Uma das populações de células imunológicas mais abundantes no útero durante a gestação é a das células Natural Killer uterinas (uNK) que, apesar de apresentarem grânulos citoplasmáticos ricos em perforina e granzimas, não apresentam atividade citotóxica durante uma gestação normal. As células uNK são importantes produtoras de fatores angiogênicos que promovem a dilatação e o remodelamento das artérias uterinas resultando no aumento do fluxo sanguíneo para a unidade feto-placentária em desenvolvimento. A administração sistêmica de Lipopolissacarídeo (LPS) de E. coli em camundongos pode desencadear a ativação de cicloxigenase-2 (COX-2) levando a um aumento nos níveis de prostaglandinas bem como um desbalanço das citocinas pró-inflamatórias e anti-inflamatórias no útero gestante alterando a atividade normal das células imunológicas refletindo em uma alteração na homeostase uterina. O presente trabalho teve como o objetivo avaliar se a administração do inibidor seletivo de COX-2 pode interferir nos efeitos do LPS no útero gestante, nos vasos sanguíneos deciduais, nas células uNK e na quantidade e qualidade da prole; contribuindo assim para a elucidação dos mecanismos da SRIS durante a gestação. A administração de LPS causou excessivo influxo de células uNK imaturas no útero gravídico, além de causar diminuição do número de células uNK maduras concomitante ao aumento de células uNK alteradas. Tais efeitos do LPS foram prevenidos pelo pré-tratamento com Nimesulida. A inibição da COX-2 também impediu a liberação de perforina por essas células bem como a diminuição da expressão de α-actina em vasos sanguíneos uterinos causados pelo LPS. O número de filhotes nascidos de mães tratadas com nimesulida+LPS no período mediano da gestação foi ainda menor do que o número de filhotes que nasceram das mães que receberam apenas LPS no mesmo dia de gestação. A injeção apenas de nimesulida não causou nenhum efeito na prole, levando-nos a acreditar que as alterações fisiológicas após a inflamação induzida por LPS são de fundamental importância para o restabelecimento da homeostase do útero, a fim de manter a gestação a termo.
Fator de crescimento placentário (PGF) é um fator de crescimento angiogênico pleiotrópico que se encontra elevado durante a gravidez. Embora os padrões normais e anormais de PGF plasmático materno já estejam descritos na literatura, o papel preciso do PGF na angiogênese útero-placentária são indefinidos. Muitas mulheres que expressam baixos níveis de PGF, sobretudo na metade da gravidez, apresentam progressão para síndromes hipertensivas como a pré-eclâmpsia. Esse tipo de complicação gestacional está relacionada com o aumento da incidência de doenças cardiovasculares (CV) pós-parto tanto para mães quanto para os filhos, entretanto, não se sabe se baixos níveis de PGF aumentam o risco de doenças CV. Para avaliar a hipótese de que a deficiência de PGF limita a adaptação CV durante o período gestacional tardio contribuindo para o aumento do risco de complicações cardiovasculares, foram analisadas a estrutura e função do sistema cardiovascular em camundongos C57BL/6 (Pgf^+/+) e Pgf^-/- no período gestacional. Além disso, estruturas vasculares cerebrais foram analisadas pela técnica de moldagem vascular por perfusão com polímero e os animais dos dois grupos experimentais foram submetidos a testes comportamentais. A avaliação hemodinâmica por radiotelemetria mostrou que as mães, no cruzamento Pgf^-/- x Pgf^-/-, tiveram um declínio maior e mais sustentado na pressão arterial média em meados de gravidez do que as mães do grupo controle, mas a recuperação após a implantação do transmissor era rara. A avaliação hemodinâmica por pletismografia de cauda mostrou que os animais Pgf^-/- apresentaram maior pressão arterial (PA) no início e final da gestação com um maior intervalo de queda da PA após o período da implantação do blastocisto. Menor débito cardíaco materno e volume sistólico foram observados após o meio da gestação dos animais knockout quando comparados com animais controle. Além disso, esses animais não apresentaram o aumento no peso do ventrículo esquerdo (VE) naturalmente observado em Pgf^+/+ no final da gestação. A expressão gênica de Nos3 e Nos2 no VE é maior nos animais Pgf^-/- durante o período mediano da gestação. Foram observadas anomalias estruturais glomerulares e hipertrofia renal em camundongos Pgf^-/- não gestantes, durante a gestação e pós-parto. Assim, a deficiência de PGF limita adaptações fisiológicas e estruturais do sistema CV e Renal durante a gestação de camundongos. Estes resultados podem ter paralelos na gravidez humana e se relacionam com o aumento do risco de complicações CV pós-parto, que são sequelas de gestações de pré-eclâmpsia. A técnica de moldagem vascular com polímero revelou que a estrutura vascular central do cérebro da prole Pgf^-/- é deficiente, e testes comportamentais mostraram que isso tem reflexo em déficit cognitivo. Assim, a deficiência gestacional PGF também prejudica a regulação da pressão arterial materna e desenvolvimento vascular em órgãos essenciais da progênie como o cérebro. / One of the most abundant immunologic cell types in early decidua is the uterine Natural Killer (uNK) cell that despite the presence of cytoplasmic granules rich in perforin and granzymes does not degranulate in normal pregnancy. UNK cells are important producers of angiogenic factors that permit normal dilation of uterine arteries to provide increased blood flow for the growing feto-placental unit. Gram-negative bacteria Lipopolysaccharide (LPS) administration can trigger cyclooxygenase-2 (COX-2) activation leading to an increase in prostaglandin level and an imbalance of pro-inflammatory and anti-inflammatory cytokines impairing the normal immune cells activity as well as uterine homeostasis. The present study aimed to evaluate if COX-2 inhibitor can alter the effect of LPS on the pregnant uterus, on blood vessels of the decidua, on uNK cells and on litter size; thus contributing to the elucidation of Systemic Inflammatory Syndrome mechanisms during pregnancy. The LPS administration caused excessive immature uNK cells influx in pregnant uterus as well as a decrease in mature uNK cells number concomitantly with altered uNK cells increasing. Such LPS effects could be prevented by the nimesulide pretreatment. The COX-2 inhibition has also prevented perforin releasing by these cells as well as the α-actin down-regulation in uterine blood vessels caused by LPS. The number of pups born from mothers treated with Nimesulide + LPS in mid-pregnancy was smaller than the number of pups born of mothers who received only LPS on the same gestation day. The injection of nimesulide itself showed no effect in the offspring, leading us to believe that the physiological changes after inflammation induced by LPS are of fundamental importance for the restoration of uterine homeostasis in order to maintain pregnancy to term. / Placental growth factor (PGF) is a pleiotropic angiogenic growth factor elevated during pregnancy. Although normal and abnormal patterns of maternal plasma PGF are well known, the precise roles of PGF in uteroplacental angiogenesis, blood pressure regulation, vasculogenesis, as well as cardiovascular (CV) and renal adaptation are undefined. Many women who express low levels of PGF over mid-pregnancy, progress to the acute, emergency, hypertensive syndrome of preeclampsia (PE). This kind of gestational complication elevate postpartum cardiovascular disease risks for both mothers and offspring. In many pre-eclamptic women, plasma placental growth factor concentrations are lower than normal, however, it is unknown if lower PGF elevates postpartum CV risk. We hypothesized that PGF deficiency limits maternal CV adaptations during mid-late pregnancy and contributes to postpartum maternal CV risk elevation. Cardiovascular function and structure were evaluated in Pgf^-/- and C57BL/6 (B6/Pgf^+/+) mice across pregnancy and postpartum. Furthermore, cerebral vascular structures were analyzed by polymer vascular casting technique and animals from both experimental groups were subjected to behavioral testing. Hemodynamic assessment by radiotelemetry showed Pgf^-/- x Pgf^-/- dams had a larger and more sustained mid-pregnancy decline in mean arterial pressure than controls but recovery post-transmitter implantation was rare. Hemodynamic assessment by tail cuff plethysmography showed that Pgf^-/- mice had higher blood pressure in early and late pregnancy with a longer interval of depressed systolic pressure after implantation. Lower maternal cardiac output and stroke volume were present after mid-gestation versus Pgf^+/+. Pgf^-/- left ventricular (LV) mass was less than in Pgf^+/+ and expected gestational increases in LV mass were observed only in Pgf^ +/+. Nos3 and Nos2 expression were elevated in midgestation Pgf^-/- LV. Structural anomalies were present in virgin Pgf^-/- glomeruli and renal hypertrophy was associated with gestation and postpartum. Thus, PGF deficiency limits physiological and structural adaptations of the mouse maternal CV and renal systems over late pregnancy. These results may have parallels in human pregnancy and relate to the postpartum gains in CV risk that are sequelae to pre-eclamptic gestations. Polymer vascular casting of offspring brains and behavioral testing revealed aberrant central vascular structure and major cognitive deficits in Pgf^-/-. Thus, gestational PGF deficiency additionally impairs regulation of maternal arterial pressure and vascular development in key organs of progeny such as the brain. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:10.254.254.39:tede/845 |
| Date | 30 July 2015 |
| Creators | ZAVAN, Bruno |
| Contributors | PAFFARO JUNIOR, Valdemar A., http://lattes.cnpq.br/4193402330362099, CROY, Barbara Anne, IONTA, Marisa, HOSHIDA, Mara Sandra, SONCINI, Roseli, ASSUNÇÃO, Márcia Cristina Bizinotto de |
| Publisher | Universidade Federal de Alfenas, Instituto de Ciências Biomédicas, Brasil, UNIFAL-MG, Programa Multicêntrico de Pós-Graduação em Ciências Fisiológicas |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UNIFAL, instname:Universidade Federal de Alfenas, instacron:UNIFAL |
| Rights | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
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