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bozeto_jms_me_arafcf.pdf: 1574959 bytes, checksum: a5cd125f8746a8789bce9eca1cc045e6 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Atualmente, o câncer cervical é considerado a segunda causa mais comum entre as mulheres e encontra-se associado ao Papilomavírus Humano (HPV), que infecta células epiteliais escamosas, dando origem a grandes lesões. A nitensidina A é um alcalóide guanidínico isolado de Pterogyne nitens Tul. (Fabaceae), que possui atividade anti-inflamatória e anti-oxidante, além de um amplo aspecto de atividades biológicas que está sendo estudado. Foi testada nas concentrações de 20,0 a 0,25 µg/mL (diluição seriada 1:3) e nos tempos de 24 h e 48 h nas linhagens imortalizadas com HPV-16 (SiHa) e não imortalizadas (C33A). Para avaliar a citotoxicidade da nitensidina A o teste MTT foi realizado sendo possível observar um efeito concentração-resposta em duas linhagens testadas (SiHa e C33A, CI50 = 10,31 µg/mL e 11,91 µg/mL, respectivamente) por 24 h. Com o intuito de avaliar o potencial efeito indutor de apoptose, foi realizado o ensaio de anexina V por citometria de fluxo. Em ambas as linhagens e tempos de tratamento notaram-se uma morte mais relevante por apoptose precoce, sendo que há diferença apenas na maior concentração (20,0 g/mL) na linhagem SiHa, que também induz morte por apoptose tardia/necrose. Para completar esse ensaio foi realizado o teste do Hoechst-iodeto de Propídeo, diferenciando assim apoptose precoce, tardia e necrose. Na linhagem SiHa tratada por 24 h nas menores concentrações houve morte celular por apoptose precoce, e na maior concentração por apoptose tardia (81,4±1,4 %). Por 48 h, em todas as concentrações a morte celular foi por apoptose tardia. Na linhagem C33A em 24 h não foi observado morte celular significativa. Em 48 h, a maior concentração induziu apoptose tardia (57,7±20,6 %). O modelo de estudo de implante tumoral xenográfico de células SiHa... / Currently, cervical cancer has been considered the second most common among women and is associated with human papillomavirus (HPV) which infects squamous epithelial cells, resulting in major injuries. Nitensidine A is a guanidine alkaloid isolated from Pterogyne nitens Tul. (Fabaceae), which has anti-inflammatory and antioxidant, as well as a broad spectrum of biological activities being studied. It was tested at concentrations from 20.0 to 0.25 mg/mL (serial dilution 1:3) and for 24 h and 48 h in immortalized with HPV-16 (SiHa) and non-immortalized (C33A) cell lines. To evaluate the cytotoxicity of nitensidine A MTT test was performed and it was possible to observe a concentration-response effect in two tested lines (SiHa and C33A, IC50 = 10.31 mg/mL and 11.91 mg/mL, respectively) for 24 h. In order to assess the potential effect of inducing apoptosis, we performed the annexin V assay by flow cytometry. In both strains and treatment times were noted a death most significant by early apoptosis, and a difference only at highest concentration (20.0 mg/mL) in SiHa, which also induces death by late apoptosis / necrosis. To complete this test, it was performed the Hoechst-propidium iodide assay, thereby differentiating early, late apoptosis and necrosis. In SiHa treated for 24 h at lower concentrations there was cell death by early apoptosis, and late apoptosis at highest concentration (81.4 ± 1.4%). For 48 h at all concentrations cell death was by late apoptosis. In C33A at 24 h was not observed significant cell death. At 48 h, the highest concentration induced late apoptosis (57.7 ± 20.6 %). The study model of xenographic tumor implant of SiHa cells in nude mice BALB/c treated with nitensidine... (Complete abstract click electronic access below)
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.unesp.br:11449/89137 |
| Date | 25 November 2011 |
| Creators | Bozeto, Juliana Maria Sorbo [UNESP] |
| Contributors | Universidade Estadual Paulista (UNESP), Soares, Christiane Pienna [UNESP] |
| Publisher | Universidade Estadual Paulista (UNESP) |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | 121 f. : il., gráfs. |
| Source | Aleph, reponame:Repositório Institucional da UNESP, instname:Universidade Estadual Paulista, instacron:UNESP |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | -1, -1 |
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