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Previous issue date: 2015-02-27 / CAPES / O gênero Phoradendron Nutt. compreende um grande número de espécies hemiparasitas conhecidas popularmente como ervas-de-passarinho. A medicina popular atribui a este gênero algumas propriedades farmacológicas como: cicatrizante, analgésica e anticancerígena. Assim, o objetivo desse trabalho foi realizar um estudo fitoquimico e biológico dos extratos das folhas de Phoradendron microphyllum e Phoradendron mucronatum. Os constituintes químicos dos extratos obtidos por maceração em hexano, diclorometano, clorofórmio e acetato de etila foram analisados por CG/EM. A atividade citotóxica desses extratos foi avaliada utilizando as linhagens celulares HEp-2, NCI-H292, MCF-7. Além desses, foram realizados estudos com os extratos metanólicos das folhas de ambas as espécies. O perfil fitoquímico foi analisado por cromatografia em camada delgada, com diferentes fases móveis e reveladores. O conteúdo de fenóis totais foi determinado pelo método de Folin-Ciocalteu; o teor de flavonóides totais pelo complexo formado entre o flavonóide e o alumínio reagente; o teor de taninos pela precipitação com caseína e a atividade antioxidante pelo método de sequestro do radical DPPH. Para avaliação do potencial hemolítico foram usados eritrócitos de camundongos Swiss (Mus musculus) e nos ensaios de citotoxicidade foram utilizadas as linhagens celulares HEp-2, NCI-H292, MCF-7. A atividade antimicrobiana foi realizada pelo método de difusão em Ágar. Para determinação da toxicidade aguda foram utilizados camundongos Swiss, aos quais foram administrados uma dose de 2.000 mg/kg por via oral. A atividade anti-inflamatória foi analisada pelos métodos de bolsão de ar subcutâneo e permeabilidade vascular induzida por ácido acético. O potencial cicatrizante dos extratos em feridas cutâneas foi realizado em ratos Wistar (Rattus norvegicus) por meio de avaliações histológicas. A análise por CG/EM dos extratos das folhas de P. microphyllum e P. mucronatum, possibilitou detectar 51 constituintes de diferentes classes de compostos e apresentaram atividade citotóxica frente as três linhagens testadas. No extrato metanólico das folhas, o perfil fitoquímico evidenciou: açucares redutores, flavonóides, alcalóides, triterpenos/esteróides, monoterpenos, sesquiterpenos e diterpenos, proantocianidinas e leucoantocianidina. O conteúdo fenólico total dos extratos metanólicos das folhas de P. microphyllum e P. mucronatum foi 479,64 ± 44,07 e 139,42 ± 10,78 mg equivalente de ácido tânico/g dos extratos, respectivamente. O extrato metanólico de P. mucronatum apresentou atividade antioxidante. Os extratos metanólicos se mostraram inativos frente à hemólise das hemácias e apresentaram atividade citotóxica frente à linhagem HEp-2. Não foi evidenciada atividade bacteriana frente às linhagens testadas, exceto para o fungo Candida albicans. No ensaio de toxicidade aguda, os animais apresentaram algumas reações tóxicas, porém não letais na dose administrada. Os extratos metanólicos reduziram a migração celular assim como inibiram o aumento da permeabilidade vascular em camundongos com o tratamento por via oral. O creme contendo os extratos metanólicos das folhas de P. mucronatum e P. microphyllum apresentou efeito cicatrizante, reduzindo a área de contração da ferida. Os resultados obtidos mostram que P. microphyllum e P. mucronatum podem ser uma fonte de metabólitos secundários além de apresentar atividades biológicas significativas. No entanto, estudos posteriores serão necessários para isolar e identificar os principais constituintes químicos assim como os possíveis mecanismos de ação envolvidos nas atividades. / The genus Phoradendron Nutt. comprises a large number of hemiparasite species popularly known as herbs-to-bird. Popular medicine attributes to this genus some pharmacological properties such: healing, analgesic and anti-cancer. Thus, the objective of this work was to carry out a phytochemical and biological study of leaves extracts of Phoradendron microphyllum and Phoradendron mucronatum. The chemical constituents of extracts obtained by maceration in hexane, dichloromethane, chloroform and ethyl acetate were analyzed by GC/MS. The cytotoxic activity of these extracts was evaluated using the Hep-2, NCI-H292, MCF-7 cell lines. In addition, studies were carried out with the methanolic extracts of leaves of both species. The phytochemical profile was analyzed by thin layer chromatography, with different mobile phases and revelators. The content of total phenols was determined by the Folin-Ciocalteu method; the total flavonoid content by the complex formed between the flavonoid and the aluminum reagent; the tannin content by casein precipitation and the antioxidant activity by the DPPH radical sequestration method. In order to evaluate the hemolytic potential, erythrocytes of Swiss mice (Mus musculus) were used and the cell lines HEp-2, NCI-H292, MCF-7 were used in the cytotoxicity assays. The antimicrobial activity was performed by the diffusion method in Agar. To determine the acute toxicity, Swiss mice were given a dose of 2,000 mg/kg orally. The anti-inflammatory activity was analyzed by the methods of pockets of subcutaneous air and vascular permeability induced by acetic acid. The wound healing potential of extracts from cutaneous wounds was performed in Wistar rats (Rattus norvegicus) by means of histological evaluations. GC/MS analysis of leaves extracts of P. microphyllum and P. mucronatum allowed to detect 51 constituents of different classes of compounds and presented cytotoxic activity against the three strains tested. In the methanolic extract of the leaves, the phytochemical profile evidenced: reducing sugars, flavonoids, alkaloids, triterpenes/steroids, monoterpenes, sesquiterpenes and diterpenes, proanthocyanidins and leucoantocianidina. The total phenolics contente of the methanolic extracts of the P. microphyllum and P. mucronatum leaves was 479.64 ± 44.07 and 139.42 ± 10.78 mg tannic acid equivalent/g of the extracts, respectively. The methanolic extract of P mucronatum showed antioxidant activity. The methanolic extracts proved inactive against the erythrocyte hemolysis and showed cytotoxic activity against the HEp-2 lineage. There was no evidence of bacterial activity against the tested strains, except for the fungus Candida albicans. In the acute toxicity test, the animals had some toxic but non-lethal reactions at the dose administered. The methanolic extracts reduced cell migration as well as inhibited increased vascular permeability in mice with oral treatment. The cream containing the methanolic extracts of leaves of P. microphyllum and P. mucronatum showed wound healing effects, reducing wound contraction area. The results obtained show that P. mucronatum and P. microphyllum can be a source of secondary metabolic compounds besides showing significant biological activities. However, further studies will be needed to isolate and identify the main chemical constituents as well as the possible mechanisms of action involved in the activities.
Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/23799 |
Date | 27 February 2015 |
Creators | BASTOS, Isla Vanessa Gomes Alves |
Contributors | http://lattes.cnpq.br/4180003655165233, MELO, Sebastião José de |
Publisher | Universidade Federal de Pernambuco, Programa de Pos Graduacao em Ciencias Biologicas, UFPE, Brasil |
Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
Language | Breton |
Detected Language | English |
Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
Rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
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