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Previous issue date: 2010 / A febre maculosa é uma doença transmitida por carrapatos e tem como agente etiológico bactérias do gênero Rickettsiia, envolvendo no ciclo da Febre Maculosa Brasileira, cães, roedores e marsupiais como reservatórios vertebrados e carrapatos e pulgas como seus vetores invertebrados com os humanos atuando como hospedeiros acidentais, e constituindo elo terminal no ciclo dessas bactérias. A patogenicidade atribuída a estes microorganismos é ainda desconhecida para varias espécies, bem como os fatores de risco, demográficos e sazonais relacionados às respectivas doenças ocasionadas. Para a realização deste estudo, foram selecionados dois municípios do estado de Minas Gerais com prévio histórico de ocorrência destas enfermidade em humanos, sendo dois casos recentes no município de Pingo D'água, localizado na região do Vale do Rio Doce e o município de Santa Cruz do Escalvado, localizado no Vale do Piranga, Zona da Mata Mineira, estado de Minas Gerais foco antigo para riquetsioses, que sofreu alteração recente em sua paisagem natural, devido a construção de uma usina hidrelétrica na localidade de Soberbo no ano de 2004. Assim, com o objetivo de melhor compreender a atual situação epidemiológica das riquetsioses nesses municípios, dentro de uma concepção de ocupação e transformação do espaço geográfico por ação antrópica, buscou-se avaliar o nível de contato destes agentes nas populações de animais domésticos e sinantrópicos, realizaram-se ensaios sorológicos e ferramentas da biologia molecular. Eqüinos, cães, roedores e gambás foram capturados e identificados, tendo sido ainda coletadas
amostras de soro bem como ectoparasitas. Dos roedores capturados foram colhidas amostras de tecidos (fígado e baço), e dos gambás amostras de sangue total, sendo realizado ainda nestes animais colheita de material por swab anal. Das amostras de sangue, tecidos, ectoparasitas e swabs anal extraiu-se DNA, que foram amplificadas através de PCR usando oligonucleotídeos iniciadores para amplificação gênero específica do gene da citrato sintase (gltA). Os produtos amplificados obtidos foram visualizados em gel de agarose a 1,5%. Apenas amostras de ectoparasitas das espécies Amblyomma cajennense coletados de cães, eqüinos, gambás-Didelphis aurita e Ctenocefalides canis e Ctenocefalides felis em pulgas de gambás apresentaram resultados positivos à PCR. As amostras de soros de animais silvestres e domésticos foram investigadas quanto à presença de anticorpos reativos à antígenos de Rickettsia rickettsii, Rickettsia parkeri, Rickettsia felis, Rickettsia belli, Ricketssia rhipicephali e Rickettsia amblyommii pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI). Amostras que apresentaram títulos iguais ou superiores a 1:64 foram considerados positivas para Rickettsia. No município de Pingo D’ Água das 46 amostras de soros de roedores analisadas, dentre estas 31 da espécie Rattus rattus, 7 Oryzomys subflavus, 7 Nectomys squamipes e 1 Bolomys sp. 26 (83,88%) das amostras de R. rattus, seis (85,72%) das amostras de Oryzomys e Nectomys e a única amostra de soro de Bolomys analisada apresentaram resultados positivos para bacterias do grupo da febre maculosa. No município de Santa Cruz do Escalvado das 62 amostras de soro de roedores analisadas, dentre estas 32 da espécie R. rattus, 2 Oryzomys subflavus, e 23 Nectomys squamipes e 5 Akodon sp. 30 amostras de R. rattus testadas, 30 foram reativas à RIFI para Rickettsia do Grupo das Febres Maculosas, totalizando 93,75% das amostras. Os dados sorológicos obtidos nos municípios de Pingo D’ Água e Santa Cruz do Escalvado, apontam a espécie R. rattus como a mais representativa entre os roedores, o que a credencia para participação no ciclo enzoótico das riquetsioses nas referidas regiões. Levando em consideração o agravante de essa ser a espécie mais sinantrópica em relação às outras estudadas neste projeto, é importante atentar-se para o possível risco de dispersão de organismos do gênero Rickettsia por esses animais no município. Foram analisadas ainda 42 amostras de soros de eqüinos e 24 amostras de soros de cães provenientes de Pingo D’ Água, com reatividade sorológica contra riquétsias do GFM em 16 (38,09%) dentre as amostras de eqüinos e em duas (8,33%) dentre as amostras de cães. Em Santa Cruz do Escalvado foram analisadas 66 amostras de soros de eqüinos e 67 amostras de soros de cães, verificando-se uma sororeatividade contra riquétsias do GFM em dez (15,15%) dentre as amostras de soros de eqüinos e em 14 (20,89%) dentre as amostras de soros de cães. Das 38 amostras de soro de D. aurita coletados no município de Santa Cruz do Escalvado, em 16 verificou-se a presença de Rickettsia, sendo que em 42,1% dos soros foram reativos contra R. rickettsii, 39,5% contra R. parkeri, 18,4% contra de R. amblyommi e 2,6% contra R. felis. Os achados sorológicos e de biologia molecular obtidos neste trabalho recomendam a manutenção de uma vigilância epidemiológica permanente nos municípios estudados, bem como em seu entorno, buscando-se desta maneira evitar a ocorrência de novos casos humanos causada pela invasão destes focos naturais pelo homem ou pela dispersão de potenciais reservatórios e vetores de agentes riquetsiais para novas áreas do estado
___________________________________________________________________________________________________________________________________________________ / Spotted fever is a disease transmitted by ticks presenting as his etiological
agent bacteria of the genus Rickettsia. Involved in her natural cycle, dogs, rodents, and
marsupials actuated as vertebrate reservoirs, been ticks, and fleas the invertebrates
vectors. Humans actuating as accidental hosts are becoming the final link in the cycle
of these bacteria. The pathogenicity attributed to these microorganisms is still unknown
for several of the Rickettsia species, including the involved factors of risk and the
demographic and seasonal factors related. For this study, we selected two counties in
the state of Minas Gerais, Brazil, that have prior history of occurrence of this disease in
humans: Pingo D'Água, located in Vale do Rio Doce, with two recent cases reported,
and Santa Cruz do Escalvado, located in Vale do Piranga, Zona da Mata Mineira, a
former focus for rickettsial diseases, which has suffered recent change in their natural
landscape due to the construction of a hydroelectric plant in the town of Superb in
2004. Thus, in order to better understand the current epidemiological situation of the
rickettsial diseases in these municipalities, under a conception of occupation and
transformation of geographic space by anthropic actions, we sought to evaluate the
level of transmission of these agents in populations of domestic and synanthropic
animals, realizing serological and molecular biology assays. Horses, dogs, rodents and
opossums were captured and identified, from whom were collected serum samples and
ectoparasites. From rodents captured were collected samples of tissues (liver and
spleen). From opossums were collected samples of whole blood and anal swab. From
blood, tissues, ectoparasites, and anal swabs were extracted DNA samples, which
were subsequently amplified by PCR using primers for amplification of Rickettsia
genus-specific citrate synthase gene (gltA). The amplified products obtained were
visualized in agarose gel 1.5%. Only samples of parasites of the species Amblyomma
cajennense collected from dogs, horses, and opossums, and fleas (Ctenocefalides
canis and Ctenocefalides felis) collected from opossums tested positive by
PCR. Serum samples from wild and domestic animals were investigated by
Immunofluorescence Assay (IFA) for the presence of antibodies reactive to antigens of
Rickettsia rickettsii, Rickettsia parkeri, Rickettsia felis, Rickettsia belli, Rickettsia
rhipicephali and Rickettsia amblyommii. Samples that had titers equal or greater than
1:64 in the IFA were considered positive for Rickettsia. In the municipality of Pingo
D’Água, from 46 serum samples rodents tested, among these 31 species of Rattus
rattus, seven Oryzomys subflavus, seven Nectomys squamipes, and one Bolomys sp.,
26 (83.88%) samples of R. rattus, six (85.72%) samples of Oryzomys and Nectomys,
and the single serum sample of Bolomys examined were positive for bacteria of the
spotted fever group (SFG). In Santa Cruz do Escalvado, serum samples from 62
rodents tested, among these 32 species of R. rattus, two Oryzomys subflavus and five
Nectomys squamipes, and 23 Akodon sp., 30 samples of R.rattus were reactive by IFA
for Rickettsia agents from the SFG, totaling 93.75% of the samples. The serological
data obtained in the municipalities of Pingo D'Água and Santa Cruz do Escalvado,
indicated that the species R. rattus is the most representative among the rodents,
which accredits to participate in the enzootic cycle of rickettsial diseases in these
regions. Taking into account the aggravating factor that is the most synanthropic
species over all others studied in this project, it is important to pay attention to the
possible risk of dispersal of the genus Rickettsia by these animals in the
municipalities. We also analyzed serum samples of 42 horses and 24 serum samples
of dogs from Pingo D'Água, which showed serological reactivity against rickettsiae from
SFG. Sixteen (38.09%) among the samples from horses and two (8, 33%) among the
samples of dogs tested showed positive results. In Santa Cruz do Escalvado were we
analyzed 66 serum samples from horses and 67 serum samples from dogs, were found
a seroreactivity against rickettsiae organisms of SFG in ten (15.15%) among the serum
samples of horses and in 14 (20 89%) among the serum samples of dogs tested. Of 38
serum samples from D. aurita collected in Santa Cruz do Escalvado, in 16 were verified
the response against Rickettsia, been 42.1% of sera reactive against R. rickettsii,
39.5% against R. parkeri, 18.4% against R. amblyomma and 2.6% against R. felis. The
findings of serological and molecular biology in this work recommend the maintenance
of effective epidemiological surveillance in the municipalities studied, as well as its
surroundings, searching in this way avoid the occurrence of new human cases of
outbreaks caused by invasion by man or by natural dispersal of potential reservoirs and
vectors for Rickettsia to new areas of the state.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:localhost:123456789/2491 |
| Date | January 2010 |
| Creators | Milagres, Bruno Silva |
| Contributors | Galvão, Márcio Antônio Moreira |
| Publisher | Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto. |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFOP, instname:Universidade Federal de Ouro Preto, instacron:UFOP |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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