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Previous issue date: 2004-11-05 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Heparan sulfate (HS) and Heparin (Hep) glycosaminoglycans (GAGs) are heterogeneous and highly charged polysaccharides. HS is structurally related to Hep but is much less substituted with sulfo groups than heparin and has a more varied structure (or sequence). Because of structural similiarities between these two polymers, they have been described together as heparinoids . Both chains bind a variety of proteins and mediate various physiologically important processes including, blood coagulation, cell adhesion and growth factor regulation. Heparinoids with structural characteristics similar to these described from HS and/or Hep from mammalian tissues have been isolated from different species of invertebrates, although only a few heparinoids from unusual sources have been characterized. The present study describes the presence of unusual heparinoids population from Artemia franciscana, isolated after proteolysis and fractionation by ion exchange resin and named, F-3.0M. The study model in vivo were hemostasis (rat tail scarification) and inflamatoty activity. The tests in vitro were used for coagulations assays (PT and APTT). The analyse of the heparinoids eluted with 3,0M NaCl showed electrophoretic migration in different buffer systems a single band with a behaviour intermediate between those of mammalian HEP and HS. The main products obtained from Artemia heparinoids after enzymatic degradation with heparitinases I and II from F. heparinum were N-sulphated disaccharides (?U-GlcNS,6S/ ?U,2S-GlcNS and ?U-GlcNS) and N-acetylated disaccharides (?U, GlcNAc). This heparinoid had a lower hemorrhagic effect (400?g/ml) when compared to unfractiionated heparins(25?g/ml).The results also suggest a negligible APTT activity of this heparinoid (62.2s). No action was observed on PT indicating that F-3.0M haven t action on the extrinsic pathway. The results showed that the fraction F- 3.0M have inhibitory effect on migration of leukocytes, 64.5% in the concentration of 10 ?g/ml (P<0.001). The search for new heparin and/or heparan sulphates analogs devoid of anticoagulant activity is an atractive alternative and may open up a wide variety of new therapeutic applications / Heparam sulfato (HS) e Heparina (Hep) s?o glicosaminoglicanos (GAGs), heterog?neos e altamente poliani?nicos. HS ? estruturalmente relacionado a heparina, mas cont?m uma quantidade menor de grupos sulfatados que a Hep. Devido ?s similaridades estruturais entre estes dois pol?meros, eles t?m sido denominados conjuntamente de heparin?ides. Ambas as cadeias ligam-se a uma variedade de prote?nas mediadas por v?rios processos fisiol?gicos importantes, incluindo a coagula??o sangu?nea, ades?o celular e regula??o dos fatores de crescimento. O presente estudo descreve a presen?a de uma popula??o de heparin?ides (F-3.0M) diferenciados presentes em Artemia franciscana os quais foram isolados por prote?lise e fracionados por cromatografia de troca i?nica com variadas concentra??es de NaCl. Neste trabalho, utilizamos modelos in vivo para avaliar a homeostasia e a atividade anti-inflamat?ria destes heparinoides. A hemostasia foi avaliada por modelo de escarifica??o em caudas de ratos Wistar enquanto que o processo inflamat?rio foi observado atrav?s de peritonite induzida por tioglicolato de s?dio a 3%. Os heparin?ides eluidos com 3,0M de NaCl mostraram por eletroforese em diversos tamp?es uma ?nica banda com comportamento intermedi?rio entre a Hep de mam?fero e HS. O principal produto obtido da fra??o F-3.0M de Artemia franciscana ap?s a degrada??o enzim?tica com heparitinases I e II de Flavo bacterium Heparinum foram dissacar?deos N-sulfatados (?U-GlcNS,6S/ ?U,2S-GlcNS e ?U-GlcNS) e dissacar?deos N-acetilados (?U, GlcNAc). Estes heparin?ides apresentaram uma baixa atividade hemorr?gica somente na concentra??o de 400?g/ml, ? similar a heparina na concentra??o de 25?g/ml. Os resultados sugerem ainda, que esta fra??o tem baixa a??o anticoagulante APTT (62,2s); n?o apresentando a??o sobre PT, indicando que n?o tem a??o sobre a via extr?nseca da cascata. Os testes de atividade anti-inflamat?ria, desta fra??o tem efeito inibit?rio sobre a migra??o dos leuc?citos da ordem de 64,5% na concentra??o de 10 ?g/ml (P<0.001)Heparam sulfato (HS) e Heparina (Hep) s?o glicosaminoglicanos (GAGs), heterog?neos e altamente poliani?nicos. HS ? estruturalmente relacionado a heparina, mas cont?m uma quantidade menor de grupos sulfatados que a Hep. Devido ?s similaridades estruturais entre estes dois pol?meros, eles t?m sido denominados conjuntamente de heparin?ides. Ambas as cadeias ligam-se a uma variedade de prote?nas mediadas por v?rios processos fisiol?gicos importantes, incluindo a coagula??o sangu?nea, ades?o celular e regula??o dos fatores de crescimento. O presente estudo descreve a presen?a de uma popula??o de heparin?ides (F-3.0M) diferenciados presentes em Artemia franciscana os quais foram isolados por prote?lise e fracionados por cromatografia de troca i?nica com variadas concentra??es de NaCl. Neste trabalho, utilizamos modelos in vivo para avaliar a homeostasia e a atividade anti-inflamat?ria destes heparinoides. A hemostasia foi avaliada por modelo de escarifica??o em caudas de ratos Wistar enquanto que o processo inflamat?rio foi observado atrav?s de peritonite induzida por tioglicolato de s?dio a 3%. Os heparin?ides eluidos com 3,0M de NaCl mostraram por eletroforese em diversos tamp?es uma ?nica banda com comportamento intermedi?rio entre a Hep de mam?fero e HS. O principal produto obtido da fra??o F-3.0M de Artemia franciscana ap?s a degrada??o enzim?tica com heparitinases I e II de Flavo bacterium Heparinum foram dissacar?deos N-sulfatados (?U-GlcNS,6S/ ?U,2S-GlcNS e ?U-GlcNS) e dissacar?deos N-acetilados (?U, GlcNAc). Estes heparin?ides apresentaram uma baixa atividade hemorr?gica somente na concentra??o de 400?g/ml, ? similar a heparina na concentra??o de 25?g/ml. Os resultados sugerem ainda, que esta fra??o tem baixa a??o anticoagulante APTT (62,2s); n?o apresentando a??o sobre PT, indicando que n?o tem a??o sobre a via extr?nseca da cascata. Os testes de atividade anti-inflamat?ria, desta fra??o tem efeito inibit?rio sobre a migra??o dos leuc?citos da ordem de 64,5% na concentra??o de 10 ?g/ml (P<0.001)
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufrn.br:123456789/12549 |
| Date | 05 November 2004 |
| Creators | Moura, Celton Pereira de |
| Contributors | CPF:33615217420, http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4786250T8, Abreu, Luiz Roberto Diz de, CPF:27785858500, http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4723470U6, Silva, Maria da Paz Carvalho da, CPF:17264782468, http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4781416A2, Leite, Edda Lisboa, Chavante, Suely Ferreira |
| Publisher | Universidade Federal do Rio Grande do Norte, Programa de P?s-Gradua??o em Bioqu?mica, UFRN, BR, Bioqu?mica; Biologia Molecular |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFRN, instname:Universidade Federal do Rio Grande do Norte, instacron:UFRN |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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