examined. Time course and dose-response experiments revealed that pre-serum reduces proliferation, migration and wound healing, while induced apoptosis in a statistically significant manner. Pre-, compared to post-haemodialysis serum, induces the expression and activity of MMP-2 and MMP-9, while inhibits the expression of TIMP-1 and TIMP-2.
Concluding, uremic toxins lead to endothelial dysfunction, inhibiting cell proliferation, cell migration and inducing apoptosis. In addition, uremic toxins contribute to the degradation of extracellular matrix, inducing MMP-2 and MMP-9 and inhibiting TIMP-1 and TIMP-2.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:upatras.gr/oai:nemertes:10889/824 |
| Date | 28 July 2008 |
| Creators | Ζαφειρόπουλου, Καλλιόπη |
| Contributors | Κατσώρης, Παναγιώτης, Zafeiropoulou, Kalliopi, Λαμπροπούλου, Μαρία, Βλαχογιάννης, Ιωάννης, Κατσώρης, Παναγιώτης |
| Source Sets | University of Patras |
| Language | gr |
| Detected Language | Greek |
| Type | Thesis |
| Rights | 0 |
| Relation | Η ΒΥΠ διαθέτει αντίτυπο της διατριβής σε έντυπη μορφή στο βιβλιοστάσιο διδακτορικών διατριβών που βρίσκεται στο ισόγειο του κτιρίου της. |
Page generated in 0.0023 seconds