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Previous issue date: 2008-02-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / In Northeastern Brazil, the food lack on the low pluviometric index period is one of the factors that interfere on the goat reproduction, in spite of these animals be adapted to this region. The Aim of this study was to evaluating the effect of high (HPI) and low (LPI) pluviometric index on the proteins profile of goat semen of the American Alpine race raised on Camocim de São Félix, Pernambuco. It was realized semen collection by artificial vagina method during two years (2005, 2006). The semen samples were submitted to macroscopic (color, volume and appearance) and microscopic (progressive motility, vigor, concentration, morphology, and acrosome and DNA integrity) analyses and then divided into aliquots to realize the procedures: 1) freezing (0.5 mL), 2) protein dosages (1 mL) and 3) analysis of acrosome and DNA integrity (± 0.5 mL). The samples were packed in straws (0.25 mL), freezing in machine TK3000 (-0.25 °C/min, 25 °C to 5 °C, and - 20 °C/min of 5 °C to -120 °C) and stored in cryobiologic container (-196 C). After thawing (37 ° C, 30 seconds), the samples were evaluated to progressive motility (PM), vigor and acrosome and DNA integrity. The semen protein profile was conducted through the analysis of two-dimensional electrophoresis, after determination of total protein for standardization of the protein amount applied in gel electrophoresis. On the in natura semen, there was no significant difference (P>0.05) on the PM among animals and between LPI (79.82%) and HPI (81.25%) periods, as well as on sperm vigor on the LPI (4.17) and HPI (4.00) periods. However, it was observed higher(P<0.05) percentage of sperm with intact acrosome on semen collected on HPI (90.25%) than LPI (80.26%). After thawing, it was observed significant difference (P<0.05) on the PM of the samples obtained during the LPI (60.00%) and HPI (71.30%) periods, and no significant difference (P>0.05) on the cells with intact acrosome on the LPI (67.98%) and HPI (66.83%). In the protein samples extracted of in nature and thaw sperm membrane, 56 and 165 spots of proteins were identified with 25 to 103.0 kDa and 9.0 to 131.0 kDa, and with 3.36 to 9.74 and 3.37 to 8.80 pIs, respectively. On the evaluation of the seminal plasma proteins were detected 96 spots of protein, with 49 spots in the LPI period (15 to 97 kDa, 4.48 to 9.83 pI) and 47 spots in the HPI period (4 to 106 kDa and 3.00 to 8.96 pI). The periods HPI and LPI had 22 common spots of proteins, corresponding to 45.83% of similarity among spots analyzed. In the gel analysis of the thawed semen samples it was observed increase of protein spots number than in natura semen. It is suggested that groups of proteins of low molecular mass of seminal plasma membrane and the sperm of goats are responsible for sperm motility and the presence of a group of proteins on 14-15 kDa and 45kDa are responsible for the viability of the sperm cells in this experiment. / Na região Nordeste do Brasil, a ausência de alimentos no período de baixo índice pluviométrico é um dos fatores que mais interferem na reprodução dos caprinos, apesar destes animais estarem bem adaptados a esta região. Objetivando avaliar o efeito dos períodos de alto (AIP) e baixo (BIP) índice pluviométrico no perfil de proteínas do sêmen de caprinos da raça Alpina Americana criados no Município de Camocim de São Felix (Pernambuco), foram realizadas colheitas de sêmen pelo método de vagina artificial em dois anos consecutivos (2005 e 2006). As amostras de sêmen foram submetidas à análise macroscópica (cor, volume e aspecto) e microscópica (motilidade progressiva, vigor, concentração, morfologia, integridade de acrossoma e DNA) e, a seguir, divididas em alíquotas com a finalidade de realizar os procedimentos de: 1) congelação (0,5 mL), 2) dosagem de proteínas (1 mL) e 3) análise de integridade de acrossoma e de DNA (± 0,5mL). As amostras foram envasadas em palhetas (0,25 mL), criopreservadas em máquina TK3000 (- 0,25 ºC/min, de 25 ºC a 5 ºC, e a – 20 ºC/ min, de 5 ºC a -120 ºC) e armazenadas em botijão criobiológico (-196 oC). Após descongelação (37 oC; 30 segundos), as amostras foram avaliadas quanto a motilidade progressiva (MP), vigor, integridade de acrossoma e de DNA. O perfil de proteínas das membranas espermáticas e do plasma seminal foi realizado através da análise de eletroforese bidimensional, após dosagem de proteína total para padronização da quantidade de proteínas aplicadas no gel de eletroforese. No sêmen in natura, não seobservou diferença significativa (P>0,05) na motilidade progressiva (MP) entre animais e entre os períodos BIP (79,82%) e AI (81,25%), assim como no vigor espermático nos períodos BIP (4,17) e AIP (4,00). Porém foi observado maior (P<0,05) porcentual de espermatozóides com acrossomas integros colhidos no período AIP (90,25%) do que no BIP (80,26%). Após descongelação, constatou-se diferença significativa (P<0,05) na MP das amostras colhidas nos períodos BIP (60,00%) e AIP (71,30%), e não significativa (P>0,05) no porcentual de células com acrossomas íntegros no BIP (67,98%) e AIP (66,83%). Nas amostras de proteínas extraídas da membrana de espermatozóides in natura e descongelado, foram identificados 56 e 165 spots de proteínas com 25 a 103,0 kDa e 9,0 a 131,0 kDa, e com pIs 3,36 a 9,74 e de 3,37 a 8,80, respectivamente. Na avaliação das proteínas do plasma seminal foram detectados 96 spots de proteínas, sendo 49 spots no período BIP (15 a 97 kDa e pI de 4,48 a 9,83) e 47 spots no período AIP (4 a 106 kDa e pI de 3,00 a 8,96). Os períodos AIP e BIP apresentaram 22 spots de proteínas comuns, correspondendo a 45,83% de similaridade entre os spots analisados. Na análise dos géis das amostras de sêmen descongelado, constatou-se aumento do número de spots de proteínas focalizados. Sugere-se que os grupos de proteínas de baixa massa molecular do plasma seminal e da membrana espermática de caprinos interferem na motilidade espermática; e que um grupo de proteínas de 14-15 kDa e 45kDa atua na viabilidade das células espermáticas.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:tede2:tede2/5109 |
| Date | 25 February 2008 |
| Creators | SOUZA, Andreia Fernandes de |
| Contributors | GUERRA, Maria Madalena Pessoa, PORTO, Ana Lucia Figueiredo, MOURA, Arlindo de Alencar Araripe Noronha, SILVA, Antonio Rodrigues da, BICUDO, Sony Dimas, LIMA FILHO, José Luis de, CARVALHO, Francisco Fernando Ramos de |
| Publisher | Universidade Federal Rural de Pernambuco, Programa de Pós-Graduação em Ciência Veterinária, UFRPE, Brasil, Departamento de Medicina Veterinária |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRPE, instname:Universidade Federal Rural de Pernambuco, instacron:UFRPE |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | -3061482854177903105, 600, 600, 600, 600, -3020210563763616780, 453670264235017319, 2075167498588264571 |
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