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Previous issue date: 2005-04-08 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Berberine is an alkaloid used as a fluorochrome in the identification of heparin and DNA. Enerback, 1974, described the technique used until today to study granules rich in heparin of vertebrate mast cells. Santos et al., 2003, studied mast cells of the mollusk Anomalocardia brasiliana using biochemical and histological analysis. This work used the fluorescent dye berberine technique to improve characterization of these cells. Mollusk organs (ctenidium and mantle) were processed with routine histological techniques. Tissue sections were treated with berberine 0,02% in redistilled water acidified to pH 4, by the addition of citric acid for 20 minutes. The visualization was made through fluorescence microscopy with ultraviolet region emission. The mast cell fluorescence had a strong yellow color, where cell nuclei appeared more greenish. This result was very similar to the ones reported before. Mast cells are location at the epithelium surface is the same in both organs, mantle and ctenidium. The fluorescence was easily observed in the granules. Therefore, this technique showed to be good and sensitive to study mast cell of invertebrates / A berberina ? um alcal?ide usado como fluorcromo na identifica??o de heparina e DNA. Enerb?ck, em 1974, descreveu a t?cnica at? hoje empregada deste fluorcromo no estudo dos gr?nulos ricos em heparina dos mast?citos de vertebrados. Santos et al., em trabalhos anteriores, utilizando abordagens bioqu?mica e histol?gica, descreveram a presen?a de mast?citos no marisco Anomalocardia brasiliana. Baseado nestes estudos, testamos a t?cnica de fluoresc?ncia com berberina para a caracteriza??o adicional dessas c?lulas. Destarte, mantos e cten?deos dos esp?cimes foram submetidos a t?cnicas rotineiras de fixa??o e inclus?o em parafina. Os cortes histol?gicos foram desparafinados, hidratados e incubados com cloridrato de berberina (0,02%) em ?cido c?trico (1%) por 20 minutos, sendo o excesso retirado com ?cido c?trico (pH 4) por 5 minutos. A visualiza??o das se??es foi feita por microscopia de fluoresc?ncia com emiss?o no espectro ultravioleta. Pudemos evidenciar c?lulas com conte?do citoplasm?tico fluorescente amarelo-brilhante, correspondentes ?quelas descritas anteriormente como mast?citos, localizadas nos epit?lios dos ?rg?os. Algumas esp?cimes, logo ap?s a disseca??o foram submetidas a tratamento com desgranulantes e depois processadas como citado acima. O uso da fluoresc?ncia tornou mais f?cil a delimita??o do conte?do granular destas c?lulas em rela??o ao n?cleo (que emite fluoresc?ncia esverdeada). Sendo assim, a t?cnica apresentada mostrou ser bastante sens?vel e promissora para o estudo dos mast?citos de invertebrados
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufrn.br:123456789/12550 |
| Date | 08 April 2005 |
| Creators | Cortez, Janice da Silva |
| Contributors | CPF:41305655400, http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4782221T9&dataRevisao=null, Santos, Elizeu Antunes dos |
| Publisher | Universidade Federal do Rio Grande do Norte, Programa de P?s-Gradua??o em Bioqu?mica, UFRN, BR, Bioqu?mica; Biologia Molecular |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFRN, instname:Universidade Federal do Rio Grande do Norte, instacron:UFRN |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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