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Efeitos da rosiglitazona, agonista do receptor gama ativado por proliferadores peroxissomais, sobre a proliferação e expressão do TGFb1 em cultura primária de células da polpa dentária humana

Lima, Caroline Lourenço de 05 October 2012 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2012. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2013-02-28T15:47:52Z No. of bitstreams: 1 2012_CarolineLourencoLima.pdf: 3670076 bytes, checksum: 83cef17097589e82ec83d1df070b5a90 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-03-25T15:23:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_CarolineLourencoLima.pdf: 3670076 bytes, checksum: 83cef17097589e82ec83d1df070b5a90 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-03-25T15:23:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_CarolineLourencoLima.pdf: 3670076 bytes, checksum: 83cef17097589e82ec83d1df070b5a90 (MD5) / Estudos recentes sugerem que o receptor gama ativado por proliferadores peroxissomais (PPAR) e seu agonista, a rosiglitazona, podem modular a expressão de moléculas relacionadas com eventos imuno-inflamatórios em células da polpa dentária humana, indicando, assim, a possibilidade de se utilizar agonistas deste receptor nuclear (RN) no controle da inflamação pulpar. Entretanto, eventos igualmente importantes no processo de reparo do complexo dentino-pulpar, tais como proliferação e expressão de genes envolvidos com a formação de dentina terciária, não foram abordados nesses estudos. Diante disso, a proposta do presente trabalho foi investigar o efeito da rosiglitazona sobre a proliferação celular e sobre a expressão do TGF1, em modelo experimental de cultura primária de células da polpa dentária humana. Para cumprir com os objetivos propostos, foram estabelecidas culturas primárias de polpas obtidas de terceiros molares inclusos e hígidos, com a raiz ainda em formação, extraídos por indicações clínicas. Os efeitos da rosiglitazona sobre a proliferação celular foram avaliados por meio de ensaio de 3incorporação de timidina marcada radioativamente com trítio ([H]-timidina) e os efeitos sobre a expressão do gene que codifica o TGF1 foram avaliados por meio da técnica de amplificação por reação em cadeia da polimerase em tempo real/quantitativa (RT-PCRq). Os resultados dos ensaios de proliferação demonstraram que o tratamento com rosiglitazona durante 24 horas diminuiu a proliferação das células em cultura, enquanto que o tratamento durante 72 horas não alterou a proliferação celular. Os resultados dos ensaios de expressão gênica sugeriram que o tratamento com rosiglitazona durante 7 dias não alterou a expressão do gene que codifica o TGF1, no entanto, após 14 dias de tratamento com o ligante, sua expressão aumentou. Em conjunto os resultados dos ensaios de proliferação e de expressão gênica sugerem que a rosiglitazona possa estar envolvida com a ativação de vias de diferenciação ou de vias apoptóticas. No entanto, investigações adicionais são necessárias para melhor esclarecer o papel do PPAR na fisiopatologia pulpar. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Several studies have suggested that peroxisome proliferator-activated receptor gamma (PPARγ) and his agonist, rosiglitazone, can regulate the expression of immune-inflammatory related molecules in human dental pulp cells. The authors have raised the possibility of using PPAR agonists as an option in pulpal inflammation treatment. However, others events involved in the dental-pulp complex repair process, such as cell proliferation and gene expression of molecules related with the tertiary dentin formation, were not assessed in these studies. Therefore, the aim of this study was to investigate the effect of rosiglitazone on cell proliferation and on the TGF1 gene expression in primary human dental pulp cells culture. In order to perform the purposes of the present study, primary cultures were established from pulp tissue obtained from non-erupted, caries-free third molars, which were extracted due to therapeutic reasons. Effects of rosiglitazone on cell proliferation were 3evaluated by tritium labeled thymidine incorporation assay ([H]-thymidine) and effects on TGF1 gene expression were evaluated by quantitative polymerase chain reaction (RT-PCRq). The proliferation assays showed that treatment with rosiglitazone for 24 hours decreased cell proliferation, while after 72 hours treatment no changes in cell proliferation where observed when compared with controls. Gene expression results suggested that treatment with rosiglitazone for 7 days did not modify TGF1 gene expression, however, after 14 days ligand treatment, an increase in the expression was observed. Proliferation and TGF1 gene expression results suggest that rosiglitazone might be involved in differentiation or apoptotic pathways activation in the primary pulp cell cultures studied. However, further investigations are required to better understand the role of PPAR in dental pulp pathophysiology.
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Contribuição a preservação da vitalidade pulpar em molares avulsionados de ratos, com variação de tempo e dos meios de armazenagem : estudo histologico

Wassall, Thomaz 22 December 1989 (has links)
Orientador: Samir Tufic Arbex / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-14T04:04:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Wassall_Thomaz_D.pdf: 2395830 bytes, checksum: 5628859fd6f6498fd79845416da71fc1 (MD5) Previous issue date: 1989 / Resumo: A preservação imediata de dentes a serem reimplantados ou transplantados, é uma manobra essencial para o êxito destes procedimentos odontológicos. Nesta pesquisa, em que se utilizou 360 molares inferiores extraídos de ratos, estudaram-se os seguintes meios de preservaçao: solução de Hank suplementada, sangue, leite de vaca, saliva, solução fisiológica e água destilada. Os dentes permaneceram nos meios por tempos determinados, que foram: O, 18, 30, 60, 80 e 120 minutos. Em seguida, foram examinados histologicamente, de acordo com os parâmetros de normalidade do tecido pulpar. Os meios de armazenagem: solução de Hank, sangue e solução fisiológica mostraram-se superiores a água destilada (controle), e mantiveram a vitalidade pulpar até 30 minutos. O leite de vaca e a saliva foram inferiores ao meio controle, e o sangue foi o meio que preservou a polpa por mais tempo, até 60 minutos / Abstract: The success of these dental procedures de essentially on the immediate preservation of the teeth to be reimplanted or transplanted. In this researchMnch used 360 mandibular molars extracted from rats, the following preser vative media used: supplemented Hank's medi um , blood's rat,cowls milk, salivals rat, physiological saline solution and distilled water. The teeth were kept in the different media for determine lengths of time which were: 18, 30, 60, 80 and +20 minutes. On removal, a histological examination was made comparing with normal pulp tis sue parameters. Hank's medium blood, and the saline proved superior to distilled waber (the control) and maintained pulp tissue vitality for as much as 30 minutes. Cowls milk and saliva were less effective than the control medium and blood was the medium which preserved the pulp for the longest time, up to 60 minutes / Doutorado / Farmacologia / Doutor em Ciências
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Alterações da inervação pulpar apos transecção do nervo alveolar inferior da lingula da mandibula : estudo experimental em cão [Cannis familiaris]

Bozzo, Lourenço, 1936- 20 July 2018 (has links)
Tese (livre docencia) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-20T15:28:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bozzo_Lourenco_LD.pdf: 1382118 bytes, checksum: 25951f0a993681395900ab63e6af50ef (MD5) Previous issue date: 1975 / Resumo: As alterações que as fibras nervosas da polpa dental de um cão sofrem apôs a transecção do Nervo alveolar inferior foram estudadas através de uma conjugação de métodos histoquí-micos, histofisicos e ultraestruturais . A transecção unilateral do Nervo dentário inferior / foi feita ao nível da lTngula da mandTbula, sendo as polpas retiradas para estudo após períodos de tempo que variaram de 3 a 60 dias. O lado não operado serviu como controle. Os aspectos morfológicos das alterações foram observados em secções impregnadas pela prata, em cortes de 0,5 mícron corados pelo Azul de Metileno, e em coloração pelo Sudan e pela Hemateína ácida. Através destas colorações foi possível observar que existe um estágio inicial, por volta do 3º dia, em que as fibras nervosas já estão bastante alteradas, com varicosidades e fragmentação. A degeneração vai se acentuando, sendo que aos 10 dias apenas restos de fibras podem ser observados. Aos 20 dias, a polpa esta completamente denervada. Através das reações da Hemateína ácida, do tetróxido de ósmio, e da sudanofilia, conjugados com extrações seletivas foi possível observar que os fosfolipídios predominantes na mielina normal sofrem uma degradação, diminuindo paralelamente com o aumento de ésteres de colesterol, colesterol e ácidos graxos, ate que aos 20 dias, nenhum deles é detectado na área. A partir dos 20 dias, as características gerais da polpa não se alteraram, sendo que até aos 60 dias nenhuma evidência de regeneração destas fibras nervosas / foi notada. A microscopia eletrônica permitiu observar os detalhes morfológicos desta degradação, mostrando que numa mesma área, as fibras se alteram diferentemente, parecendo haver uma/ degeneração inicial mais acentuada do axoplasma que da mielina. A análise da birrefringência das fibras nos diferentes estágios mostrou que as alterações morfológicas e histoquímicas determinam modificações estruturais das fibras nervosas / Abstract; Not informed / Tese (livre docencia) - Univer / Patologia / Livre Docente em Estomatopatologia
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Análise proteômica da polpa dentária humana com diferentes condições clínicas endodônticas

Silva, Poliana Amanda Oliveira 14 February 2017 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2017. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2017-04-04T16:10:19Z No. of bitstreams: 1 2017_PolianaAmandaOliveiraSilva.pdf: 2281869 bytes, checksum: cf54931fb70b72a7017387cf28a5fe8c (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2017-04-10T11:35:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_PolianaAmandaOliveiraSilva.pdf: 2281869 bytes, checksum: cf54931fb70b72a7017387cf28a5fe8c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-10T11:35:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_PolianaAmandaOliveiraSilva.pdf: 2281869 bytes, checksum: cf54931fb70b72a7017387cf28a5fe8c (MD5) / A Análise proteômica de diferentes condições clínicas da polpa dentária humana pode fornecer informações globais sobre mecanismos de patogenicidade e interações multifatoriais existentes entre microrganismos e o tecido pulpar humano. Assim, o objetivo do estudo foi analisar de forma qualitativa proteínas presentes no tecido pulpar em condições clínicas de polpa normal, pulpite irreversível e necrose com lesão periapical visível radiograficamente. Para isso, três réplicas biológicas, contendo pool de 5 dentes, para cada condição clínica foram avaliadas. A extração proteica foi realizada utilizando solução de lise e sonicação, para quantificação foi realizado o método de Bradford. A identificação proteica foi realizada utilizando nanoUPLC-MS/MSE, os dados obtidos foram processados e comparados a um banco de dados com auxílio do software ProteinLynx Global Server (PLGS). A partir dessa análise, um total de 508 proteínas foram identificadas. Entre essas, 75 foram avaliadas de forma exclusiva em polpa normal, 59 no diagnóstico de pulpite e 120 em necrose.Observou-se a presença de proteínas comuns aos diferentes diagnósticos clínicos, sendo 72 destas identificadas nos quadros de polpa normal e de pulpite irreversível, 36 nos quadros de pulpite e necrose, 37 nos quadros de polpa normal e necrose e 109 proteínas foram encontradas de forma semelhante em todos os grupos. No quadro de pulpite foram identificadas predominância das proteínas com função relacionada ao metabolismo e vias de energia, apoptose e maior diversidade de proteínas relacionadas a resposta imune em relação ao quadro clínico de polpa normal. No diagnóstico de necrose com lesão periapical foram identificadas predominância de proteínas relacionadas as funções de crescimento celular, metabolismo de proteínas, transporte, resposta imune, assim como proteínas envolvidas na comunicação, sinal de transdução e adesão celular, em relação ao diagnóstico clínico de pulpite irreversível. Desta forma, o presente estudo conclui que uma mudança no perfil de proteínas relacionadas ao processo imune pode ocorrer, conforme ocorre o agravamento da doença. Além disso, a identificação de proteínas de cada diagnóstico clínico pode contribuir para evolução de estudos relacionado ao processo patogênico pulpar e estudos regenerativos. / The proteomic analysis of different clinical conditions of the human dental pulp can provide global information on mechanisms of pathogenicity and multifactor interactions between microorganisms and human pulp tissue. The objective of this study was to qualitatively analyze the proteins present in pulp tissue under clinical conditions of normal pulp, irreversible pulpitis and necrosis with periapical lesion visible radiographically. For this, three biological replicates of pool containing 5 teeth for each clinical condition was evaluated. Protein extraction was performed using lysis solution (20 mM Tris-HCl pH 8.3, 1.5 mM KCl, 10 mM DTT, 1 mM PMSF 0.1%) and sonication for one minute with alternating cycles. Afterwards, quantification was performed using the Bradford method. The protein identification was performed using nanoUPLC-MS / MSE, the obtained data were processed and compared to a database with the aid of ProteinLynx Global Server (PLGS) software. From this analysis, a total of 508 proteins were identified. Among these, 75 were evaluated exclusively in normal pulp, 59 in the diagnosis of pulpitis and 120 in necrosis. It observed the presence of proteins found similarly between groups, of which 72 were identified between the normal pulp and irreversible pulpitis, 36 in the pulp and necrosis groups, 37 in the normal group and necrosis, and 109 proteins were found in a similar way in All groups. It was observed that from the normal pulp-to-pulpitis table a greater identification of proteins with function related to metabolism and energy pathways, apoptosis and greater diversity of proteins related to immune response was found. From the diagnosis of irreversible pulpitis to periapical lesion necrosis observed an increase in the diversity of proteins involved in cell growth processes, protein metabolism, transport, immune response, as well as proteins involved in communication, transduction signal and cell adhesion. In this way, this work offers complementary and innovative data regarding pulp proteins, since it can lead to advances in the area of tissue regeneration, as well as knowledge of pulp pathogenesis.
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Novos parâmetros para o clareamento dental: avaliação da eficácia, citotoxicidade e efeitos moleculares /

Soares, Diana Gabriela de Sousa. January 2014 (has links)
Orientador: Carlos Alberto de Souza Costa / Banca: Ana Claudia Pavarina / Banca: Renata Garcia Fonseca / Banca: André Luis Fraga Briso / Banca: Adriano Fonseca de Lima / Resumo: Nesta pesquisa, foram analisadas a eficácia clareadora, citotoxicidade e características fenotípicas de células pulpares expostas a protocolos de clareamento de consultório experimentais. No primeiro estudo, discos de esmalte/dentina foram submetidos a 6 sessões clareadoras, caracterizadas por 1 ou 3 aplicações de peróxido de hidrogênio (H2O2) a 35% ou 17,5%, por 5 ou 15 min, ou de peróxido de carbamida (PC) a 37%, por 10 ou 20 min. A alteração de cor (E) e quantificação da difusão de H2O2 (violeta leuco-cristal/peroxidase) foram avaliadas. Todos os protocolos testados promoveram alteração significativa de cor associados a redução na difusão de H2O2; no entanto, o gel com PC apresentou os piores resultados (Traço de Pilai; Bonferroni/p<0,05). Apenas os protocolos 35% H2O2/ 1x 15 e 3x 5 min, 17,5% H2O2/ 3x 15 min e 37% PC/ 3x 20 min apresentaram valores de E similares ao protocolo tradicional (35%/ 3x 15 min) em até 6 sessões de clareamento (ANOVA; SNK e Tamhane/p>0.05). No segundo estudo, foi avaliada a citotoxicidade trans-amelodentinária causada pela aplicação de protocolos experimentais usando 35% H2O2/ 1x 15 e 1x 5 min e 17,5% H2O2/ 3x 15, 1x 15 e 1x 5 min. O protocolo 35% H2O2/ 3x 15 min foi empregado como controle positivo. Os discos de esmalte/dentina foram adaptados em dispositivos trans-well, os quais foram posicionados sobre células odontoblastóides (MDPC-23) e cultura primária de células pulpares humanas (HDPCs) previamente semeadas. A viabilidade (MTT) e morfologia celular (MEV) foram avaliadas imediatamente e 72 h pós-clareamento, bem como o estresse oxidativo e lesão à membrana celular (microscopia de fluorescência). Todos os protocolos experimentais avaliados reduziram significativamente o dano celular quando comparados ao controle positivo (Kruskal-Wallis; Mann-Whitney/p<0,05). Esta redução foi tempo/concentração dependente. As células expostas aos protocolos com o gel contendo 17,5% de... / Abstract: In this study, the bleaching effectiveness, cytotoxicity and phenotypic characteristic of dental pulp cells exposed to experimental in-office bleaching protocols were analyzed. In the first study, enamel/dentin discs were subjected to 6 bleaching sessions, composed by 1 or 3 applications of a 35%- or 17.5%-H2O2 (hydrogen peroxide) gel, during 5 or 15 minutes, or by a 37%-CP (carbamide peroxide) gel, applied for 10 or 20 minutes. Color change (E) and H2O2 diffusion (leucocrystal violet/ peroxidase) were analyzed. All the tested protocols promoted significant color alteration and reduction of H2O2 diffusion; however, the CP gel presented the worst results (Pillai's trace/ Bonferroni test; p<0.05). Only the protocols 35%-H2O2/ 1x 15, 35%-H2O2/ 3x 5 min, 17.5%-H2O2/ 3x 15 min and 37%-CP 3x 20 min presented similar E values than traditional protocol (35%-H2O2/ 3x 15 min) up to 6 sessions (ANOVA; SNK and Tamhane tests/p>0.05). In the second study, the trans-enamel and trans-dentinal cytotoxicity on dental pulp cells of selected experimental bleaching protocols (35%-H2O2/ 1x 15 and 1x 5 min; 17.5%-H2O2/ 3x 15, 1x 15 and 1x 5 min) were tested. The protocol 35%-H2O2/ 3x 15 min was considered as the positive control group. The enamel/dentin discs were adapted to trans-wells devices, which were positioned over odontoblast-like cells (MDPC-23) and primary culture of human dental pulp cells (HDPCs) previously seeded on culture plates. The cell viability (MTT) and morphology (SEM) were evaluated immediately and 72 h post-bleaching, as well as oxidative stress and cell membrane damage (fluorescence microscopy). The experimental protocols promoted significant minimization of cell damage, for all evaluated parameters, when compared to positive control, in a time/concentration fashion (Kruskal-Wallis; Mann-Whitney/ p<0.05). Cells exposed to protocols with the 17.5%-H2O2 gel presented cell recovery capability in around 50% three days after bleaching... / Doutor
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Análise do complexo dentinopulpar em dentes submetidos à movimentação dentária induzida em ratos / Dentin-pulp analysis of induced dental movement in rats

Consolaro, Renata Bianco 29 August 2005 (has links)
Os efeitos pulpares da movimentação dentária induzida foram analisados na microscopia óptica, em 49 primeiros molares superiores de ratos. o aparelho ortodôntico consistiu em uma mola fechada ancorada aos incisivos superiores, movimentando mesialmente o primeiro molar superior esquerdo. Dez animais foram considerados controle, sem movimentação dentária induzida; os demais foram divididos em grupos de acordo com o período de observação após a movimentação: 1, 2, 3, 4, 5, 6 e 7 dias. A eficiência da força e comprovação do movimento dentário teve como parâmetros as alterações periodontais, incluindo-se hialinização segmentar, reabsorção óssea frontal e a distância e a reabsorção radicular. no complexo dentinopulpar não foi observada qualquer alteração morfológica que indicasse efeito da movimentação dentária induzida. / The effects of induced tooth movement on the pulp of Wistar rats were analyzed through light microscopy in 49 first upper molars. The orthodontic appliance consisted of a coil spring moving the fist left molar foreword supported by the incisor. The sample was divided into 4 groups according to the period of observation. the control group consisted of 10 animals without any orthodontic movement. the other 39 rats were evaluated after: 1, 2, 3, 4, 5, 6 and 7 days of dental movement. The efficiency of induced tooth movement was verified trough the expected classic periodontal phenomena, such as segmental hyalinization of the ligament, bone resorption and even dental resorption, due to intense forces on the distal root. the dentin-pulp complex did not demonstrate any morphological alteration which indicated effects of induced tooth movement.
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Análise do complexo dentinopulpar em dentes submetidos à movimentação dentária induzida em ratos / Dentin-pulp analysis of induced dental movement in rats

Renata Bianco Consolaro 29 August 2005 (has links)
Os efeitos pulpares da movimentação dentária induzida foram analisados na microscopia óptica, em 49 primeiros molares superiores de ratos. o aparelho ortodôntico consistiu em uma mola fechada ancorada aos incisivos superiores, movimentando mesialmente o primeiro molar superior esquerdo. Dez animais foram considerados controle, sem movimentação dentária induzida; os demais foram divididos em grupos de acordo com o período de observação após a movimentação: 1, 2, 3, 4, 5, 6 e 7 dias. A eficiência da força e comprovação do movimento dentário teve como parâmetros as alterações periodontais, incluindo-se hialinização segmentar, reabsorção óssea frontal e a distância e a reabsorção radicular. no complexo dentinopulpar não foi observada qualquer alteração morfológica que indicasse efeito da movimentação dentária induzida. / The effects of induced tooth movement on the pulp of Wistar rats were analyzed through light microscopy in 49 first upper molars. The orthodontic appliance consisted of a coil spring moving the fist left molar foreword supported by the incisor. The sample was divided into 4 groups according to the period of observation. the control group consisted of 10 animals without any orthodontic movement. the other 39 rats were evaluated after: 1, 2, 3, 4, 5, 6 and 7 days of dental movement. The efficiency of induced tooth movement was verified trough the expected classic periodontal phenomena, such as segmental hyalinization of the ligament, bone resorption and even dental resorption, due to intense forces on the distal root. the dentin-pulp complex did not demonstrate any morphological alteration which indicated effects of induced tooth movement.
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Células-tronco mesenquimais derivadas da polpa de dente humano: caracterização e estudos funcionais em modelo experimental de epilepsia / Células-tronco mesenquimais derivadas da polpa de dente humano: caracterização e estudos funcionais em modelo experimental de epilepsia

Freitas, Daniele Pinheiro de January 2011 (has links)
Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-07-16T19:43:50Z No. of bitstreams: 1 Daniele Pinheiro de Freitas Células-tronco mesenquimais derivadas da polpa de dente....pdf: 2028523 bytes, checksum: cd8d31def021492a032a820714bfde3d (MD5) / Made available in DSpace on 2012-07-16T19:43:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Daniele Pinheiro de Freitas Células-tronco mesenquimais derivadas da polpa de dente....pdf: 2028523 bytes, checksum: cd8d31def021492a032a820714bfde3d (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / Terapia celular é o conjunto de métodos e abordagens tecnológicas com a utilização de células no tratamento de doenças. A terapia com células-tronco tem despertado grande interesse na comunidade científica devido à capacidade que essas células indiferenciadas têm de preservar sua própria população e de se diferenciar em células dos diversos tecidos. Encontrar a fonte de célula-tronco apropriada para uso terapêutico depende de diversos fatores, como a sua capacidade de proliferação e estabilidade citogenética, assim como suas características fenotípicas e seu potencial de diferenciação. A epilepsia é uma desordem neurológica que acomete de 1 a 3% da população mundial. É caracterizada pela presença de crises espontâneas recorrentes (CER) e possui seu tratamento clínico baseado no emprego de drogas anti-epilépticas (DAES). O uso de células tronco apresenta-se como uma alternativa ao tratamento desta patologia. Este trabalho tem como objetivos caracterizar as células-tronco mesenquimais de polpa de dente decíduo humano e avaliar seu papel terapêutico no modelo de epilepsia do lobo temporal induzido por lítio-pilocarpina em ratos Wistar. As células da polpa de dente humano utilizadas nesse estudo foram submetidas à avaliação fenotípica, do seu potencial de diferenciação, e da estabilidade cromossômica. Para verificar os efeitos terapêuticos das células-tronco de polpa de dente em modelo experimental de epilepsia os animais foram divididos nos seguintes grupos: SE-salina (n=10), que no transplante recebeu solução salina; SE-CDLH1 (n=13) que recebeu células-tronco de polpa de dente humano (107 células/animal), SE-CMO (n=8) que recebeu células mononucleares de medula óssea (107 células/animal) e o grupo controle (n=10) que não foi submetido ao status epilepticus (SE). As células foram transplantadas por via intraperitoneal. Foram realizadas análises, em diferentes espaços de tempo para avaliar migração celular por imunofluorescência e as crises espontâneas recorrentes. Para avaliar alterações de memória foi estudado o desempenho dos animais no labirinto aquático de Morris (LAM). As CDLH1 apresentaram estabilidade cromossômica (até a 8ª passagem); características imunofenotípicas de células mesenquimais, com alta expressão de CD105, CD73, CD 44, CD90, CD166, CD54, OCT-4, e STRO-1; capacidade de diferenciação nas linhagens adipogênicas, osteogênicas e condrogênicas. As CDLH1 migraram para o cérebro e baço dos ratos. Dos resultados terapêuticos observou-se a redução das crises espontâneas recorrentes nos animais tratados após 30 dias do SE e transplante, mas as células não foram capazes de bloquear essas crises (observado 60 dias pós-SE). Obtendo-se os mesmos resultados com o transplante de CMO. Já no estudo da memória não houve diferença estatística na latência de escape nos animais dos grupos epilépticos (tratado e não-tratado). Os animais do grupo controle (não epiléptico), apresentaram retenção de memória em relação aos animais dos grupos SE-salina e SE-CDLH1. Novos estudos devem ser realizados para que se possa estabelecer a utilização ideal das células-tronco mesenquimais derivadas da polpa de dente humano em relação às necessidades terapêuticas da epilepsia. / Cell therapy is the set of methods and technological approaches to the use of cells in treating diseases. The stem cell therapy has aroused great interest in the scientific community due to the capacity of these undifferentiated cells in preserving its own population and to differentiate into cells of various tissues. Finding the source of stem cells suitable for therapeutic use depends on various factors such as their ability to proliferate and cytogenetic stability, as well as their phenotypic characteristics and their potential of differentiation. Epilepsy is a neurological disorder that affects 1-3% of world population. It is characterized by recurrent spontaneous seizures (RSS) and has its medical treatment based on use of antiepileptic drugs (AEDs). The use of stem cells is an alternative treatment for this pathology. This work aims to characterize the mesenchymal stem cells from human deciduous dental pulp and evaluate its therapeutic role in the model of temporal lobe epilepsy induced by lithium-pilocarpine in rats. The cells of the human dental pulp used in this study were subjected to phenotypic analysis of their potential of differentiation and chromosomal stability. To verify the therapeutic effects of stem cells from dental pulp in experimental epilepsy, the animals were divided into the following groups: SE-Saline (n = 10) transplanted with saline; SE-CDLH1 (n = 13) who received stem cells from human dental pulp (107 cells / animal), SE-CMO (n = 8) who received bone marrow mononuclear cells (107 cells / animal) and the control group (n = 10) who did not undergo status epilepticus (SE). The cells were transplanted by intraperitoneal route. Analyses were performed in different time to assess cell migration by immunofluorescence and recurrent spontaneous seizures. To evaluate changes in memory we studied the performance of the animals in the Morris water maze, after cell transplantation. Stem cells analyzed showed chromosomal stability (up to 8th passage); immunophenotypic characteristics of mesenchymal cells with high expression of CD105, CD73, CD 44, CD90, CD166, CD54, OCT-4, and STRO-1; ability to differentiate into adipogenic, osteogenic and chondrogenic lineages. The CDLH1 migrated throughout the brain and spleen of mice. The therapeutic results observed the reduction of recurrent spontaneous seizures in treated animals after 30 days of transplantation and SE, but cells were not able to block these seizures (observed 60 days post-SE). The same results were obtained with the transplantation of BMC. In the study of memory there was no statistical difference in escape latency of the epileptic groups (treated and untreated). Animals of control group (non epileptic) showed memory retention in comparison to groups saline-SE and SE-CDLH1. Further studies should be conducted so that we can determine the optimal use of mesenchymal stem cells derived from human dental pulp in relation to the therapeutic needs of the epilepsy.
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Estudo do hidróxido de cálcio associado ou não à clorexidina como medicação intracanal de dentes permanentes necrosados / Study of calcium hydroxide associated or not to chlorhexidine as intracanal medication in necrotic teeth

Dias, Françoise Parahyba January 2010 (has links)
DIAS, Françoise Parahyba. Estudo do hidróxido de cálcio associado ou não à clorexidina como medicação intracanal de dentes permanentes necrosados. 2010. 67 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Fortaleza, 2010. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-12-08T14:02:58Z No. of bitstreams: 1 2010_dis_fpdias.pdf: 1392115 bytes, checksum: 1e1713e3aaae1ed082705976cef2733f (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-02-01T13:38:04Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_dis_fpdias.pdf: 1392115 bytes, checksum: 1e1713e3aaae1ed082705976cef2733f (MD5) / Made available in DSpace on 2012-02-01T13:38:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_dis_fpdias.pdf: 1392115 bytes, checksum: 1e1713e3aaae1ed082705976cef2733f (MD5) Previous issue date: 2010 / Aware that the main objective of endodontic treatment is the removal of microorganisms and the prevention of re-infection inside the root canal, and that the infections are polymicrobial and difficult to eliminate, the biomechanical preparation is essential for disinfection, though it is unable to eradicate all microorganisms. The intracanal medication is used as an adjunct to treatment, reducing the endodontic microbiota, and favoring the repair of periapical lesions. However, this dissertation consists of two papers and it is proposed, through a written review, to examine and discuss the intracanal medications most frequently used at present in endodontics - calcium hydroxide and chlorhexidine. Further, through research, to evaluate the antibacterial effect of biomechanical preparation and a calcium hydroxide based paste containing or not 2% chlorhexidine, as intracanal medication in the treatment of necrotic teeth after trauma, as well as to verify the presence of the microorganisms Fusobacterium nucleatum and black-pigmented bacilli inside the root canal of teeth. According to the inclusion criteria, the sample consisted of 14 incisors necrotic after trauma. The microbiological samples were acquired before (S1) and after biomechanical preparation (S2), after intracanal medication (S3) and 72 hours after removal of medication (S4). Selected at random, eight patients used calcium hydroxide as intracanal medication and six patients the calcium hydroxide based paste containing 2% chlorhexidine. The samples were collected sequentially, inserting three sterile absorbent paper cones with a diameter compatible with the root canal, and after a minute the paper points were removed and placed in a tube containing a reduced transport fluid, and sent to the laboratory for microbiological evaluation. The results were analyzed by the Friedman, Conover-Inman and Kruskal-Wallis tests (p <0.05). Microorganisms were found in 100 % of root canals in the initial samples (S1), while in S2 were detected in only 3 out of the 14 samples (21.4 %), resulting in a reduction in the number of colony forming units, a statistically significant result (p <0.001) between S1 and S2. No statistically significant reduction was observed when comparing S2 with S3, S2 with S4, and S3 with S4, regardless of the medication used. It was found that in S1, there was a predominance of Gram-positive cocci - 8 out of 14 (57.1 %) and Gram-negative cocci - 9 out of 14 (64.3 %). In S2 only Gram-positive bacterial morphotypes were detected, in 3 out of 14 samples (21.4 %) of Gram-positive cocci and 2 out of 14 (14.3%) of Gram-positive bacilli. The microorganisms Fusobacterium nucleatum found in 8 of the 14 samples (57.1%) and the black-pigmented bacilli found in 3 of the 14 (21.4%) of the initial samples, and were found in only one out of 6 (16.1%) samples taken after the use of calcium hydroxide. It was concluded that mechanical preparation of necrotic teeth after trauma, using 2.5% NaOCl, plays its role in significantly reducing the microbiota of root canals, but the calcium hydroxide, or the calcium hydroxide based paste containing 2% chlorhexidine, have a limited antibacterial effect, not being able to prevent the re-growth of bacteria after its use as an intracanal medication. / Ciente de que o principal objetivo do tratamento endodôntico consiste na eliminação de microorganismos e evitar a reinfecção dentro do canal radicular, e que as infecções são polimicrobianas e difíceis de serem eliminadas, o preparo biomecânico além de ser primordial para a desinfecção, é incapaz de erradicar todos os microorganismos. Então, utiliza-se da medicação intracanal como coadjuvante ao tratamento, reduzindo a microbiota endodôntica e favorecendo o reparo da lesão periapical. Contudo, esta dissertação é constituída de dois artigos e propõe-se, mediante uma revisão de literatura, apresentar e discutir as medicações intracanais mais utilizadas atualmente na Endodontia – hidróxido de cálcio e clorexidina, e, por meio de uma pesquisa, avaliar o efeito antibacteriano do preparo biomecânico e de uma pasta à base de hidróxido de cálcio associada ou não à clorexidina a 2 %, como medicação intracanal, no tratamento de dentes necrosados após trauma, bem como verificar a presença dos microorganismos Fusobacterium nucleatum e bacilo pigmentado negro no interior do canal radicular desses dentes. De acordo com os critérios de inclusão, a amostra constituiu-se de 14 incisivos necrosados após trauma. As coletas microbiológicas foram adquiridas após a abertura coronária (C1), preparo biomecânico (C2), medicação intracanal (C3) e 72h depois da retirada da medicação (C4). Mediante sorteio, oito pacientes utilizaram como medicação intracanal o hidróxido de cálcio e seis pacientes a pasta de hidróxido de cálcio associada à clorexidina a 2 %. As coletas foram realizadas introduzindo sequencialmente três cones de papel absorvente estéril, de diâmetro compatível com o do canal radicular, no interior deste por aproximadamente um minuto e transferidas para um tubo contento um fluido reduzido para transporte e levadas ao laboratório para processamento microbiológico. Os resultados foram avaliados pelos testes Friedman, Conover-Inman e Kruskall-Wallis (p<0.05). Os microorganismos foram encontrados em 100 % dos canais radiculares, das amostras iniciais (C1), enquanto na C2 foram detectados em apenas 3/14 (21.4 %) das amostras, resultando numa redução do número de unidades formadoras de colônias, estatisticamente significante (p<0.001) entre C1 e C2. O mesmo não ocorreu quando comparados C2 com C3, C2 com C4 e C3 com C4, independentemente da medicação. Foi constatada em C1 a predominância de cocos Gram-positivos (8/14) e negativos (9/14), representando 57.1 % e 64.3 %, respectivamente. Na C2 só foram detectados morfotipos bacterianos positivos, num total de 3/14 (21,4 %) de cocos Gram-positivos e 2/14 (14.3 %) de bacilos Gram-positivos. O microorganismo Fusobacterium nucleatum e o bacilo pigmentado negro foram observados em 8/14 (57.1 %) e 3/14 (21.4 %), respectivamente, das amostras iniciais, sendo apenas o primeiro encontrado em 1/6 (16.1 %) amostras, após a utilização do hidróxido de cálcio. Concluiu-se que o preparo biomecânico de dentes necrosados após trauma, utilizando NaOCl a 2.5 %, desempenha seu papel em reduzir significantemente a microbiota dos canais radiculares, porém o hidróxido de cálcio ou a sua associação com clorexidina a 2 % possuem efeito antibacteriano limitado, não sendo capazes de prevenir o recrescimento de bactérias após seu uso como medicação intracanal.
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Avaliação do efeito antibacteriano da medicação intracanal à base de hidróxido de cálcio associado ou não à clorexidina 1% no tratamento de dentes necrosados após trauma / Antibacterial effect evaluation of calcium hydroxide with or without chlorhexidine like intracanal medication in the treatment of necrotic teeth after trauma

Campos, Mirela Andrade January 2010 (has links)
CAMPOS, Mirela Andrade. Avaliação do efeito antibacteriano da medicação intracanal à base de hidróxidos de cálcio associado ou não à clorexidina 1% no tratamento de dentes necrosados após trauma. 2010. 61 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Fortaleza, 2010. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-12-15T11:52:45Z No. of bitstreams: 1 2010_dis_macampos.pdf: 1163800 bytes, checksum: 3a0a608b6767784bf6ceb1e5f2838483 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-02-02T15:58:17Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_dis_macampos.pdf: 1163800 bytes, checksum: 3a0a608b6767784bf6ceb1e5f2838483 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-02-02T15:58:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_dis_macampos.pdf: 1163800 bytes, checksum: 3a0a608b6767784bf6ceb1e5f2838483 (MD5) Previous issue date: 2010 / The goals of this dissertation are study of sodium hypochlorite and chlorhexidine as irrigants, through a literature review, evaluate and quantify, by means of bacterial culture, the antibacterial effect of biomechanical preparation and pulp-based hydroxide calcium with or without 1% chlorhexidine on bacteria in root canals of permanent teeth after necrotic injury, as well as verifying the presence of microorganisms Fusobacterium nucleatum and Black Pigmented Bacillus in these teeth. The sample consisted of 13 teeth, totaling 11 patients. Microbiological samples were taken after the coronal opening (A1), after root canal preparation (A2), followed by the use of intracanal dressing (A3) and 72 hours of the removal of the medication (A4). The samples were collected sequentially introducing three sterile absorbent paper cones inside the root canal for one minute. In A1, 100% of samples were positive, and the average colony forming units (CFU) of 7.7 x 104. In the second collection (A2), 5 / 13 samples were positive, with an average of 1.7 x 103 CFUs. After use of the medication (A3), 4 / 13 samples were positive, averaging 3.3 x 103 CFUs. A4, 6 / 13 samples were positive, with an average of 1 x 104 CFUs. Between A1 x A2, A3 and A1 x A1 x A4, we observed a reduction of CFUs was statistically significant (p <0.001). We were unable to observe a statistically significant difference (p> 0.05) among the other samples. We conclude that chemo-mechanical performs its antibacterial function by significantly reducing the number of micro-organisms from the main channel, but calcium hydroxide and its association with chlorhexidine 1% had no statistically significant difference, having an antibacterial effect limited not being able to prevent bacterial growth after its use as an intracanal medication. / Tem-se como objetivo desta dissertação estudar o hipoclorito de sódio e a clorexidina como soluções irrigadoras, através de uma revisão de literatura, e avaliar e quantificar, por meio de cultura bacteriana, o efeito antibacteriano do preparo biomecânico e de pasta à base de hidróxido de cálcio associada ou não a clorexidina 1 % sobre bactérias presentes em canais radiculares de dentes permanentes necrosados após trauma, bem como verificar a presença dos microorganismos Fusobacterium nucleatum e bacilo pigmentado negro (BPN) nestes dentes. A amostra consistiu de 13 dentes, totalizando 11 pacientes. As amostras microbiológicas foram coletadas após a abertura coronária (A1), depois do preparo biomecânico (A2), seguido da utilização do curativo de demora (A3) e 72h de procedida à remoção da medicação intracanal (A4). As amostras foram coletadas introduzindo-se sequencialmente três cones de papel absorvente estéril no interior do canal radicular por um minuto. Em A1, 100% das amostras foram positivas para presença de bactérias, sendo a média de Unidades Formadoras de Colônias (UFC) de 7.7 x 104. Na segunda coleta (A2), apenas 5/13 amostras foram positivas, com média de UFCs de 1.7 x 103. Após o uso da medicação intracanal (A3), 4/13 amostras foram positivas, com média de 3.3 x 103 UFCs. Em A4, 6/13 amostras foram positivas, com média de 1 x 104 UFCs. Entre A1 x A2, A1 x A3 e A1 x A4, observou-se uma redução de UFCs estatisticamente significante (p<0.001). Não se pôde observar diferença estatisticamente significante (p>0.05) entre as demais amostras. Conclui-se que o preparo químico-mecânico desempenha sua função antibacteriana ao reduzir significativamente o número de micro-organismos do canal principal, porém o hidróxido de cálcio e sua associação com clorexidina 1% não tiveram diferença estatística significante, possuindo um efeito antibacteriano limitado, não sendo capazes de prevenir o crescimento de bactérias após seu uso como medicação intracanal.

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