Les lésions carieuses ou les traumatismes physiques profonds aboutissent souvent à une destruction des fibroblastes pulpaires (FP) et des odontoblastes, et provoquent l’activation du Complément. Le rôle du Complément dans la régénération pulpo-dentinaire a été montré avec le fragment C5a, connu pour induire la migration des cellules souches pulpaires (CS). Nous avons montré que le C3a participe à la régénération pulpo-dentinaire. Après un tri cellulaire, nous avons montré l’expression du C3aR sur les CS et les FP en culture, et aussi sur coupes de dents humaines. De plus, les deux types cellulaires prolifèrent en présence de concentrations croissantes de C3a. La migration cellulaire a été évaluée dans des chambres de migration microfluidiques. Les CS sont mobilisées, tandis que les FP sont spécifiquement recrutés par un gradient de C3a. Les complexes d’attaque membranaire (CAM) produits par les FP a été montrée. Nous avons démontré que les FP peuvent détruire les bactéries cariogènes S. mutans et S. sanguis. Les FP ont été incubés avec un milieu contenant du LTA pour simuler une infection bactérienne in vitro. Nous avons montré que les bactéries cariogènes étaient très sensibles aux surnageants des FP stimulés, soulignant un effet létal des CAM. Des co-cultures de fibroblastes pulpaires et de bactéries ont révélé la présence des CAM sur les bactéries. Ces résultats soulignent des rôles inattendus du Complément pendant les étapes précoces de la régénération pulpo-dentinaire et de la défense pulpaire. Ce travail suggère de nouvelles stratégies thérapeutiques, où des molécules du Complément pourront être délivrées localement pour favoriser la régénération pulpo-dentinaire / Deep pulp physical injuries or carious lesions often lead to fibroblast cell injury and destruction of the dentin-secreting odontoblasts, and lead to the Complement activation. Its involvement in dentin-pulp regeneration has been shown with C5a fragment, known to induce specific recruitment of DPSC. We show that C3a, is also involved in dentin-pulp regeneration. After cell sorting, we highlighted C3a Receptor expression on pulp fibroblasts and STRO-1-sorted DSPC as well as on human tooth sections in vivo. The effect of C3a on proliferation of DPSCs and pulp fibroblasts was shown with an increased proliferation for both cell types. Cell migration was evaluated using microfluidic chemotaxis chambers. We showed that DPSCs were mobilized but not specifically recruited, while pulp fibroblasts were specifically recruited following a C3a gradient. We demonstrated that pulp fibroblasts can synthesize functional membrane attack complex (MAC) and kill cariogenic bacteria S. mutans and S. sanguinis. To simulate bacterial infection in vitro, pulp fibroblasts were incubated with lipoteichoïc acid (LTA). Agar well diffusion assay showed that bacteria exposed to LTA-conditioned media were highly sensitive, showing lethal effect of MAC. Coculture of pulp fibroblasts and bacteria showed that MAC synthesized by pulp fibroblasts can be directly fixed on cariogenic bacteria, after direct contact with fibroblasts. These results underline unexpected roles of Complement system activation in early events of dentin-pulp regeneration and pulp defense. Our findings suggest new therapeutic strategies, where new agents can deliver specific Complement molecules to enhance dentin-pulp regeneration.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:theses.fr/2016AIXM4108 |
| Date | 16 December 2016 |
| Creators | Rufas, Pierre |
| Contributors | Aix-Marseille, About, Imad |
| Source Sets | Dépôt national des thèses électroniques françaises |
| Language | French |
| Detected Language | French |
| Type | Electronic Thesis or Dissertation, Text |
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