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Previous issue date: 2014-07-28 / CAPES; FACEPE; CNPq / Infecções pelo papilomavírus humano (HPV) de alto risco, principalmente o HPV16,
podem levar ao desenvolvimento de tumores, como o de câncer cervical. O diagnóstico
rápido e preciso associado a uma baixo custo operacional das lesões pré-cancerígenas
por HPV é extremamente importante para o sucesso do tratamento. Os tradicionais
testes para o diagnóstico desse vírus não preenchem todos os requisitos necessários para
um diagnóstico bem sucedido. Dispositivos analíticos, como os biossensores, podem
detectar agentes infecciosos de uma maneira mais simples e barata, em comparação com
os testes convencionais. Estas características tornam os biossensors uma alternativa
promissora para o diagnóstico precoce do HPV. O objetivo do presente trabalho foi o
desenvolvimento de genossensores (biossensores de DNA) para o diagnóstico do HPV.
O primeiro biossensor foi composto de dois eletrodos, um eletrodo de trabalho (ET)
feito de lápis grafite e um eletrodo de referência (ER) feito de Ag/AgCl. O outro
modelo de biossensor foi formado por três eletrodos impressos: ET constituído de ouro;
ER constituído de Ag/AgCl; e EA (eletrodo auxiliar) constituído de carbono. Nos dois
biossensores propostos, um sonda de DNA específica para o gene E6 do HPV16 foi
imobilizada sob o eletrodo de trabalho por adsorção e, em seguida, uma sequência alvo
foi hibridizada com a sonda imobilizada. No primeiro biossensor, o alvo foi o gene E6
do HPV16 colonado no plasmíedo PGEM-T. Já no segundo biossensor, os alvos foram
os oligonucleotídicos sintéticos e o DNA extraído (DE) de amostras de pacientes. Os
sinais redox da hibridização, nos dois biossensores, foram analisados pela técnica de
voltametria de pulso diferencial. Os resultados mostraram que os biossensores puderam
diferenciar a hibridização da não-hibridização. Os dois biossensores propostos
apresentaram elevada sensibilidade cujos limites de detecção foram para o primeiro
biossensor de 16 pg/μL (7 nM) e o segundo biossensor de 18,13 nM. Além disso, ao
contrário dos testes padrão, os dois genossensores foram capazes de detectar a presença
do DNA viral sem a necessidade de amplificação do material genético. Isso os tornam
mais rápidos e baratos em comparação aos testes convencionais. Os dados obtidos com
os biossensores mostraram viabilidade para o diagnóstico de vários tipos de HPVs,
permitindo com isso o desenvolvimento de um sistema pioneiro para detecção portátil
desse vírus.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/11899 |
| Date | 28 July 2014 |
| Creators | Ferreira, Danielly Santos Campos |
| Contributors | Lima Filho, José Luiz de |
| Publisher | Universidade Federal de Pernambuco |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Breton |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
| Rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
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