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Previous issue date: 2015-07-23 / For a long time, Pasterella multocida has been considered only
as a secondary agent in pneumonias in swine. However, studies
developed in Brazil identified different isolates of P. multocida
able to operate as primary disease agent in swine. The
objective of his project was to study protection aspects of a
vaccine with pathogenic samples of P. multocida in
experimental model with high sanity status pigs. In addition,
it aims to describe the expression of immune response in swine
induced by P. multocida infection, and determinate the
prevalence of P. multocida in tonsils of vaccinated and not
vaccinated pigs through immunohistochemistry. The study was
divided into three experiments: Immunization of mice with
vaccines prepared with different adjuvants , Test of two
adjuvants used in vaccine with a P. multocida homologous
strain in swine and Experimental challenge in swine with a
P. multocida heterologous strain to the vaccine . Four
adjuvants were tested in mice: Al(OH)3, ISA 206, Montanide
GEL 01 and ISA 760. Two of them were selected for testing in
swine: Al(OH)3 which showed better results in mice-, and
ISA 760 for being an oily adjuvant. At the second
experiment, although two vaccines have been effective in the
disease protection, the one with the adjuvant Al(OH)3 was
selected, because showed lower vaccine reaction. Eighteen pigs
were distributed into three groups for the specific test of the
vaccine for pathogenic samples of P. multocida. Group 1 (G1)
vaccine with Al(OH)3; group 2 (G2) infection control; and
group 3 (G3) negative control. After the experiment, the
animals were euthanized, and samples were collected in ice -
for microbiological cultivation and relative quantification of
cytokines gene expression (IL1 β, IL2, TNFα) and TLR4 , and
in formaldehyde, for routine histopathology and
immunohistochemistry. Results showed that the vaccine
prototype with adjuvant Al(OH)3 was efficient in controlling
pulmonary pasteurellosis. The immune response was mediated
by TLR4, with increased expression of TNFα. IL-1β and IL2
were also expressed, however, there was no significant
difference between the groups. The immunostaining of P.
multocida in tonsil was positive in all pigs challenged with the
bacteria / Por muito tempo, Pasteurella multocida foi considerada apenas
como agente secundário nas pneumonias em suínos, todavia,
estudos realizados no Brasil identificaram diferentes isolados
de P. multocida capazes de atuar como agente primário de
doença em suínos. Esse projeto teve como objetivo estudar
aspectos de proteção de uma vacina com amostras patogênicas
da P. multocida em modelo experimental com suínos de alto
status sanitário . E de forma paralela descrever expressão da
resposta imune dos suínos induzida pela infecção da P.
multocida e determinar a prevalência dessa bactéria em tonsilas
de suínos vacinados e não vacinados através de
imunohistoquímica. O trabalho foi dividido em três
experimentos: Imunização de camundongos com vacinas
preparadas com diferentes adjuvantes ; Teste de dois
adjuvantes utilizados na vacinação de suínos frente ao desafio
com uma cepa homóloga de P. multocida ; e Desafio
experimental em suínos com uma cepa de P. multocida
heteróloga à da vacina . Em camundongo foram testados
quatro adjuvantes: Al(OH)3, ISA 206, Montanide GEL 01 e
ISA 760, dos quais, foram selecionados dois para teste em
suínos: Al(OH)3, que apresentou melhor resultado nos
camundongos e ISA 760, por ser um adjuvante oleoso. Embora
as duas vacinas tenham sido efetivas na proteção da doença, no
segundo experimento, selecionou-se àquela com adjuvante
Al(OH)3, que apresentou menor reação vacinal. No terceiro
experimento realizado em suínos, foram utilizados 18 suínos
em três grupos: grupo 1 (G1) - vacina com Al(OH)3, e grupo 2
(G2) controle de infeção e grupo 3 (G3) controle negativo.
Após o experimento os animais foram eutanasiados para
avaliação patológica, coleta de amostras em gelo para cultivo
microbiológico e quantificação relativa da expressão gênica
das citocinas (IL1 β, IL2, TNFα) e TLR4, para histopatologia
de rotina e imunohistoquimica. Os resultados demostraram que
o protótipo de vacina com adjuvante Al(OH)3 foi eficiente no
controle de pasteurelose pulmonar. O perfil da expressão da
resposta imune foi mediado por TLR4, com aumento da
expressão de TNFα. Também foram expressos IL-1β e IL2,
porém sem diferença significativa entre os grupos. A
imunomarcação de P. multocida na tonsila foi positiva em
todos os suínos desafiados com a bactéria, independente de
serem ou não vacinados
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:tede.udesc.br #179.97.105.11:handle/945 |
| Date | 23 July 2015 |
| Creators | Lazaroto, Juliana |
| Contributors | Traverso, Sandra Davi |
| Publisher | Universidade do Estado de Santa Catarina, Mestrado em Ciência Animal, UDESC, BR, Ciências Veterinárias |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UDESC, instname:Universidade do Estado de Santa Catarina, instacron:UDESC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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