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Previous issue date: 2017-07-27 / O armazenamento celular e tecidual para uso em terapia regenerativa e
desenvolvimento de pesquisas, torna-se uma questão importante à medida que a
expectativa de vida aumenta. Este trabalho se propôs avaliar os efeitos de campos
magnéticos estáticos unidirecionais durante o processo de criopreservação inicial de
células e de tecido pulpar de dentes terceiros molares humanos hígidos. Foram
obtidas polpas dentárias (n=39) de terceiros molares extraídos, que foram divididas
para avaliação celular (n=3) de viabilidade e avaliação tecidual (n=36) para obtenção
de células do tecido pulpar. Para avaliação celular, células isoladas e expandidas,
compuseram os grupos: Grupo I: controle, células submetidas à criopreservação
inicial por método convencional; Grupo II: controle, células submetidas à
criopreservação inicial lenta; Grupo III: células submetidas à criopreservação inicial
lenta, associado a 150mT; Grupo IV: células submetidas à criopreservação inicial
lenta, associado a 290mT; Grupo V: células submetidas à criopreservação inicial
lenta, associado a 360mT. Durante a criopreservação as células foram suspensas
em meios de congelamento contento 0, 3 e 10% de DMSO (dimetilsulfóxido): GI-II
III-IV-V 0%, GI-II-III-IV-V 3% e GI-II-III-IV-V 10%. Para avaliação tecidual as
amostras criopreservadas inicialmente em método convencional, formaram os
grupos: Grupo I: polpas submetidas à criopreservação inicial sem campo magnético
(GI); Grupo II: polpas submetidas à criopreservação inicial associada a 150mT (GII);
Grupo III: polpas submetidas à criopreservação inicial associada a 290mT (GIII);
Grupo IV: polpas submetidas à criopreservação inicial associada a 360mT (GIV).
Amostras das avaliações celular e tecidual, após criopreservação inicial, foram
armazenadas em nitrogênio líquido por 7 dias. Após o processo de
descongelamento a viabilidade celular foi mensurada por trypan blue e a eficiência
de obtenção de células a partir da polpa criopreservada, por observação óptica
diária. Os resultados foram semelhantes para as taxas de viabilidade imediatamente
após descongelamento celular para GI-II-III-IV-V 0%, GI-II-III-IV-V 3% e GI-II-III-IV-V
10% (p>0.05). Enquanto a viabilidade após 96h de subcultivo celular, os valores de
GI-II-III-IV-V 0% foram inferiores aos de GI-II-III-IV-V 3% e GI-II-III-IV-V 10%
(p<0.05). As células de polpa dentária expostas ao campo magnético durante a
criopreservação tiveram um efeito positivo nas taxas de viabilidade após 96h de
subcultivo, quando o meio de congelamento foi de 0% DMSO (p<0.05). Foi possível
obter células da polpa dos quatro grupos da avaliação tecidual, sendo que o GIV
apresentou maior taxa de eficiência. Pode-se concluir que a intensidade do campo
magnético e a concentração de DMSO testados não influenciaram na taxa de
viabilidade mensurada por trypan blue, imediatamente após o descongelamento.
Entretanto, promoveu diferença estatística nos valores de GI-II-III-IV-V 0% após 96h
de subcultivo celular. A intensidade do campo magnético foi diretamente
proporcional à eficiência de obtenção de células a partir de polpa criopreservada. / Cell and tissue banking for use in regenerative therapy and research development
becomes an important issue as life expectancy increases. This work aimed to
evaluate the effects of unidirectional static magnetic fields during the initial
cryopreservation process of cells and pulp tissue of healthy human third molar teeth.
Dental pulps (n = 39) were obtained from third molars extracted, which were divided
for cellular evaluation (n = 3) of viability and tissue evaluation (n = 36) to isolate
dental pulp cells. For cell evaluation, isolated and expanded cells comprised the
following groups: Group I: control, cells submitted to initial cryopreservation by
conventional method; Group II: control, cells submitted to initial slow freezing; Group
III: cells submitted to initial slow freezing with 150mT; Group IV: cells submitted to
initial slow freezing with 290mT; Group V: cells submitted to initial slow freezing with
360mT. During cryopreservation the cells were suspended in freezing medium
containing 0, 3 and 10% DMSO (dimethylsulfoxide): GI-II-III-IV-V 0%, GI-II-III-IV-V
3% and GI- II-III-IV-V 10%. For tissue evaluation, samples initially freezing in a
conventional method comprised the following groups: Group I: pulps submitted to
initial freezing without magnetic field (GI); Group II: pulps submitted to the initial
freezing with 150mT (GII); Group III: pulps submitted to initial freezing with 290mT
(GIII); Group IV: pulps submitted to the initial freezing with 360mT (GIV). Samples
from cellular and tissue evaluations, after initial cryopreservation were stored in
liquid nitrogen for 7 days. After the thawing process the cellular viability was
measured by trypan blue and the efficiency of obtaining cells from the cryopreserved
pulp by daily microscopic observation. The results showed that cell survival rates
were similar between control groups and experimental groups at concentrations of
0%, 3% and 10% DMSO (p>0.05). After 96h of culture, the proliferation rate was
higher for the groups exposed to the freezing medium with 3% and 10% DMSO, than
DMSO free groups (p<0.05). Dental pulp cells exposed to magnetic field during
freezing had a positive effect on the proliferating rate when the freezing medium was
DMSO free (p<0.05). It was possible to obtain cells from all groups of the tissue
analysis, and the GIV exhibited the highest efficiency rate. In conclusion, the
magnetic field strength and the DMSO concentration tested, did not influence the
viability rate measured by trypan blue immediately after thawing. But that promoted
difference in the values of GI-II-III-IV-V 0% after 96h of cellular culture. The increase
of magnetic field was directly proportional to the efficiency rate of dental pulp cell
isolation from cryopreserved tissue.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:hermes.cpd.ufjf.br:ufjf/5631 |
| Date | 27 July 2017 |
| Creators | Candido, Erika Mageste de Almeida |
| Contributors | Carmo, Antônio Márcio Resende do, Maranduba, Carlos Magno da Costa, Resende, Leandro Marques de, Oliveira, Rodrigo Guerra de |
| Publisher | Universidade Federal de Juiz de Fora (UFJF), Programa de Pós-graduação em Clínica Odontológica, UFJF, Brasil, Faculdade de Odontologia |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFJF, instname:Universidade Federal de Juiz de Fora, instacron:UFJF |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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