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Previous issue date: 2010-08-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Candida species are part of the commensal microbiota of the oral cavity of most
healthy individuals. The emergence of new species of Candida and the selection of
lines tolerant to conventional antifungal agents stimulates the development of new
therapies for the treatment of infections caused by species of Candida. In this context
stands the photodynamic therapy (PDT) which is capable of killing fungal cells by
administration of a photosensitizing substance followed by the application of light in
the visible wavelength. This study evaluated, in vitro, the efficacy of PDT in
photoinactivation of Candida species (C. albicans, C. krusei, C. tropicalis and C.
guilhermondii) using the photosensitizing agent methylene blue (150μg/ml) and
irradiation with a diode laser operating in the visible red (ʎ660nm, 40mW). Initially,
the tested microorganisms were inoculated in test tubes containing liquid culture
medium and incubated overnight at 37°C. Then cell s uspensions were obtained
containing 106 cfu / ml. These suspensions were transferred to 96-holes plates and
exposed to 03 doses of laser light (Group 1- 60J/cm2 (2,4J), Group 2- 120J/cm2
(4,8J), Group 3-180J/cm2 (7,2J)). Additional suspensions were treated with only the
photosensitizer, with only the laser light or with 0.85% saline (control group). Each
experimental condition was performed twice. After the treatments, 1μl aliquots of the
suspensions were plated on Sabouraud Dextrose Agar. The plates were incubated at
37°C for 24-48h and after this period there was the counting of colonies (cfu / ml).
The three doses evaluated determined significant inactivation of Candida spp. (P
<0.05). The 180J/cm2 dose was the most effective, inactivating 78% of cfu/ml
followed by doses of 120J/ cm2 and 60J/cm2 with inactivation average of 62% and
42% respectively. A statistically significant difference between the rates of
inactivation of C. albicans, C.krusei, C. tropicalis and C. guilhermomdii at doses of 60
J/cm2 and 120 J/cm2 (p> 0.05) was not verified. However, at a dose of 180 J/cm2 C.
albicans was the most susceptible species to the effects of PDT. We conclude that
photodynamic therapy (PDT) has demonstrated effectiveness in the inactivation of
Candida spp. / As espécies de Candida fazem parte da microbiota comensal da cavidade bucal da
maioria dos indivíduos saudáveis.. A emergência de novas espécies de Candida e a
seleção de linhagens tolerantes aos antifúngicos convencionais estimula o
desenvolvimento de novas modalidades terapêuticas para o tratamento das
infecções causadas por espécies de Candida.Nesse contexto destaca-se a terapia
fotodinâmica (TFD) que é capaz de eliminar células fúngicas através da
administração de uma substância fotosensibilizadora seguido da aplicação de luz em
comprimento de onda visível e compatível. Este estudo avaliou, in vitro, a eficácia da
TFD na fotoinativação de espécies do gênero Candida (C. albicans, C. krusei, C.
tropicalis e C. guilhermondii) por meio do agente fotossensibilizador azul de metileno
(150μg/ml) e da irradiação com um Diodo Laser (660nm, 40mW)). Inicialmente os
microrganismos avaliados foram inoculados em tubos de ensaio contendo meio de
cultura líquido e incubados overnight a 37°C. Em seguida foram obtidas suspensões
celulares contendo 106 ufc/ml, as quais foram transferidas para placas de 96 orifícios
e expostas a 03 doses de luz Laser (Grupo1- 60J/cm2 (2,4J), Grupo2- 120J/cm2
(4,8J), Grupo 3-180J/cm2 (7,2J). Suspensões adicionais foram tratadas apenas com
o fotossensibilizador, apenas com a luz Laser ou com solução salina 0,85% (grupos
controle). Cada condição experimental foi realizada 2 vezes. Após a aplicação dos
tratamentos, alíquotas de 1μl das suspensões foram plaqueadas em Agar
Sabouraud Dextrose. As placas foram incubadas a 37°C por 24-48h e após esse
período foi realizada a contagem das colônias (ufc/ml). As três doses avaliadas
determinaram inativação significativa de Candida spp. (p<0,05). A dose de 180J/cm2
foi a mais eficaz, inativando 78% das ufc seguida pelas doses de 120J/ cm2 e
60J/cm2 com inativação média de 62% e 42% respectivamente. Não foi verificada
diferença estatística significativa entre as taxas de inativação de C.albicans,
C.krusei, C. tropicalis e C. guilhermomdii nas doses de 60 J/cm2 e 120 J/cm2 (p>
0,05). No entanto, na dose de 180 J/cm2 C. albicans foi a espécie mais susceptível
aos efeitos da TFD. Conclui-se que a terapia fotodinâmica (PDT) demonstrou
efetividade na inativação de Candida spp.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:tede.biblioteca.ufpb.br:tede/6687 |
| Date | 19 August 2010 |
| Creators | Queiroga, Andréa Sarmento |
| Contributors | Limeira Júnior, Francisco de Assis, Lima, Edeltrudes de Oliveira |
| Publisher | Universidade Federal da Paraíba, Programa de Pós Graduação em Odontologia, UFPB, BR, Odontologia |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFPB, instname:Universidade Federal da Paraíba, instacron:UFPB |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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