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Atividade antioxidante, antigenotóxica e antimutagênica de extratos de folhas de vitis labrusca (variedade Isabel) orgânica e convencional em células de mamífero v79

A produção de uva possui um papel importante na história e na economia mundial.
Atualmente os vinhedos podem ser encontrados em dois sistemas distintos de cultivos, o
orgânico, onde utilização de pesticidas, fertilizantes e recursos de engenharia genética são
proibidos, e o convencional que podem receber tratamento com diferentes produtos químicos.
A cada safra de uva é produzida uma grande quantidade de folhas de videira, as quais são
principalmente descartadas no meio ambiente ou em alguns países utilizadas na preparação de
bebidas, alimentos e na medicina popular. Assim sendo, o objetivo do presente trabalho foi
avaliar a atividade antioxidante, antigenotóxica e antimutagênica de extratos aquosos de
folhas de Vitis labrusca variedade Isabel. Os polifenóis, o conteúdo de ácido ascórbico e os
compostos majoritários foram determinados. Nos ensaios com linhagem celular, as células
V79 foram tratadas durante 3 horas com os extratos das folhas e, em seguida, expostos
durante uma hora com o agente oxidante peróxido de hidrogênio ou o agente mutagênio Metil
metano sulfonado (MMS). Após, a viabilidade celular foi determinada pelo ensaio de redução
MTT e sobrevivência clonogênica. O nível de peroxidação lipídica e presença de grupos
carbonil das proteinas foram também verificados. O efeito antigenotóxico dos extratos foi
analisado pelo ensaio cometa alcalino e com a utilização das enzimas endonuclease III
(ENDO III) e fosfatidil-pirimidina de DNA glicosilase (FPG), enzimas que reconhecem os
danos oxidativos à purinas e pirimidinas. A atividade antimutagênica dos extratos foi avaliada
pelo ensaio de micronúcleos, através de MMS, um composto reconhecidamente mutagênico.
Para a determinação da atividade antioxidante in vitro, a capacidade de varredura do radical
livre DPPH· e a capacidade dos extractos para mimetizar a atividade das enzimas Superóxido
dismutase (SOD) e catalase (CAT) foram avaliados. O extrato orgânico apresentou quantidade
superior de polifenóis, ácido ascórbico e também de quercetina-3-glucósido e rutina que o
extrato convencional. No entanto, nos ensaios de viabilidade celular, ambos os extratos,
orgânico convencional e preveniram a morte celular de maneira semelhante. Em se tratando
de atividade antigenotóxica e antimutagênica e atividade antioxidante in vitro, o extrato
orgânico apresentou efeitos mais pronunciados. É possível que os polifenóis e também o
ácido ascórbico presente nos extratos sejam responsáveis pelos resultados encontrados nesse
trabalho. Embora outros estudos sejam necessários, os dados obtidos nesse trabalho mostram
que os extratos aquosos de videiras da variedade Isabel, orgânico e convencional, tem
importante atividade antigenotóxica antimutagênica e antioxidante e podem estar relacionados
com a diminuição na incidência de diferentes patologias. / Submitted by Marcelo Teixeira (mvteixeira@ucs.br) on 2014-06-12T12:54:15Z
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Dissertacao Giovana Vera Bortolini.pdf: 2254846 bytes, checksum: a57ea9d9c74a54282a3c60874efea349 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The grape production plays an important role in world’s economy and history. Currently,
vineyards can be found in organic management, which use of pesticides, fertilizers and
genetic engineering resources are prohibited, and conventional vineyards, which can be
treated with different chemicals. On each harvest is produced a large amount of vine leaves,
which are mainly disposed in the environment or in some countries, used in folk medicine and
as food and beverage. Therefore, the objective of this study was to evaluate the antioxidant
antigenotoxic and antimutagenic activities of aqueous extracts of Vitis labrusca leaves cv.
Isabella variety. The polyphenols and ascorbic acid content and the major compounds were
determined. The cell line V79 was treated for 3 hours with the leaves extracts and then
exposed for one hour to the oxidiative agent hydrogen peroxide or MMS mutagen. After that,
the cell viability was analysed by MTT reduction and clonogenic survival assays, the lipid
peroxidation level and protein carbonyl formation were also observed. The antigenotoxic
effect of the extracts was analyzed by the alkaline comet assay and using enzyme
endonuclease III (ENDO III) and phosphatidyl pyrimidine DNA glycosylase (FPG), enzymes
that recognize damage to purines and pyrimidines. The antimutagenic activity of the extracts
was evaluated by micronucleus assay, using MMS, a known mutagenic compound. For the
determination of in vitro antioxidant activity the scavenging activity of the DPPH● was
verified, and the ability of extracts to mimic the enzymes SOD and CAT. The organic extract
present highest polyphenol, ascorbic acid content and also quercetin-3-glucoside and rutin.
However, treatment with organic and conventional extract prevented cell death, lipid
peroxidation and protein carbonyl the same manner. Moreover, the organic extract showed a
better antimutagenic and antigenotoxic activity than conventional extract. Although it was
observed that both extracts have in vitro antioxidant activity, and the organic extract showed
better ability to scavenging DPPH●, and greater SOD and CAT-like activity than the
conventional. It is possible that the polyphenols and ascorbic acid present in extracts are
responsible for the results found in this work. Although other studies are necessary, the data
obtained in this work shows that the aqueous extracts of grapevines leaves, cv. Isabella, both
organic and conventional management, have important antigenotoxic, antimutagenic and
antioxidant activity and can minimize the damage associated with different pathologies.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:vkali40.ucs.br:11338/670
Date03 September 2012
CreatorsBortolini, Giovana Vera
ContributorsPrá, Daniel, Moura, Dinara Jaqueline, Delamare, Ana Paula Longaray, Henriques, João Antonio Pêgas, Salvador, Mirian
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguageEnglish
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Sourcereponame:Repositório Institucional da UCS, instname:Universidade de Caxias do Sul, instacron:UCS
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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