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Extração, purificação e estudo cinetico de fumarase de coração de bovino

Orientador : Ladaslav Sodek / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-03T12:31:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1974 / Resumo: A extração e purificação de fumarase de coração de "bovino foi feita pelo método de MASSEY, com modificação, -que consistiu no uso de gel de fosfato de cálcio em coluna cromatográfica para purificar o enzima. Este processo permitiu purificar o enzima 18 vezes em relação à fase anterior,ao invés de 3,1 vezes como o obtido por MASSEY. 0 número total de purificação foi da ordem de 116 vezes em relação ao extrato cru. A atividade enzímica foi medida espectrofotometricamente, a 300 nm. Com o enzima purificado foi desenvolvido estudo -cinético que permitiu determinar: Que as constantes de Michaelis (determinadas pelo processo gráfico de Lineweaver-Burk) foram iguais a 2,0 mM para fumarato e 6,7mM para L-malato, utilizados numa faixa de concentração que variou de 2 x 10" M a 1 x 10 M e de 2 x 10 M a 2 x 10 -TI, respectivamente; que a velocidade inicial da reação aumentou -proporcionalmente à concentração do enzima e à temperatura a 40°C; que o pH ótimo para a reação foi igual a 7"0;que citrato de sódio 0,05M agiu como inibidor competitivo da fumarase. Foram determinadas as constantes de dissociação para ambos os substratos, fumarato (Ki = 12,5mm)e L-malato (Ki = 18,3mM), utilizados numa faixa de concentração que variou de 2 x 10"2M a 1 x 10~5M e de 2 x 10"2M a 2 x 10 ^M, respectivamente;que energia de ativação (A) foi igual a -8006,25 cal/mol, determinada pela equação de Arrenhius; que a constante de equilíbrio da reação determinada a 25°C foi igual a 4,07;que a energia livre padrão( /\ F° ) foi igual a -830,96 cal/mol que a entalpia C (/\ H°) foi igual a -2196 cal/mol / Abstract: Not informed / Doutorado / Bioquimica

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.unicamp.br:REPOSIP/289522
Date03 August 2018
CreatorsBarrichello, Tereza de Lourdes Scarpari, 1942-
ContributorsUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS, Sodek, Ladaslav, 1941-, Ciencias, Doutor em
Publisher[s.n.], Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Odontologia de Piracicaba, Programa de Pós-Graduação em Ciências
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
Format81f. : il., application/pdf
Sourcereponame:Repositório Institucional da Unicamp, instname:Universidade Estadual de Campinas, instacron:UNICAMP
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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