As proteínas são importantes componentes da matriz extracelular da polpa dentária e possuem diferentes funções nos tecidos. A literatura odontológica não relata como os proteoglicanos se distribuem e agem na matriz extracelular de dentes decíduos durante o processo fisiológico de rizólise. Foi objetivo do trabalho analisar as expressões dos proteoglicanos biglican e decorin e relacioná-las com as diversas fases do processo de rizólise. Para isso foram utilizados dentes decíduos humanos extraídos e livres de lesões de cárie, apresentando vários estágios de reabsorção radicular, divididos em três grupos: com dois terços ou mais do comprimento radicular médio, um terço ou mais do comprimento radicular médio e menos de um terço do comprimento radicular médio. Foi utilizada a técnica da imunoistoquímica, com o método da estreptavidina-biotina-peroxidase, e anticorpos contra as proteínas anteriormente citadas. Os resultados mostraram que os proteoglicanos estudados apresentaram imunorreatividade na matriz extracelular da polpa e da dentina dos dentes nas três fases de reabsorção. Foi possível concluir que houve diferença na distribuição e no padrão de expressão dos proteoglicanos biglican e decorin apenas na área de reabsorção, nos dentes decíduos hígidos nas três fases de rizólise o que sugere um papel regulador destes proteoglicanos no processo de reabsorção fisiológica nos dentes decíduos hígidos. / Proteins are important components in pulp extracellular matrix and perform several different roles in the body tissues. The distribution and functions of some proteins have already been described but there aren?t studies showing how the proteoglycans are distributed and act in the extracellular matrix of deciduous teeth at the physiological resorption process. The aim of the present work was to study the expression and distribution of the following non-collagenous components of the extracellular matrix: biglycan and decorin in deciduous teeth dental tissues at the physiological root resorption. Hygid human deciduous teeth that were extracted for orthodontic reasons were grouped together according to root length: group I - two thirds or more of average length root, group II - one third or more of average length root and group III ? less than one third of average length root. The streptavidin-biotinperoxidase method of immunohistochemistry was used with antibodies against the antigens previously quoted. The results showed that the proteoglycans had been found in pulp and dentin extracellular matrix in all groups. In conclusion, biglycan and decorin were differentially found only in the resorption area, between tissues in resorption process and its adjacent zone, which make us believe that these proteoglycans act regulating the physiological resorption process in hygid deciduous teeth.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-11-08Bitstream added on 2014-06-13T19:25:25Z : No. of bitstreams: 1 carvalho_as_dr_sjc.pdf: 670956 bytes, checksum: 20e06db092150cbc839ecb8720e48261 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Em canais radiculares com polpa necrosada, a infecção é causada por diferentes bactérias, principalmente Gram-negativas anaeróbias facultativas e estritas, que, conseqüentemente, liberam diferentes endotoxinas durante sua duplicação ou morte celular. Os objetivos deste estudo foram: a) avaliar in vivo as quantidades de endotoxinas em canais radiculares com polpa necrosada, antes da realização do tratamento endodôntico; b) avaliar a efetividade do preparo biomecânico utilizando diferentes associações de agentes irrigantes [hipoclorito de sódio (NaOCl) 2,5%; NaOCl 2,5% + hidróxido de cálcio 0,14% e NaOCl 2,5% + polimixina B] sobre endotoxinas em canais radiculares; c) avaliar a ação da medicação intracanal (clorexidina gel 2% + hidróxido de cálcio) sobre endotoxinas; d) avaliar, durante todo o tratamento endodôntico, a produção de citocinas por macrófagos estimulados pelas amostras coletadas dos canais radiculares. Foram selecionados 33 dentes com necrose pulpar e lesão periapical visível radiograficamente e, imediatamente após o isolamento absoluto e acesso ao canal radicular foi realizada a primeira coleta. Os terços cervical e médio dos canais foram preparados com instrumentação oscilatória utilizando-se como solução irrigadora o hipoclorito de sódio 2,5% e para o preparo manual do terço apical os canais foram divididos em 3 grupos (n=11): G1) NaOCl 2,5%; G2) NaOCl 2,5% + água de cal (0,14%); G3) NaOCl 2,5% + polimixina B. Após o preparo biomecânico foi realizada a segunda coleta e, após a aplicação do EDTA, a terceira coleta. A quarta coleta foi realizada após 14 dias de medicação intracanal com pasta de clorexidina gel 2% + hidróxido de cálcio. Para todas as coletas foi realizada a quantificação de endotoxinas pelo teste cinético cromogênico do lisado de amebócitos de Limulus (LAL) e avaliação dos efeitos citotóxicos pela... / In radicular canals with necrotic pulp, infection is caused by several bacterium, mainly by the facultative anaerobic and strict Gram-negative, which, afterwards, release various endotoxins throughout its duplication or cellular death. This analysis aims at: a) evaluate in vivo the endotoxin amount in radicular canals with necrotic pulp, prior to endodontic treatment; b) evaluate the effects of biomechanical preparation using various associations of irrigating agents (sodium hypochlorite 2.5% + polymyxin B; sodium hypochlorite 2.5% + calcium hydroxide (0.14%) and sodium hypochlorite 2.5% on endotoxins in radicular canals; c)evaluate the intracanal gauge (2% chlorhexidine gel + calcium hydroxide) on endotoxins; d)evaluate, throughout the entire endodontic treatment, the macrophages cytokine output stimulated by the collected samples in radicular canals. 33 teeth, from various patients with necrotic pulp and periapical lesion visible on x-ray, were selected. The first sampling was performed immediately after the complete isolation and access into radicular canal. The cervical e medium thirds of the canals were prepared by using sodium hypochlorite 2.5% irrigating solution, and for the manual preparation of the apical third, the canals were divided into 3 groups (n=11): G1) sodium hypochlorite 2.5%; G2) sodium hypochlorite 2.5% + limewater (0.14%); G3) sodium hypochlorite 2.5% + polymyxin B. The second sampling was performed after the biomechanical preparation, and the third was performed 3 minutes after the EDTA was applied. The fourth sampling was performed after 14 days on intracanal medication of chlorhexidine gel 2% paste + calcium hydroxide. To all the samplings, endotoxin quantification was performed, using the Limulus amebocyte lysate (LAL) chromogenic kinetic test, and evaluating citotoxic effects due to the production of cytokines (IL-1, TNF-) in macrophage cultures... (Complete abstract click electronic access below)

SILVA, P. G. B. Expressão de marcadores inflamatórios na osteonecrose dos maxilares induzida por bisfosfonatos e efeito do tratamento crônico com ácido zoledrônico nos tecidos gengival e ósseodentário de ratos. 2016. 118 f. Tese (Doutorado em Odontologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-01-20T15:18:34Z No. of bitstreams: 1 2016_tese_pgbsilva.pdf: 8439068 bytes, checksum: eec500000ee5d63a08793ff09fbff38f (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-01-20T15:18:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_tese_pgbsilva.pdf: 8439068 bytes, checksum: eec500000ee5d63a08793ff09fbff38f (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-20T15:18:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_tese_pgbsilva.pdf: 8439068 bytes, checksum: eec500000ee5d63a08793ff09fbff38f (MD5) Previous issue date: 2016-11-22 / The Zoledronic Acid (ZA) is a bisphosphonate (BF) that can lead to immune-inflammatory dysregulation leading to Bisphosphonate-related Osteonecrosis of the Jaws (BRONJ). The objective of this study was to determine the cellular profile and the immune expression of inflammatory markers in mandibular bone of a BRONJ experimental model and in gingival and tooth of rats chronically treated with ZA. Materials and Methods: Male Wistar rats (180-220 g) were chronically infused (four times) venously with sterile saline or 0.04, 0.20 or 1.00 mg/kg of ZA and the left hemimandible was subjected to first molar exodontia (day 49). After 70 days we performed the euthanasia and the hemimandibles (right and left) were histologically and immunohistochemically analyzed (CD68, Tumor Necrosis Factor alpha (TNF-α), Interleukin(IL)-1β, inducible Nitric Oxide Synthases (iNOS), Nuclear Factor kappa B (NF-kB) and IL-18(bidding protein) bp). In bone subjected to exodontia (left hemimandible) we counted the viable and empty osteocyte lacunae, the viable and apoptotic osteoclasts, the polymorphonuclear neutrophils cells (PMN), mast cells and positive cytoplasmic cells for cited markers. Dental pulp and periodontium of first right molar (contralateral hemimandible) was histologically analyzed by presence of inflammatory cells, dilated/ectasic blood vessels (pulp only) and immunohistochemically by scores. We repeated the protocol (saline versus 0.20 mg/kg ZA) to dosage of TNF-α, IL-1β, myeloperoxidase (MPO), Malondialdehyde (MDA) e Glutathione (GSH) of gingiva of animals. Results: the BRONJ was observed in 0.20 mg/kg and 1.00 mg/kg ZA-treated animals that showed increase in percentage of empty osteocyte lacunae (p<0.001) and percentage of apoptotic osteoclast (p<0.001), total osteoclasts number (p=0.003), PMN (p=0.009), cytoplasmic positive cells for CD68 (p<0.001), TNF-α (p=0.001), IL-1β (p=0.001), iNOS (p<0.001) e NF-kB (p=0.006), and nuclear positivity for NF-kB (p=0.011). The immune expression of IL-18bp decreased dose dependently (p=0.005). In dental pulp there was augment in number of mononuclear CD68+ cells (p=0.026) and immunostaining for TNF-α (p=0.020), IL-1β (p=0.027), iNOS (p=0.001) in odontoblasts and IL-1β (p=0.027) in non odontoblasts dental pulp cells. In periodontium ZA treated animals showed an increase in number of animals showing inflammatory cells (p=0.001) and cytoplasmic immunostaining for TNF-α (p=0.003), IL-1β (p=0.004), iNOS (p=0.008) and NF-kB (p=0.025). MPO (p<0.001), TNF-α (p=0.002), IL-1β (p<0.001) and GSH (p=0.005) levels were significantly raised in 0.20 mg/kg ZA treated gingiva animals. Conclusion: There is overexpression of inflammatory markers in exodontia area with establishing of BRONJ. The chronic infusion of ZA raised the expression of inflammatory markers and cells in gingiva, periodontium and pulp tissue of rats. / O Ácido Zoledrônico (AZ) é um bisfosfonato (BF) capaz de causar desregulação imune-inflamatória estando associado à Osteonecrose dos Maxilares induzida por Bisfosfonatos (OMB). O objetivo deste estudo foi determinar o perfil celular e a imunoexpressão de marcadores inflamatórios do osso mandibular em modelo murino de OMB e nos tecidos gengival e osseodentário de ratos tratados cronicamente com AZ. Materiais e Métodos: Ratos Wistar machos (180-220g) foram submetidos a quatro infusões venosas de solução salina estéril ou AZ nas doses de 0,04, 0,20 ou 1,00 mg/kg, sendo o lado esquerdo submetido a exodontia do primeiro molar inferior (dia 49). Após 70 dias, realizou-se eutanásia e as mandíbulas dos animais foram hemisseccionadas (lados esquerdo e direito) e submetidas a análise histológica e técnica de imuno-histoquímica pelo método da estreptavidina-biotina-peroxidase para CD68, Fator de Necrose Tumoral alfa (TNF-α), Interleucina(IL)-1β, Óxido nítrico sintase induzida (iNOS), Fator Nuclear kappa B (NF-kB) e IL-18 bp (bindding protein). No tecido ósseo do lado submetido à exodontia (lado esquerdo), contaram-se as lacunas de osteócitos (vazias e preenchidas), osteoclastos (normais e apoptóticos), polimorfonucleares neutrófilos (PMN), mastócitos e células com marcação positiva para os marcadores supracitados. A polpa dentária e o periodonto do primeiro molar inferior direito (lado contralateral) foram analisados por microscopia de luz convencional quanto à presença de animais exibindo vasos dilatados/ectásicos (somente polpa dentária) e células inflamatórias. O estudo imuno-histoquímico foi realizado por meio da mesma técnica através de escores. O experimento foi repetido (infusão de salina versus AZ 0,20 mg/kg) para dosagem de TNF-α, IL-1β, mieloperoxidase (MPO), malanoaldeído (MDA) e glutationa (GSH) das gengivas excisadas cirurgicamente no dia da eutanásia dos animais. Resultados: a OMB foi observada nos animais tratados com 0,20 e 1,00 mg/kg de AZ com aumento do percentual de lacunas de osteócitos vazias (p<0.001) e osteoclastos apoptóticos (p<0.001), número total de osteoclastos (p=0.003), PMN (p=0.009) e células com positividade citoplasmática para CD68 (p<0.001), TNF-α (p=0.001), IL-1β (p=0.001), iNOS (p<0.001) e NF-kB (p=0.006), e positividade nuclear NF-kB (p=0.011). A imunoexpressão de IL-18bp foi reduzida de forma dose-dependente (p=0.005). Na polpa dentária, houve incremento do número de mononucleares CD68+ (p=0.026) e imunoexpressão de TNF-α (p=0.020), IL-1β (p=0.027), iNOS (p=0.001) em odontoblastos e IL-1β (p=0.027) em células não odontoblastos. No periodonto, observaram-se, nos grupos tratados com AZ, um aumento do número de células inflamatórias (p=0.001) e imunoexpressão citoplasmática para TNF-α (p=0.003), IL-1β (p=0.004), iNOS (p=0.008) e NF-kB (p=0.025). Os níveis de MPO (p<0.001), TNF-α (p=0.002), IL-1β (p<0.001) e GSH (p=0.005) estavam significantemente aumentados na gengiva dos animais tratados com 0,20 mg/kg de AZ. Conclusão: Conclui-se que há superexpressão de marcadores inflamatórios no sítio de exodontia não cicatrizado e com instalação da OMB. A infusão crônica de AZ mostrou-se capaz de aumentar a expressão de citocinas inflamatórias e do infiltrado inflamatório nos tecidos gengival e osseodentário de ratos.

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2015-03-25T14:16:42Z No. of bitstreams: 1 Tese_ICS_ Cíntia de Vasconcellos Machado.pdf: 3205260 bytes, checksum: 8572ede4b113272c3ea3454723532c79 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-25T14:16:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_ICS_ Cíntia de Vasconcellos Machado.pdf: 3205260 bytes, checksum: 8572ede4b113272c3ea3454723532c79 (MD5) / Fapesb / O objetivo deste estudo foi detectar, através da imunohistoquímica, células positivas para os marcadores STRO-1 e CD90, os quais são usualmente utilizados para caracterizar célulastronco mesenquimais (MSCs), assim como para a ALDH (aldeído desidrogenase), enzima que tem sido empregada na identificação de células-tronco hematopoiéticas e também tumorais, na polpa de dentes permanentes jovens. Da mesma forma, foi avaliada a expressão dos marcadores ALDH, STRO-1 e CD44 em células-tronco da polpa de dentes decíduos (SHEDs), permanentes (DPSCs) e fibroblastos da polpa (HDPFs), através da citometria de fluxo e western blot. Para a análise imunohistoquímica, a polpa dental de nove terceiros molares e pré-molares hígidos foi coletada, fixada e processada. SHEDs, DPSCs e HDPFs foram cultivadas em meio DMEM/HEPES, suplementado com soro fetal bovino a 10%, 100U/mL de penicilina, 100μg/mL de estreptomicina e armazenadas em estufa a 37ºC e 5% de CO2. A reação imunohistoquímica mostrou células imunomarcadas com ALDH, CD90 e STRO-1 essencialmente nos espaços perivasculares e nas fibras nervosas da polpa, embora o STRO-1 tenha apresentado uma expressão menos pronunciada. Foi demonstrada uma forte marcação para a ALDH e para o STRO-1 através do western blot em SHEDs, DPSCs e HDPFs, enquanto que as células apresentaram uma fraca expressão para o CD44. Não foram observadas diferenças na intensidade das bandas entre os três tipos de células para os marcadores testados. Já na análise de citometria de fluxo, todas as células apresentaram valores percentuais altos para o CD44 e relativamente baixos para o STRO-1 e para a ALDH. Os resultados sugerem que as células-tronco pulpares residem nas proximidades dos vasos sanguíneos e das fibras nervosas deste tecido, visto que células positivas para marcadores associados às mesmas foram detectadas nestas áreas. Da mesma forma, apontam para a possibilidade de existência de mais de um nicho de MSCs na polpa dentária. Ainda, sugerem que SHEDs, DPSCs e fibroblastos podem compartilhar algumas características importantes, como a expressão de determinados marcadores

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Odontologia, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2016-09-20T04:31:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 340354.pdf: 1524038 bytes, checksum: f77f0c2ce406fc64da4df7465217fc36 (MD5) Previous issue date: 2016 / No tratamento endodôntico de dentes permanentes imaturos despolpados o preparo mecânico do canal é desaconselhado para não fragilizar ainda mais a estrutura dental. A abordagem clássica permite a desinfecção do canal radicular pelo preparo químico com soluções antimicrobianas e medicação intracanal, mas não a retomada do processo de rizogênese para a complementação do canal radicular. A neoformação de tecido pulpar, por abordagem de engenharia tecidual, tem potencial para melhor resolver essas situações clínicas. Com o uso do Modelo de Fatia Dental/Arcabouço para Engenharia de Tecido Pulpar o objetivo deste trabalho foi desenvolver polpas dentais com morfologia e função semelhantes àquelas do tecido original, em dentinas submetidas a tratamentos com diferentes materiais endodônticos. Para tanto, após o acesso endodôntico e a aplicação dos protocolos de tratamento com hipoclorito de sódio, EDTA, pasta de hidróxido de cálcio ou triantibiótica, fatias de 1 mm de espessura foram obtidas da região cervical de molares, seguido pela produção de arcabouço sintético no espaço da câmara pulpar e semeadura de células-tronco de polpa de dentes permanentes humanos (DPSC). O conjunto fatia dental/arcabouço/células foi implantado em tecido subcutâneo de camundongos. Depois de 35 dias, os implantes foram removidos e processados para análise histo-morfológica, imuno-histoquímica, e microscopia eletrônica confocal. Os resultados das análises histológicas mostraram que houve formação tecidual em todos os grupos, com destaque para o grupo tratado pela pasta Triantibiótica. Da análise em microscopia confocal conclui-se que, mesmo quando tratada por soluções irrigadoras ou pastas antimicrobianas, a dentina apresentou condições de servir como substrato para a sobrevivência e a diferenciação das DPSC em odontoblastos funcionais, com capacidade de deposição de matriz dentinária.<br> / Abstract : In the endodontic treatment of immature permanent teeth, mechanical preparation of the root canal is not recommended to do not further weaken the tooth structure. The classical approach allows the disinfection of the root canal by chemical preparation with antimicrobial solutions and intracanal dressing, but not the resumption of the root formation process for the completion of root canal. The pulp tissue neoformation by tissue engineering approach has the potential of better solving these clinical situations. Using the Tooth Slice/Scaffold Model for Dental Pulp Tissue Engineering, the aim of this study was to develop dental pulps with similar morphology and function to those of the original tissue, in dentin subjected to treatments with different materials. For this purpose, after the endodontic access and application of the treatment protocols with sodium hypochlorite, EDTA, calcium hydroxide or triple antibiotic pastes, 1 mm slices from the cervical region of third molars were obtained, followed by the production of a synthetic polymeric scaffold within the pulp chamber and seeding of dental pulp stem cells from human permanent teeth (DPSC). Tooth slice/scaffold/cells sets were implanted subcutaneously in mice. After 35 days, the implants were retrieved and processed for histo-morphological, immunohistochemical, and confocal electron microscopy analyzes. The results of histological analyzes showed that there was tissue formation in all groups, especially the group treated by triple antibiotic paste. From the confocal microscopy analysis, it was concluded that even when treated by irrigating solutions or antimicrobial pastes, dentin is able to serve as substrate for survival and differentiation of DPSC in functional odontoblasts, with dentin matrix deposition capacity.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2017. / Texto parcialmente disponibilizado pelo autor. Conteúdo restrito: Apêndices. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-07-26T15:02:39Z No. of bitstreams: 1 2017_DonaldManigat_PARCIAL.pdf: 621102 bytes, checksum: 1f0b1edf50dddf5686b5208b044257b7 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2017-08-11T18:31:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_DonaldManigat_PARCIAL.pdf: 621102 bytes, checksum: 1f0b1edf50dddf5686b5208b044257b7 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-11T18:31:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_DonaldManigat_PARCIAL.pdf: 621102 bytes, checksum: 1f0b1edf50dddf5686b5208b044257b7 (MD5) Previous issue date: 2017-08-11 / A identificação e caracterização de moléculas capazes de modular a resposta inflamatória pulpar, facilitando ou mesmo promovendo o reparo dentinário oferecem imenso potencial para aumentar o sucesso na manutenção da vitalidade do dente. Neste sentido, os receptores gama e beta/delta ativados por proliferadores peroxissomais (PPARγ e PPAR β/δ), por apresentarem efeitos anti-inflamatórios, configuram-se como alvos farmacológicos potenciais. Enquanto a expressão do PPAR β/δ e sua participação na fisiopatologia pulpar ainda não foram exploradas, a capacidade do PPARγ em modular alguns aspectos inflamatórios em células da polpa já foi demonstrada. Porém, aspectos celulares relacionados com o reparo dentinário não foram avaliados. Assim, como objetivo da primeira parte deste trabalho, investigou-se o efeito da rosiglitazona (RSG), um agonista total do PPARγ sobre a viabilidade (MTT), apoptose (anexina-V FITC /iodeto de propídeo), migração (scratch) e diferenciação osteo/odontogênica de células da polpa dentária humana (vermelho de alizarina S e expressão gênica). Os resultados mostraram que RSG não interferiu na viabilidade, na apoptose ou na migração de células pulpares. Quanto a diferenciação, os resultados com coloração indicaram que RSG estimulou formação precoce de matriz mineralizada e a análise da expressão gênica revelou um aumento significativo da expressão de osteopontina nos grupos tratados com RSG. Como objetivos da segunda parte, a expressão do PPAR β/δ por células pulpares foi verificada (RT-PCRq e imunofluorescência). Posteriormente, essas células foram tratadas com LPS (Escherichia coli) ou H2O2 e o potencial do GW0742, agonista total do PPAR β/δ, em modular a inflamação foi explorado, por meio de análise da expressão gênica de citocinas e metaloproteinases (RT-PCRq), por análise da atividade de gelatinases (zimografia) e por ensaio de quimiotaxia com cocultura em transwell, sendo macrófagos murinos imortalizados RAW 264.7 as células submetidas a atração quimiotática por células pulpares. Células RAW 264.7 também foram estimuladas com LPS e a expressão gênica de citocinas inflamatórias foi analisada (RT-PCRq). Por fim, o efeito do GW0742 sobre o reparo começou a ser investigado neste estudo, por meio da análise da migração de células pulpares (scracth). Os resultados mostraram expressão de PPAR β/δ (transcrito e proteína). O tratamento com GW0742 reprimiu a expressão do RNAm de IL6, IL1β , MCP1 e MMP1 em células pulpares estimuladas com LPS ou H2O2, e de Il6 e Tnfα em células RAW 264.7 estimuladas com LPS. GW0742 reduziu a atividade de MMP2 e de MMP9, em células pulpares estimuladas com 2μg/mL ou 10 μg/mL de LSP, respectivamente. Além disso, o tratamento com GW0742 reduziu significativamente a capacidade de células pulpares estimuladas com LPS em recrutar macrófagos RAW 264.7. Por fim, GW0742 não interferiu na migração de células pulpares. Os resultados da primeira parte deste trabalho sugerem que RSG parece não alterar eventos celulares relacionados com o reparo dentinário. Quanto a segunda parte, esta indica que GW0742 possa modular a resposta inflamatória pulpar, sugerindo um efeito anti-inflamatório do receptor PPAR β/δ ativado. / Identification and characterization of molecules able to dampen inflammatory events within the dental pulp, facilitating or even promoting dentinal repair offer immense potential to increase the success in maintaining the tooth vitality. Due to anti-inflammatory properties, the peroxisome proliferator-activated receptors gamma and beta/dela (PPARγ and PPAR β/δ) could be envisioned as putative therapeutic targets. While neither PPAR β/δ expression nor its participation within the pulp pathophysiology were explored, the ability of PPARγ to modulate some inflammatory aspects in pulp cells has been demonstrated previously. However, cellular aspects related to dentine repair were not assessed. Thus, the aim of the first part of this study was to evaluate the effects of rosiglitazone (RSG), a PPARγ full agonist, on human dental pulp cells (hDPCs) viability (MTT), apoptosis (annexin-V FITC and propidium iodide), migration (scratch) and osteo/odontogenic differentiation (alizarin red and RT-qPCR). RSG did not affect cell viability, apoptosis/necrosis or cell migration. Whereas, alizarin red S showed that RSG stimulated early formation of mineralized matrix. Gene expression analysis revealed a significant increase in osteopontina mRNA expression at the RSG-treated groups. As the aim of the second part of this study, hDPCs PPAR β/δ expression was verified (RT-qPCR; immunofluorescence). Thereafter, hDPCs were treated with LPS or H2O2, and the anti-inflammatory ability of GW0742, a PPAR β/δ full agonist, was assessed by cytokine and metalloproteinases mRNA expression assay (RT-qPCR), gelatinase activity assay (zymography), and chemotaxis assay with transwell co-culture. In this system, an immortalized murine macrophage cell line, RAW 264.7, was attracted by hDPCs. In addition, RAW 264.7 cells were treated with LPS and GW0742, and cytokines mRNA expression was assessed (RT-qPCR). Finally, the effect of GW0742 on pulp repair was initiated through hDPCs migration assay (scracth). The results showed hDPCs PPAR β/δ expression (transcript and protein). GW0742 repressed IL6, IL1β, MCP1 and MMP1 gene expression in LPS/H2O2 treated hDPCs. Il6 and Tnfα mRNA expression was repressed by GW0742 in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. GW0742 reduced MMP2 and MMP9 activity in pulp cells stimulated with 2μg / mL or 10μg / mL of LSP, respectively. In addition, treatment with GW0742 significantly reduced the ability of LPS-stimulated pulp cells to recruit RAW 264.7 macrophages. Finally, GW0742 did not impair hDPCs migration. The results of the first part of this study suggested that RSG appear does not impair cellular events related with dentin repair. The second part indicates that GW0742 can modulate pulp inflammatory response, suggesting an anti-inflammatory effect of activated PPARβ/δ receptor.

Banca: Márcia Carneiro Valera Garakis / Banca: Carlos Henrique Ribeiro Camargo / Banca: Márcia Martins Marques / Banca: Giulio Gavini / Banca: Caio Cezar Randi Ferraz / Resumo: O estudo da polpa dentária pode se desdobrar desde fatores relacionados à sua agressão até àqueles relacionados a novos conceitos de regeneração. A proposta desta compilação de estudos é a de apresentar a evolução de uma linha de pesquisa desde a agressão até o reparo. Inicialmente, estudos demonstrarão a capacidade de procedimentos odontológicos em gerar calor e consequentemente afetar a polpa dental. Em sequência, estudos apresentarão alguns efeitos de diferentes materiais de capeamento pulpar em células da polpa dentária, relacionados à citotoxicidade e potencial inflamatório destes materiais. Finalmente, como um assunto emergente que vem ganhando importância na literatura, esta compilação apresentará dados de estudos recentes sobre o papel de células progenitoras na regeneração e reparo da polpa dentária, bem como uma alternativa de scaffold que pode ser utilizado para translação clínica da pesquisa neste campo. Em resumo, o profissional de odontologia deve estar atento para estes diferentes aspectos e para o fato de que o conhecimento de fatores e mecanismos envolvidos na agressão da polpa dentária podem também servir de base para o entendimento dos aspectos da regeneração / Abstract: The study of the dental pulp can be extended from factors related to its aggression to those related to new concepts of regeneration. The purpose of this compilation of studies is to present the evolution of a research subject from damage to repair. Innitially, studies will demonstrate the ability of dental procedures to generate heat and consequently affect the dental pulp. In sequence, studies will also present some effects of different pulp capping materials on dental pulp cells, related to the cytotoxicity of these materials and inflammatory potential. Finally, as the subject is emmerging and gaining importance in the literature, this compilation will present data from recent studies on the role of dental pulp progenitor cells in the regeneration and repair of dental pulp, as well as an alternative for a scaffold that could be used for clinical translation of research in the field. In summary, dentists must be aware of these different aspects and that the knowledge on factors and mechanisms involved in the aggression of the dental pulp can also serve as basis for understanding aspects for regeneration

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004-02-28Bitstream added on 2014-06-13T18:52:21Z : No. of bitstreams: 1 silva_rsf_me_arafo.pdf: 1174318 bytes, checksum: f42c1309d76c33e103772ad2f159706b (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito do emprego do curativo de demora à base de hidróxido de cálcio na reparação apical e periapical após tratamento endodôntico de dentes de cães sem vitalidade pulpar, com ou sem lesão periapical visível radiograficamente. Os canais radiculares de 80 raízes de pré-molares superiores e inferiores foram submetidos ao método de indução experimental de lesões periapicais ou mantidos expostos ao meio bucal por 30 dias para contaminação. Realizado o preparo biomecânico, os canais radiculares foram obturados em única sessão ou receberam curativo de demora com pasta à base de hidróxido de cálcio por 15 dias, quando foram obturados com cimento AH Plus. Após o período de 180 dias os animais foram mortos e as peças submetidas ao processamento histológico e coradas pelo HE e Tricrômico de Mallory para avaliação da influência da presença da lesão periapical radiográfica e do emprego do curativo de demora na reparação apical e periapical. Os resultados obtidos demonstraram que o curativo de demora à base de hidróxido de cálcio foi de fundamental importância para a reparação dos tecidos apicais e periapicais, com diferença significante com relação aos grupos obturados em sessão única (p<0,05). / The aim of this study was to evaluate the apical and periapical repair after endodontic treatment of teeth with pulp necrosis, with or without radiographic chronic periapical lesion in mongrel dogs. Eighty root canals of premolars teeth were used. Half of them was submitted to the experimentally induced chronic lesions method and the others was opened to the oral environment for 30 days for contamination. After biomechanical preparation, the root canals were filled in a single visit or they received a root canal dressing with calcium hydroxide for 15 days before root canal filling with AH Plus sealer. The animals were killed, after 180 days, by anesthetic overdose, and the histological sections were stained with H/E and Mallory Trichromic for microscopic evaluation of the influence of radiographic periapical lesion and the use of root canal dressing in the apical and periapical repair. The obtained results showed that the intracanal dressing based on calcium hydroxide was essential to the repair of the apical and perapical tissues, with significant difference to the groups filled in a single visit (p<0,5).

Submitted by Lorraine Perciliano de Faria (lorrainepfaria@gmail.com) on 2016-09-23T00:11:39Z No. of bitstreams: 1 faria_lp_me_araca.pdf: 9564996 bytes, checksum: 7d650da8a1ba19bcb41f7762cfe24b29 (MD5) / Approved for entry into archive by Felipe Augusto Arakaki (arakaki@reitoria.unesp.br) on 2016-09-26T18:40:20Z (GMT) No. of bitstreams: 1 faria_lp_me_araca.pdf: 9564996 bytes, checksum: 7d650da8a1ba19bcb41f7762cfe24b29 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-26T18:40:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 faria_lp_me_araca.pdf: 9564996 bytes, checksum: 7d650da8a1ba19bcb41f7762cfe24b29 (MD5) Previous issue date: 2016-08-22 / As alterações teciduais decorrentes da movimentação dentária induzida (MDI) são constantemente estudadas, pois não estão completamente estabelecidas na literatura. Porém a maioria dos estudos descreve as alterações que a MDI provoca no periodonto e poucos em relação às alterações pulpares. O objetivo desse trabalho foi avaliar as alterações pulpares após a movimentação dentária induzida com diferentes tipos de força. Ratos da linhagem Wistar foram submetidos à movimentação dentária dos primeiros molares superiores direitos com os seguintes tipos de força: força contínua (FC), força contínua interrompida (FCI) e força intermitente (FI), nos períodos de 5, 7 e 9 dias. Os incisivos superiores direitos foram submetidos à exodontia e reimplante imediato com o objetivo de induzir a anquilose para servirem de ancoragem. Foram instaladas molas de NiTi com liberação de 50cN de magnitude de força, sendo mantidas, desativadas ou removidas, em determinados períodos, para estabelecer os tipos de força sobre os molares. Os grupos foram avaliados histologicamente quanto ao padrão de celularidade, presença de alterações distróficas, hemodinâmicas e dentinárias. As alterações pulpares foram somente hemodinâmicas, como a presença de trombose, congestão vascular e hemorragias. Não houve diferença estatisticamente significantes entre os diferentes tipos de força sobre o tecido pulpar dos molares movimentados. Conclui-se que as alterações histológicas no tecido pulpar decorrentes da MDI, concentraram-se nos eventos hemodinâmicos, não progredindo para degenerações irreversíveis, independentemente do tipo de força empregada. / The tissue changes caused by induced tooth movement (ITM) are constantly studied, as they are not fully established in the literature. Most studies have described the reactions in the periodontium and few cases regarding pulp changes related. The aim of this study was to evaluate the pulp changes after ITM with different types of strength. Wistar rats were submitted to dental movement of the first molars rights with the following types of power: continuous force (CF), interrupted continuous force (ICF) and intermittent force (IF), in periods of 5, 7 and 9 days. The upper right incisors were subjected to extraction and reimplantation immediately with the aim of inducing ankylosis to serve as anchorage. NiTi springs were installed with release 50cN magnitude of force, being held, disabled or removed in certain periods, to establish the types of force on the molars. The groups were evaluated histologically as the pattern of cellularity, presence of dystrophic, hemodynamic and dentinal changes. Were found hemodynamic changes as the presence of thrombosis, vascular congestion and bleeding. There was no statistically significant difference between the different types of force on the pulp tissue damage. We conclude that the histological changes in the pulp tissue due was focused on hemodynamic events, not progressing to irreversible degeneration, regardless of the type of force used.

Orientador: Elisa Maria Aparecida Giro / Resumo: Esta pesquisa teve como objetivo avaliar a resposta do tecido pulpar de dentes de macacos-prego exposto mecanicamente e capeado com proteínas bioativas extraídas da dentina de incisivos de coelhos ou pasta de hidróxido de cálcio, precedidas ou não de uma aplicação do laser de baixa intensidade. Para o experimento foram selecionados 36 dentes de 4 macacos-prego, os quais foram divididos aleatoriamente nos seguintes grupos: G1: pasta de hidróxido de cálcio em água destilada, G2: laser + pasta de hidróxido de cálcio em água destilada, G3: proteína bioativa, G4: laser + proteína bioativa, G5: laser e G6: controle hígido. Cavidades classe V foram confeccionadas na face vestibular dos dentes. Após exposição mecânica da polpa, diferentes terapias foram realizadas de acordo com os grupos experimentais. As cavidades foram restauradas com cimento de óxido de zinco e eugenol e amálgama. Decorrido o período experimental de 180 dias, os animais foram sacrificados, os dentes removidos e preparados para análise histológica. Os resultados mostraram que não houve diferença estatisticamente significante entre os grupos experimentais para os eventos histopatológicos resposta celular inflamatória, desorganização tecidual e presença de bactérias coradas. No entanto, em relação à formação de barreira mineralizada, o grupo que recebeu como material capeador a pasta de hidróxido de cálcio precedida ou não da aplicação do laser apresentou as melhores respostas com formação de barreiras mineralizadas espessas e homogêneas. Concluiu-se que o laser de baixa intensidade aplicado previamente ao capeamento pulpar direto, não melhorou de forma significativa a resposta do tecido pulpar aos materiais capeadores empregados. A pasta de hidróxido de cálcio, aplicada sobre as polpas expostas, caracterizou os melhores resultados de reparação tecidual quando comparada às proteínas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this in vivo study was to evaluate the response of the dental pulp capped with bioactive proteins extracted from rabbit incisors dentin or calcium hydroxide paste, associated or not to a low energy laser irradiation. Thirty-six teeth of four non-human primates were randomly divided in the following groups: G1: calcium hydroxide paste; G 2: laser + calcium hydroxide paste; G3: bioactive proteins; G4: laser + bioactive proteins; G5: laser; G6: sound teeth (control). Deep class V cavities were prepared on the buccal surface of the teeth. The pulp tissue was mechanically exposed and capped with the experimental materials. The cavities were filled-up with zinc-oxide and eugenol cement and amalgam. After the postoperative period of 180 days, the animals were sacrificed and the teeth processed for histological evaluation. The histopathological analysis showed no statistical difference among the experimental groups regarding to the inflammatory cell response, tissue disorganization and stained bacteria. However, pulps capped with calcium hydroxide, regardless the low-energy laser irradiation, exhibited the best responses, with thick and homogeneous hard tissue barriers. It was concluded that the low-energy laser irradiation preceding the direct pulp capping did not improve the pulp tissue healing and dentin matrix deposition. Pulps capped with calcium hydroxide paste showed better results when compared to those capped with bioactive proteins regarding to the hard tissue barrier formation. / Doutor