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Determinação da carga parasitária por PCR semiquantitativa em diferentes tecidos de cães naturalmente infectados por Leishmania(Leishmania) chagasi e sua associação com sinais clínicos da doença. / Determination of the parasite load by PCR in semiquantitative Different tissues of dogs naturally infected with Leishmania (Leishmania) chagasi and its association with clinical signs of disease.

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Previous issue date: 2007-09-25 / FUNDAÇÃO DE AMPARO À PESQUISA E AO DESENVOLVIMENTO CIENTIFICO E TECNOLÓGICO DO MARANHÃO / The municipal district of Raposa located in the State of Maranhão, Brazil, is an
endemic area of human and canine visceral leishmaniasis. Dogs are considered to be
the principal Leishmania chagasi reservoir in this location. The objective of this study
was to examine the relative levels of parasitic DNA in different tissues of infected
dogs and their association with clinical signs of Leishmaniasis. We initiated this study
by collecting blood samples from 233 distinct dogs that were analyzed by means of
serological diagnosis. Of all examined dogs, 69 were positive in the anti-Leishmania
ELISA. According to technical reasons only 27 of the Leishmania infected dogs could
be recaptured and studied. The animals were classified according to their clinical
signs in asymptomatics (10 animals), oligosymptomatics (8 animals) and
polysymptomatics (9 animals) groups. A quantitative PCR method was developed and
established in order to examine the parasitic load in blood, bone marrow, lymph node,
spleen and skin. The parasite could be detected in lymph nodes of all animals
analyzed (100%). The tissue with the highest parasitic load was lymph nodes followed
by spleen, blood, bone marrow and skin. Comparing all analyzed tissues, the lymph
nodes presented the highest levels of parasitic DNA, without exception, regardless
their symptoms classification. Contrary to various other studies, we have detected the
lowest parasitic DNA concentration in skin tissues. The quantitative PCR assay
established in this study was sensitive, fast and inexpensive for qualitative and
quantitative analyses of the Leishmania chagasi DNA. The canine lymph node is the
most frequently infected tissue, with greater levels of parasitic DNA, and may be
considered a target tissue for leishmaniasis monitoring in dogs. / O município de Raposa (Maranhão, Brasil) é uma área endêmica de
leishmaniose visceral humana e canina. Neste município, cães são considerados o
principal reservatório de Leishmania chagasi. O objetivo deste estudo foi investigar a
concentração do DNA parasitário em diferentes tecidos de cães infectados e sua
associação com sinais clínicos de leishmaniose. Iniciamos este estudo com a coleta de
sangue de 233 cães para diagnóstico sorológico da infecção. Dentre todos os cães
examinados, 69 apresentaram anticorpos anti-Leishmania no teste ELISA. Destes,
apenas 27 puderam ser recapturados e estudados. Os animais foram classificados de
acordo com avaliação clínica em assintomáticos (n=10); oligossintomáticos (n=8) e
polissintomáticos (n=9). A técnica de PCR quantitativa foi desenvolvida e
padronizada para avaliar a concentração de DNA parasitário em sangue, medula,
linfonodo, baço e pele. O parasito foi detectado em todas as amostras de linfonodo
analisadas (100%). O tecido com os maiores níveis de DNA parasitário foi o
linfonodo, seguido pelo baço, sangue, medula e pele. Comparando-se os tecidos
analisados, o linfonodo foi o tecido com as maiores cargas parasitárias, sem exceção,
entre animais assintomáticos, oligossintomáticos e polissintomáticos. Contrariamente
a outros estudos, detectamos baixos níveis de DNA parasitário em amostras de pele. A
PCR quantitativa padronizada neste estudo foi um método sensível, rápido e
econômico para detectar e determinar os níveis de DNA parasitário de Leishmania
chagasi. Em cães, o linfonodo é o tecido mais acometido pelo parasito e com maiores
níveis de DNA, podendo ser considerado o sítio ideal para o monitoramento da
leishmaniose canina.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:tede2:tede/1043
Date25 September 2007
CreatorsCarvalho, Cristiane Costa de
ContributorsPereira, Silma Regina Ferreira, Rebêlo, José Manuel Macário
PublisherUniversidade Federal do Maranhão, PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM SAÚDE E AMBIENTE/CCBS, UFMA, BR, SAÚDE E MEIO AMBIENTE
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFMA, instname:Universidade Federal do Maranhão, instacron:UFMA
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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