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Phoradendron mucronatum (DC.) Krug & Urb. E Phoradendron microphyllum (Pohl ex DC.) Trel.: Componentes químicos e bioatividade

BASTOS, Isla Vanessa Gomes Alves 27 February 2015 (has links)
Submitted by Rafael Santana (rafael.silvasantana@ufpe.br) on 2018-02-20T19:15:38Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Tese Isla 08 02 17.pdf: 1341172 bytes, checksum: b9215289b9e41f4bc9bfda4d3ddbaaff (MD5) / Made available in DSpace on 2018-02-20T19:15:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Tese Isla 08 02 17.pdf: 1341172 bytes, checksum: b9215289b9e41f4bc9bfda4d3ddbaaff (MD5) Previous issue date: 2015-02-27 / CAPES / O gênero Phoradendron Nutt. compreende um grande número de espécies hemiparasitas conhecidas popularmente como ervas-de-passarinho. A medicina popular atribui a este gênero algumas propriedades farmacológicas como: cicatrizante, analgésica e anticancerígena. Assim, o objetivo desse trabalho foi realizar um estudo fitoquimico e biológico dos extratos das folhas de Phoradendron microphyllum e Phoradendron mucronatum. Os constituintes químicos dos extratos obtidos por maceração em hexano, diclorometano, clorofórmio e acetato de etila foram analisados por CG/EM. A atividade citotóxica desses extratos foi avaliada utilizando as linhagens celulares HEp-2, NCI-H292, MCF-7. Além desses, foram realizados estudos com os extratos metanólicos das folhas de ambas as espécies. O perfil fitoquímico foi analisado por cromatografia em camada delgada, com diferentes fases móveis e reveladores. O conteúdo de fenóis totais foi determinado pelo método de Folin-Ciocalteu; o teor de flavonóides totais pelo complexo formado entre o flavonóide e o alumínio reagente; o teor de taninos pela precipitação com caseína e a atividade antioxidante pelo método de sequestro do radical DPPH. Para avaliação do potencial hemolítico foram usados eritrócitos de camundongos Swiss (Mus musculus) e nos ensaios de citotoxicidade foram utilizadas as linhagens celulares HEp-2, NCI-H292, MCF-7. A atividade antimicrobiana foi realizada pelo método de difusão em Ágar. Para determinação da toxicidade aguda foram utilizados camundongos Swiss, aos quais foram administrados uma dose de 2.000 mg/kg por via oral. A atividade anti-inflamatória foi analisada pelos métodos de bolsão de ar subcutâneo e permeabilidade vascular induzida por ácido acético. O potencial cicatrizante dos extratos em feridas cutâneas foi realizado em ratos Wistar (Rattus norvegicus) por meio de avaliações histológicas. A análise por CG/EM dos extratos das folhas de P. microphyllum e P. mucronatum, possibilitou detectar 51 constituintes de diferentes classes de compostos e apresentaram atividade citotóxica frente as três linhagens testadas. No extrato metanólico das folhas, o perfil fitoquímico evidenciou: açucares redutores, flavonóides, alcalóides, triterpenos/esteróides, monoterpenos, sesquiterpenos e diterpenos, proantocianidinas e leucoantocianidina. O conteúdo fenólico total dos extratos metanólicos das folhas de P. microphyllum e P. mucronatum foi 479,64 ± 44,07 e 139,42 ± 10,78 mg equivalente de ácido tânico/g dos extratos, respectivamente. O extrato metanólico de P. mucronatum apresentou atividade antioxidante. Os extratos metanólicos se mostraram inativos frente à hemólise das hemácias e apresentaram atividade citotóxica frente à linhagem HEp-2. Não foi evidenciada atividade bacteriana frente às linhagens testadas, exceto para o fungo Candida albicans. No ensaio de toxicidade aguda, os animais apresentaram algumas reações tóxicas, porém não letais na dose administrada. Os extratos metanólicos reduziram a migração celular assim como inibiram o aumento da permeabilidade vascular em camundongos com o tratamento por via oral. O creme contendo os extratos metanólicos das folhas de P. mucronatum e P. microphyllum apresentou efeito cicatrizante, reduzindo a área de contração da ferida. Os resultados obtidos mostram que P. microphyllum e P. mucronatum podem ser uma fonte de metabólitos secundários além de apresentar atividades biológicas significativas. No entanto, estudos posteriores serão necessários para isolar e identificar os principais constituintes químicos assim como os possíveis mecanismos de ação envolvidos nas atividades. / The genus Phoradendron Nutt. comprises a large number of hemiparasite species popularly known as herbs-to-bird. Popular medicine attributes to this genus some pharmacological properties such: healing, analgesic and anti-cancer. Thus, the objective of this work was to carry out a phytochemical and biological study of leaves extracts of Phoradendron microphyllum and Phoradendron mucronatum. The chemical constituents of extracts obtained by maceration in hexane, dichloromethane, chloroform and ethyl acetate were analyzed by GC/MS. The cytotoxic activity of these extracts was evaluated using the Hep-2, NCI-H292, MCF-7 cell lines. In addition, studies were carried out with the methanolic extracts of leaves of both species. The phytochemical profile was analyzed by thin layer chromatography, with different mobile phases and revelators. The content of total phenols was determined by the Folin-Ciocalteu method; the total flavonoid content by the complex formed between the flavonoid and the aluminum reagent; the tannin content by casein precipitation and the antioxidant activity by the DPPH radical sequestration method. In order to evaluate the hemolytic potential, erythrocytes of Swiss mice (Mus musculus) were used and the cell lines HEp-2, NCI-H292, MCF-7 were used in the cytotoxicity assays. The antimicrobial activity was performed by the diffusion method in Agar. To determine the acute toxicity, Swiss mice were given a dose of 2,000 mg/kg orally. The anti-inflammatory activity was analyzed by the methods of pockets of subcutaneous air and vascular permeability induced by acetic acid. The wound healing potential of extracts from cutaneous wounds was performed in Wistar rats (Rattus norvegicus) by means of histological evaluations. GC/MS analysis of leaves extracts of P. microphyllum and P. mucronatum allowed to detect 51 constituents of different classes of compounds and presented cytotoxic activity against the three strains tested. In the methanolic extract of the leaves, the phytochemical profile evidenced: reducing sugars, flavonoids, alkaloids, triterpenes/steroids, monoterpenes, sesquiterpenes and diterpenes, proanthocyanidins and leucoantocianidina. The total phenolics contente of the methanolic extracts of the P. microphyllum and P. mucronatum leaves was 479.64 ± 44.07 and 139.42 ± 10.78 mg tannic acid equivalent/g of the extracts, respectively. The methanolic extract of P mucronatum showed antioxidant activity. The methanolic extracts proved inactive against the erythrocyte hemolysis and showed cytotoxic activity against the HEp-2 lineage. There was no evidence of bacterial activity against the tested strains, except for the fungus Candida albicans. In the acute toxicity test, the animals had some toxic but non-lethal reactions at the dose administered. The methanolic extracts reduced cell migration as well as inhibited increased vascular permeability in mice with oral treatment. The cream containing the methanolic extracts of leaves of P. microphyllum and P. mucronatum showed wound healing effects, reducing wound contraction area. The results obtained show that P. mucronatum and P. microphyllum can be a source of secondary metabolic compounds besides showing significant biological activities. However, further studies will be needed to isolate and identify the main chemical constituents as well as the possible mechanisms of action involved in the activities.
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Avaliação do biopolímero extraído da cana-de-açúcar no modelo experimental de lesão do tendão do calcâneo de ratos

ESTEVES, Ana Cristina Falcão 23 August 2016 (has links)
Submitted by Rafael Santana (rafael.silvasantana@ufpe.br) on 2018-02-23T19:18:01Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Projeto do doutorado Ana Cristina.pdf: 5804344 bytes, checksum: 37e215398861855af58fd81e48168fff (MD5) / Made available in DSpace on 2018-02-23T19:18:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Projeto do doutorado Ana Cristina.pdf: 5804344 bytes, checksum: 37e215398861855af58fd81e48168fff (MD5) Previous issue date: 2016-08-23 / Wistar, distribuídos aleatoriamente em 3 grupos: Grupo Controle (GC, n=16) sem lesão tendínea; Grupo Experimental 1 (GE1, n=19) com secção transversa completa (tenotomia) no ponto médio do tendão e subsequente sutura; e Grupo Experimental 2 (GE2, n=20) com tenotomia, seguida de sutura envolvida pelo filme de biopolímero. O Índice Funcional de Aquiles (IFA) demonstrou diferença em todos os dias pós-operatórios (dpo), quando comparado os grupos experimentais com o GC, mas não houve diferença entre o GE1 e GE2. Nos parâmetros biomecânicos, a Força Máxima foi maior no GE1 e no GE2 em relação ao GC; o mesmo ocorreu na Deformação na Força Máxima. A Tensão na Força Máxima foi menor nos grupos experimentais, bem como a Energia/Área e no Módulo Elástico em relação ao GC. A Área de Secção Transversa apresentou diferença entre os três grupos, GE2 apresentando o maior valor. Na avaliação histomorfométrica, o número de fibroblasto foi superior no GE1 e GE2 comparado ao GC, o número de fibrócitos foi diferente nos grupos entre si, com o GE1 apresentando o maior número. Além disso, o GE1 apresentou maior número de vasos sanguíneos quando comparado aos outros dois grupos. Na análise estrutural dos vasos sanguíneos dos tendões, a marcação específica para actina músculo liso foi superior no grupo GE2 em relação aos outros grupos e essa ocorreu principalmente no componente muscular dos vasos. Com estes resultados conclui-se que o biopolímero de cana-de-açúcar pode ser utilizado como suporte no processo de cicatrização tendínea, pois não prejudicou as características tendíneas ao final do experimento e parece ter histologicamente, acelerado o processo de cicatrização. / The study evaluated the functional, biomechanical and morphological scope application of biopolymer sugarcane as support for the healing of the Achilles tendon. Were used, fifty-five male rats, albino Wistar were randomly divided into 3 groups: control group (CG, n = 16) without tendon injury; Experimental Group 1 (EG1, n = 19) with full cross section (tenotomy) at the midpoint and subsequent suturing the tendon; and Experimental Group 2 (SG2, n = 20) with tenotomy followed by suturing biopolymer enveloped by film. The Functional Index Achilles (IFA) showed differences in all postoperative days (postoperative day) compared the experimental groups with the GC, but no difference between SG1 and SG2. In biomechanical parameters, the Maximum Force was higher in SG1 and SG2 in relation to CG, the same outcome occurred with Deformation. The voltage was lower in the experimental groups and Energy / Area and the elastic modulus compared to GC. Section Transverse area was different between the three groups, SG2 presenting the highest value. The number of fibroblasts was higher in SG1 and SG2 compared to GC (GC = 96.80 ± 51.52; SG1 = 866.83 ± 163.84; SG2 = 802.58 ± 139.78; GCxGE1, p = 0.000; GCxGE2, p = 0.000), the number of fibrocytes was different in groups with each other, the SG1 presenting the highest number. In addition, the SG1 showed more blood vessels compared to the other two groups. In the structural analysis of the blood vessels of the tendons, specific labeling for smooth muscle actin was higher in SG2 group in relation to other groups. The labeling occurred mainly in the muscular component of the vessels. With these results it is concluded that the biopolymer sugarcane can be used as supported on tendon healing process because it does not impaired the characteristics tendinous end of the experiment and appears to have histologically accelerated the healing process.
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Cinética biomolecular de fatores de crescimento e colágeno envolvidos na cicatrização de pele tratada com plasma rico em plaquetas pobre em leucócitos: modelo experimental em equinos / Molecular kinetics of growth factors and collagen involved in the healing of skin treated with leukocyte-poor platelet-rich plasma: an experimental model in horses

Pinto, José de Oliveira 26 April 2016 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-09-13T17:30:24Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 9773762 bytes, checksum: b94ff1440ca1e45d2b23084129752e99 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-13T17:30:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 9773762 bytes, checksum: b94ff1440ca1e45d2b23084129752e99 (MD5) Previous issue date: 2016-04-26 / A pele é um dos órgãos mais importantes do corpo. Embora haja controvérsias, o plasma rico em plaquetas e pobre em leucócitos (PRP-PL), fonte de fatores de crescimento, é considerado eficaz em acelerar o processo de cicatrização de diversos tecidos. O objetivo desse estudo foi avaliar o processo de cicatrização por segunda intenção de feridas cutâneas de equinos tratadas (T) ou não (NT) com dose única de PRP-PL, 12 horas após indução cirúrgica da lesão. Foram utilizados oito equinos com idade entre 16 a 17 anos. Três feridas com 6,25 cm2 foram produzidas na região glútea direita e esquerda de todos os animais, nomeadas A, B e C, respectivamente. Doze horas após indução das lesões, 0,5 mL de PRP-PL autólogo, foram administrados em cada extremidade das feridas. Cinco biópsias de pele foram obtidas com Punch de 6-mm. A primeira amostra foi obtida com bisturi, no momento de indução da lesão (T0). As amostras obtidas com um (T1) e dois dias (T2), assim como com uma (T3) e duas (T4) semanas foram realizadas a partir das feridas A e B. A ultima biópsia (T5), realizada aproximadamente aos 37 dias, foi realizada na lesão C, após completo fechamento macroscópico da pele. Exsudação, presença de crosta e de tecido de granulação, assim como a evolução do fechamento da ferida foram diariamente verificados. Os retalhos de tecido cutâneo foram obtidos para determinação da expressão dos colágenos tipo I e III por qRT-PCR e quantificação dos fatores de crescimento TGF-β1 e PDGF-BB na pele, PRP e plasma sanguíneo por ELISA. Também foram obtidas amostras para histomorfometria, coloração hematoxilina-eosina e Tricrômico de Masson. Várias análises estatísticas foram realizadas, sendo adotado um nível de significância de 5%. Não houve alterações entre grupos nas variáveis estudadas durante avaliação física e laboratorial. Não houve diferença entre grupos no tempo para fechamento das feridas, embora tenha sido discretamente mais rápido nas lesões não tratadas. Diferenças (p<0,05) entre grupos foram observadas para a expressão dos colágenos tipos I e III no T1 e T4, sendo maior nas feridas tratadas. O pico de expressão dos colágenos tipos I e III ocorreu aos 37 dias, para ambos os grupos, mas a maior expressão foi diferente (p<0,05) da observada no T0, a partir de uma semana. Nas lesões tratadas a expressão dos colágenos começou a estabilizar na avaliação final, enquanto que nas NT os valores permaneceram elevados (p>0,05). Não houve diferença entre os grupos, nos valores dos dois fatores de crescimento mensurados na pele, nos diferentes tempos. Também não houve correlação entre a quantidade dos fatores de crescimento presentes na pele e no plasma. Por outro lado, correlação positiva foi observada entre PRP-PL e a pele na lesão tratada, para os fatores de crescimento TGF-β1 (r=0,31) e PDGF-BB (r=0,38), bem como entre ambos os fatores de crescimento presentes no PRP-PL (r=0,81). Considerando as concentrações dos fatores de crescimento no T0, maiores valores cutâneos (p<0,05) do TGF-β1, em ambos os grupos, ocorreram com uma semana e na avaliação final. Valores mais elevados (p<0,05) do PDGF-BB foram com duas semanas (T) e quando a ferida estava macroscopicamente fechada (NT). No plasma não houve alteração nas concentrações desses fatores em relação ao T0, o que sugere que o PRP- PL não ocasiona efeito sistêmico, quando os procedimentos adotados no presente estudo são utilizados. Avaliação histológica revelou diferença entre grupos na contagem dos leucócitos totais (p=0,0179) e fibrócitos (p=0,023), que foi maior e menor no grupo tratado, nos tempos 14 e 7 dias depois de produzida a lesão cirúrgica, respectivamente. A morfofometria revelou que com duas semanas havia maior quantidade de vasos sanguíneos (p=0,034) nas feridas tratadas. Na sequência os valores se aproximaram dos observados nas feridas não tratadas. Administração local dose única de PRP-PL, aplicada 12 horas após indução cirúrgica de ferida realizada na região glútea de equinos, não altera o fechamento macroscópico da ferida; ocasiona importante aumento da expressão gênica dos colágenos tipos I e III; não aumenta a expressão local de TGF-β1 e PDGF-BB durante diferentes fases do processo de cicatrização. Também não altera a concentração no plasma sanguíneo desses fatores de crescimento 1, 2, 7, 14 e 37 dias após administração. Além disso, durante as fases de migração e proliferação, assim como a de contração e remodelação se observa maiores concentrações desses fatores de crescimento, quando comparadas com as fases de hemostasia e inflamatória; aumenta a infiltração de neutrófilos na fase inflamatória; acarreta elevação da angiogênese duas semanas após tratamento, sem interferência microscópica na fase final do processo cicatricial e, finalmente, promove, percentualmente, cicatrização de melhor qualidade, no momento em que as feridas se encontram macroscopicamente fechadas. / The skin is one of the most important organs of the body. Although there is controversy, leukocyte-poor platelet-rich plasma (LP-PRP), a source of growth factors, is considered effective in accelerating the healing process of various tissues. The aim of this study was to evaluate the process of healing by secondary intention of horse skin wounds treated (T) or untreated (UT) with a single dose of LP-PRP 12 hours after surgical induction of injury. Eight horses with ages between 16-17 years were used. Three wounds measuring 6.25 cm2 were produced in the right and left gluteal regions and craniocaudal direction of all animals, named A, B, and C, respectively. Twelve hours after injury induction, 0.5 mL of autologous LP-PRP was administered to each edge of wounds. Five skin biopsies were obtained with a 6-mm Punch. The first sample was obtained with a scalpel at injury induction (T0). Samples obtained at one (T1) and two days (T2) and at one (T3) and two (T4) weeks were taken from wounds A and B. The last biopsy (T5), performed approximately at 37 days, was done in wound C, after complete macroscopic skin closure. Secretion, clot formation, presence of crust, and granulation tissue, as well as the evolution of wound closure were checked daily. Cutaneous tissue fragments were obtained for determination of the expression of types I and III collagens by RT-qPCR and quantification of growth factors TGF-β1 and PDGF- BB on skin, PRP, and blood plasma by ELISA. Samples were also taken for histomorphometry, processed as routine, and stained with hematoxylin-eosin and Masson's trichrome. Several tests were used to statistical analysis. The significance level adopted was 5%. The physical and laboratory evaluation did not indicate significant changes. There was no difference between groups for the time of wound closure development, although it was slightly faster in UT wounds. Differences (p<0.05) between groups were observed for the expression of types I and III collagen at T1 and T4, but higher in treated wounds. The peak expression of types I and III collagen occurred at 37 days for both groups, but the highest expression was significantly different (p<0.05) from that observed at T0, after one week. In treated wounds, the expression of collagens began to stabilize in the final assessment, whereas in UT, values remained elevated (p>0.05). There was no difference between groups for the values of the two growth factors measured in the skin at different times. There was also no correlation between the amount of the growth factors present in skin and plasma. On the other hand, a positive correlation was observed between LP-PRP and skin in the treated wound for growth factors TGF-β1 (r=0.31) and PDGF-BB (r=0.38) and between both growth factors present in LP-PRP (r=0.81). Regarding the concentrations of growth factors at T0, greater skin values (p<0.05) of TGF-β1 in both groups occurred at one week in the final assessment. Higher (p<0.05) PDGF-BB values occurred at two weeks (T) and when the wound was macroscopically closed (UT). In the plasma, there was no change in concentrations of these factors in relation to T0, which suggests that LP-PRP does not cause any systemic effect when the procedures adopted in the present study are employed. Histological evaluation revealed differences between the groups for the count of total leukocytes (p=0.0179) and fibrocytes (p=0.023), which was higher and lower in the treated group at 14 and 7 days after the surgical injury was produced, respectively. Morphometric analysis revealed that at two weeks there was a greater amount of blood vessels (p=0.034) in treated wounds. Subsequently, the values approached those presented in UT wounds. Local administration single dose of PRP-PL, applied 12 hours after surgical induction of wound made in the gluteal region of horses, does not alter the macroscopic wound closure; it causes important increase in gene expression of collagen types I and III; it does not increase the local expression of TGF-β1 and PDGF-BB during different phases of the healing process. In addition, does not change in the blood and plasma concentration of these growth factors at 1, 2, 7, 14 and 37 (approximately) days after administration. Moreover, during the phases of migration and proliferation, as well as of contraction and remodeling cause greater concentrations of these growth factors TGF- β1 and PDGF-BB when compared with the stages of hemostasis and inflammation; increased neutrophil infiltration in inflammatory phase; results in increase of angiogenesis two weeks after treatment, with no microscopic interference in the final phase of the healing process, and finally away promotes, in percentage, better quality of healing when the wounds are closed macroscopically.
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Epitelização de enxertos cutâneos em feridas recentes de coelhos tratados com membrana amniótica canina e/ou laserterapia

Reis Filho, Nazilton de Paula [UNESP] 28 July 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-12-10T14:22:53Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-07-28. Added 1 bitstream(s) on 2015-12-10T14:29:06Z : No. of bitstreams: 1 000855344.pdf: 2800080 bytes, checksum: 79f362b62618513eb3e196fe52ffff6b (MD5) / A enxertia cutânea é uma técnica cirúrgica simples e bastante útil para o reparo de feridas, principalmente nas quais existe dificuldade da aplicação do fechamento primário, ou de outras técnicas reconstrutivas. Entretanto, para a sobrevivência do enxerto, é necessário que o leito da ferida esteja saudável e com a presença de um tecido de granulação exuberante. O objetivo deste trabalho foi avaliar a aplicação da membrana amniótica e da laserterapia como potenciais estimulantes da cicatrização em enxertos aplicados em feridas sem tecido de granulação. Para isso, foram utilizados 42 coelhos divididos em quatro grupos de tratamento, grupo controle (GC), grupo membrana (GM), grupo laser (GL) e grupo membrana e laser (GML), submetidos a avaliações macro e microscópicas dos enxertos. Na avaliação macroscópica foi possível notar que os pacientes dos grupos onde a membrana amniótica foi utilizada com o intuito de estimular a reepitelização (GM e GML) apresentaram acentuada reação inflamatória, falha de integração do enxerto e consequente necrose do mesmo. Já os pacientes do grupo GL apresentaram melhor aspecto do enxerto no último dia de avaliação. Na análise microscópica, observou-se intensa integração do enxerto à derme, reepitelização acentuada e escassas células inflamatórias no local do enxerto nos pacientes do grupo GL. O oposto foi observado nos pacientes dos grupos GM e GML, onde aparentemente a presença da membrana amniótica induziu resposta inflamatória bastante consistente na região adjacente à membrana e ao enxerto, resultando em rejeição da membrana. Por último, a formação de colágeno não se correlaciona com outros fatores como inflamação e necrose, em nenhum dos grupos de tratamento. Desta forma, é possível afirmar que a laserterapia mostrou ser efetiva, contribuindo para o processo cicatricial e integração do enxerto. Já a membrana amniótica canina não deve ser... / Skin grafting is a simple surgical technique and useful to repair wounds, especially those where there is a difficulty to apply primary closure skin or other reconstructive techniques. However, for the graft survival it is necessary that the healthy wound bed and the presence of an exuberant granulation tissue. This study aimed to evaluate the application of amniotic membrane and laser therapy as potential stimulating healing in grafts applied in wounds without granulation tissue. For this, we used 42 rabbits divided into four treatment groups, control group (CG), membrane group (MG), laser group (LG) and membrane and laser group (MLG), submitted to macroscopic and microscopic evaluation. The macroscopic examination was possible to note that the patients of the groups where the amniotic membrane was used in order to stimulate re-epithelialization (MG and MLG) presented evidences associated with severe inflammatory reaction, graft integration failure and consequent necrosis. In LG patients apparently had the best aspect of the graft in the last valuation date. On the microscopic examination, there was intense integration of the graft to the dermis, high reepithelialization level and scarce inflammatory cells in the graft site of LG group patients. The opposite was observed in patients in the MG and MLG groups, where apparently the presence of amniotic membrane seems to have induced very consistent inflammatory response in the region adjacent to the membrane and the graft, evincing that there was a rejection of the membrane. Finally, the collagen formation does not correlated with other factors such as inflammation and necrosis in any of the treatment groups. We can conclude that laser therapy was effective, contributing to the healing process and integration of the graft. Thus, the canine amniotic membrane should not be used for this purpose because it causes intense inflammatory reaction besides to avoid graft nutrition
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Telas de polipropileno e de submucosa de intestino de suíno na reparação de falhas na parede abdominal de ratos (Rattus norvegicus Albinus)

Bürger, Camila Paes [UNESP] 24 April 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2016-04-01T17:55:05Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-04-24. Added 1 bitstream(s) on 2016-04-01T18:00:55Z : No. of bitstreams: 1 000860222.pdf: 19116555 bytes, checksum: b266980044958a37d4f2d8c3d542c532 (MD5) / Das inúmeras enfermidades que afligem os homens e os animais, as hérnias da parede abdominal são conhecidas desde a antiguidade. Embora não tenha técnica cirúrgica ideal ou estudo que validem um procedimento cirúrgico sobre os demais, objetivou-se com este trabalho avaliar o comportamento da tela de polipropileno e da membrana de submucosa de intestino delgado de suíno na reparação de falhas na parede abdominal de ratos. Os 48 animais foram distribuídos em dois grandes grupos. No primeiro grupo, os animais foram distribuídos em dois subgrupos com quatro grupos experimentais de quatro animais cada, correspondentes aos tempos de observação do pós-operatório para as membranas de polipropileno (PP) e de submucosa de intestino de suíno (SIS) (7, 15, 30 e 45 dias) e onde foram feitas as avaliações clínico-cirúrgica, clínica macroscópica post mortem, histopatológica e por microscopia eletrônica de varredura. No segundo grupo, mais dois subgrupos de 30 e 45 dias com quatro animais cada, para cada biomaterial para avaliação tensiométrica. Dos dois grupos, ambos apresentaram aderências sobre o material. No teste de pressão, a tela de PP mostrou-se mais resistente aos 30 dias de observação, já que a tela SIS apresentou ruptura na região de sutura. Ambos os grupos apresentaram reação inflamatória, sendo que no grupo SIS a reação foi menor e com resolução mais rápida. A presença de colágeno foi vista nos dois grupos com predominância do colágeno tipo I e no grupo SIS foi encontrado em maior quantidade desde o início do experimento e a organização do tecido foi maior na tela de SIS. Conclui-se que as duas telas são biocompatíveis; não há superioridade de nenhum dos materiais e sugeriu-se a união das duas telas para novos trabalhos / Of the many diseases that afflict humans and animals, the abdominal wall hernias are known since antiquity. There being no ideal surgical technique or study to validate a surgical procedure on the other, the objective of this work is to evaluate the behavior of the polypropylene mesh and the membrane of porcine small intestinal submucosa in repairing faults in the abdominal wall of rats. The 48 animals were divided into two groups. The first group, the animals were divided into two subgroups with four groups of four animals each, corresponding to observation times postoperatively for membranes made of polypropylene (PP) and porcine intestinal submucosa (SIS) (7, 15, 30 and 45 days) were made and where the clinical- surgical evaluations, macroscopic clinical post mortem, histomorphometric and scanning electron microscopy. The second large group, two subgroups of 30 and 45 days with four animals each, for each biomaterial for strain evaluation. Of the two groups, both showed adhesions on the material. In the pressure test, the screen PP has proved more resistant after 30 days of observation, since the SIS mesh showed burst in the region of the suture. Both groups showed an inflammatory reaction, and the reaction in the SIS group was smaller and quicker resolution. The presence of collagen was seen in both groups with a predominance of type I collagen and SIS group was found in larger quantities since the beginning of the experiment. And the organization of the tissue was higher in the SIS screen. Concluding that the two screens are biocompatible, showing no superiority of any of the materials and suggesting the union of two screens for new jobs
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Funcionalização de celulose bacteriana com peptídeo RGD para reparação tecidual de pele

Lopes, Rute [UNESP] 26 February 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-07-13T12:10:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-26. Added 1 bitstream(s) on 2015-07-13T12:25:39Z : No. of bitstreams: 1 000825911_20160226.pdf: 355265 bytes, checksum: 547f484aecd3612ad60abee5af1a27e3 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-02-26T14:03:55Z: 000825911_20160226.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-02-26T14:04:49Z : No. of bitstreams: 1 000825911.pdf: 1735726 bytes, checksum: ac1e06d8b87ef7b2876cb9e6bf68776f (MD5) / A celulose bacteriana (CB) apresenta ampla diversidade de aplicações. Neste trabalho o enfoque foi desenvolver um curativo temporário ou suporte para regeneração tecidual de pele, a partir da funcionalização de CB com peptídeo RGD, caracterizá-lo quanto às propriedades físico-químicas e avaliar in vitro a capacidade de estimular a adesão e a proliferação de fibroblastos, a citotoxicidade e a resposta imune. A finalidade do material desenvolvido consiste em promover a reparação tecidual de pele, visto que diversos fatores sistêmicos tais como diabetes, tabagismo e carência nutricional, podem dificultar o processo de cura. O uso de biomateriais como suporte de medicamentos ou curativos temporários, auxiliando ou acelerando o processo de reparação e cura, é uma necessidade nestes casos. A sequência peptídica RGD (Arginina-Glicina-Ácido Aspártico), encontrada em diversas proteínas da matriz extracelular (MEC), é frequentemente utilizada para promover a adesão celular, mediada por integrinas, em biomateriais. O peptídeo sintetizado foi escolhido por meio de estudo computacional. Foram sintetizados dois tipos de membranas, a CB-RGDAds, na qual o peptídeo RGD encontra-se adsorvido, e a CBRGDImz, na qual o peptídeo encontra-se ligado covalentemente à membrana, e, portanto, imobilizado. Estes materiais, juntamente com a membrana de CB pura, foram caracterizados a partir de análises de ângulo de contato, difratometria de raios-X (DRX), microscopia eletrônica de varredura (MEV), espectroscopia de absorção na região de infravermelho com Transformada de Fourier (FT-IR), termogravimetria (TG) e calorimetria diferencial exploratória (DSC). Posteriormente, as amostras foram submetidas a ensaios in vitro de viabilidade celular e morfologia celular utilizando a linhagem de fibroblastos L929; adicionalmente análises de determinação de citocinas TNF-α, IFN-γ e produção de óxido... / Bacterial cellulose (BC) exhibits a broad diversity of applications. The aim of this study was to develop a scaffold or temporary dressing for skin tissue repair, whereof the BC would be functionalized with an RGD peptide. The synthesized materials were physicochemically characterized and submitted to in vitro analyses to assess their capacity of stimulating fibroblasts adhesion, proliferation and immune response. The developed materials would be applied in skin tissue repair that may be hampered by a series of sistemic factors, such as diabetes, smoking and nutritional deficiency. In theses cases, the usage of biomaterials as a drug delivery system or wound dressing, aiding or accelerating the repair and healing processes, becomes a necessity. The RGD peptide sequence (Arginine-Glycine-Aspartic Acid) is found in many extracellular matrix (ECM) proteins, and it is frequently used to promote cell adhesion, mediated by integrins, in biomaterials. The synthesized peptide sequence was chosen by means of computational analysis. Two types of membrane were synthesized, the BC-RGDAds in which the RGD peptide was adsorbed, and the BC-RGDImz in which the peptide was covalently bonded to the membrane, therefore, immobilized. These materials, together with the pure BC membrane, were characterized by contact angle analysis, x-ray diffractometry (XRD), scanning electron microscopy (SEM), Fourier transform infrared spectroscopy (FT-IR), thermogravimetric analysis (TGA) and differential scanning calorimetry (DSC). Subsequently, the samples were submitted to in vitro assays of cellular viability and cellular morphology, using the fibroblast lineage L929; moreover, to evaluate the immune and inflammatory response, the nitric oxide production assay as well as TNF-α and IFN-γ cytokines determination assays were performed using Balb/c mice cells. The results indicate that the BC-RGDAds and the BC-RGDImz membranes...
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A busca de mediadores para a modulação de colágeno: efeito de moléculas ativas incorporadas a biomaterial polérico

Ingracio, Anderson Ricardo 03 July 2018 (has links)
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Validação de formulações JACBIO® a base de extratos de Piptadenia gonoacantha (Pau Jacaré) com atividade cicatrizante / Validation of JACBIO® formulations based on extracts of Piptadenia gonoacantha (Pau Jacaré) with cicatrising activity

Ribeiro, Cássia Gondim Pereira 29 June 2018 (has links)
Submitted by MARCOS LEANDRO TEIXEIRA DE OLIVEIRA (marcosteixeira@ufv.br) on 2018-09-25T12:59:04Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1750833 bytes, checksum: fc0aeb77ed1fe3449a107b532dcd2097 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-25T12:59:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1750833 bytes, checksum: fc0aeb77ed1fe3449a107b532dcd2097 (MD5) Previous issue date: 2018-06-29 / A cicatrização é um processo que abrange algumas etapas, em que há um envolvimento celular e através do qual ocorre a liberação de mediadores químicos e respostas vasculares imprescindíveis à sua ocorrência. Mesmo sendo a reparação tecidual um processo sistêmico, o uso de terapias locais fornece condições ideias para o fechamento da ferida e como consequência há redução no tempo de tratamento que é fundamental para a qualidade de vida dos pacientes. O presente trabalho teve como objetivo avaliar ação da pomada e bálsamo contendo extrato obtido de Piptadenia gonoacantha (Pau Jacaré), na cicatrização de feridas avaliando os parâmetros histológicos do processo cicatricial, a regressão da área da ferida realizadas nos camundongos, servindo de base para o pedido de patente. Foram utilizados camundongos (Balb C) machos, com 45 dias de idade e com o uso de um bisturi circular de 6 mm, fez-se uma ferida cirurgicamente no dorso do animal, anestesiando-o previamente. Os animais foram agrupados aleatoriamente e realizados 3 tratamentos com 6 repetições: pomada contendo extrato de Piptadenia gonoacantha, (Pom); bálsamo contendo extrato de Piptadenia gonoacantha, (Bal); sulfadiazina de prata, utilizada como controle positivo, (Sulf). No primeiro dia experimental, foi realizada uma ferida cirúrgica no dorso dos animais, sendo este fragmento chamado de Tempo “0” ou controle. Foram coletadas amostras do tecido no 4° e 8° dia. O tratamento iniciou imediatamente após a lesão, sendo a aplicação dos tratamentos realizados uma vez por dia, durante todo o experimento. O tratamento com as formulações bálsamo ao 4° dia e pomada ao 8° dia de tratamento, ambas contendo extrato de P. gonoacantha, tiveram taxas mais elevadas de regressão da área da ferida, 45,4% e 81,6%, respectivamente, em relação ao grupo controle, sulfadiazina de prata. Os tratamentos Bal e Pom proporcionaram uma redução da vascularização indicando uma redução no processo inflamatório, dando início a fase proliferativa no tecido cicatricial. Estes dados foram apoiados pela análise da síntese de colágeno, onde os tratamentos Bal e Pom promoveram maior estimulação de fibroblastos e síntese de fibras colágenas do tipo I. Os resultados revelaram a eficácia das formulações bálsamo e pomada em relação a sulfadiazina de prata. Porém, com indicações em fases distintas, sendo o bálsamo útil para início do tratamento e a pomada para a continuação e término do mesmo. / The cicatrisation is a process that consists of some stages, in which there is a cellular involvement and through that occurs the release of chemical mediators and vascular responses that are essential to their occurrence. Although tissue repair is a systemic process, the use of local therapies provides the ideal conditions for wound closure and therefore there is a reduction in the treatment time that is fundamental for patients' quality of life. The aim of the present study was to evaluate the effect of ointment and balsam containing extract from Piptadenia gonoacantha (Pau Jacaré), on the wound healing, evaluating the histological parameters of the cicatricial process and the regression of the wound area performed on the mice. This study will serve as basis for a patent application. Male mice (Balb C), 45 days old and using a circular 6 mm scalpel, were surgically wound on the animal's back, anesthetizing them previously. The animals were randomly grouped, and 3 treatments were performed with 6 replicates: ointment containing extract of Piptadenia gonoacantha, (Pom); balsam containing extract of Piptadenia gonoacantha, (Bal); silver sulfadiazine, used as a positive control, (Sulf). On the first experimental day, a surgical wound was performed on the animals' backs, this fragment being called Time "0" or control. Samples of the tissue were collected on the 4th and 8th day. The treatment started immediately after the injury, and the treatments were performed once a day, throughout the experiment. The treatment with the balm formulations at the 4th day and ointment at the 8th day of treatment, both containing P. gonoacantha extract, had higher rates of wound area regression, 45.4% and 81.6%, respectively, comparing to the control group, silver sulfadiazine. The Bal and Pom treatments caused a reduction of the vascularisation indicating a reduction in the inflammatory process, starting the proliferative phase in the cicatricial tissue. These data were supported by analysis of collagen synthesis where the Bal and Pom treatments promoted greater stimulation of fibroblasts and synthesis of type I collagen fibres. The results revealed the effectiveness of the formulations balm and ointmentxi relative to silver sulfadiazine. However, the indications occurred distinct phases, as the balm is useful for beginning the treatment and the ointment for the continuation and termination of the same.
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Avaliação das atividades cicatrizante e antiinflamatória de Casearia sylvestris Swartz em animais e identificação dos marcadores químicos

Pierri, Elaise Gonçalves [UNESP] 30 August 2013 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-12-10T14:24:13Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-08-30. Added 1 bitstream(s) on 2015-12-10T14:30:23Z : No. of bitstreams: 1 000851828.pdf: 3616179 bytes, checksum: c1706c791e25d35b83bb5d81ab649593 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Casearia sylvestris Sw. (Salicaceae) é uma espécie vegetal arbórea ou arbustiva conhecida como guaçatonga, utilizada na medicina popular por suas propriedades antisséptica, antiofídica, antiulcerativa, anti-inflamatória e cicatrizante. A partir da droga vegetal (folhas) desenvolveu-se tratamento prévio e controle de qualidade, com o objetivo de caracterizar a planta como matéria-prima farmacêutica. O extrato etanólico foi produzido a partir de 2,0 Kg da droga vegetal e o rendimento da extração foi de 11,8% (p/p). Foi realizada uma extração em fase sólida (EFS) com o extrato etanólico seco de folhas de C. sylvestris. A partir da fração EFSCs2 foi isolada uma substância por cromatografia em coluna de fase normal que foi identificada por análises espectrométricas como a casearina J. Análises cromatográficas foram realizadas para identificação e quantificação de diterpenos clerodânicos no extrato etanólico e suas frações. Os diterpenos clerodânicos caseargrewiina F, casearinas B e X foram identificados e o teor de diterpenos clerodânicos totais foi determinado por CLAE-DAD no extrato EEtCs e na fração EFSCs2, cujos valores foram 27,4% e 50,6%, respectivamente. Das análises por cromatografia líquida de alta eficiência foram também obtidos os teores de casearina J e caseargrewiina F no extrato etanólico das folhas, cujos valores foram de 2,35 e 1,1%, respectivamente. Para avaliarmos a atividade anti-inflamatória foi realizado o ensaio do edema de pata em ratos sendo os resultados obtidos promissores comparando-se à indometacina e tanto frações (EFSCs 1 e 2) como substâncias purificadas (Casgw F e Cas B) não apresentaram grau de lesão gástrica nos animais quando analisados macroscopicamente, ao contrário da indometacina que apresentou grau 5 (máximo) de lesão pelo índice de ulceração. Na atividade anti-inflamatória crônica (artrite)... / Casearia sylvestris Sw (Salicaceae) is a tree or shrub known as guaçatonga used in folk medicine for its antiseptic, antiophidian, antiulcerogenic, anti-inflammatory and wound healing properties. From the leaves it was developed pretreatment and quality control, in order to characterize the plant as pharmaceutical raw material. The ethanol extract was produced from 2.0 kg of the plant drug, and the extraction yield was 11.8% (w/w).It was performed a solid phase extraction (EFS) with 20.0 g of the ethanol extract of dried leaves of C. sylvestris. The purification was carried out in three steps, including a solid phase extraction by means of silica and activated carbon, normal-phase column chromatography and aqueous reversed-phase high efficiency chromatography. The diterpenes caseargrewiin F, casearins B and X. were used as standards. The clerodane type diterpenes were identified and quantified via HPLC-DAD in the extract EEtCs and EFSCs2 fraction whose values were 27.4% and 50.6%, respectively. From EFSCs2 fraction it was isolated a substance identified via spectrometric analysis as casearin J, existing in the literature. From the HPLC-UV analysis the casearin J and caseargrewiin F contents were gotten in the leaves ethanol extract, which values were 2.35 and 1.1% respectively. In order to evaluate the anti-inflammatory activity, rat's paw edema was performed where the results were promising regarding to indomethacin and, either extract (EEtCs), fractions (EFSCs 1 and 2) and purified substances (Cas B and CasgwF) showed no gastric wound in the animals stomach when macroscopically examined, in opposite to indomethacin that showed wound level 5 (maximum) on the ulceration index. In the chronic anti-inflammatory activity (arthritis) the reestablishment of the joints proportion for the group treated with dexamethasone (1 mg / kg) was 80 % and for the group treated with the ...
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Estudo comparativo da utilização de PRP (Plasma Rico em Plaquetas) autólogo na cicatrização de feridas metacarpianas em equinos: aspectos macroscópicos, histopatológicos, imunoistoquímicos e morfométricos / Comparative study of the use of PRP (Platelet Rich Plasma) autologous in wound healing in equine metacarpal: aspects macroscopic morphometric histopathological and immunohistochemical

Bermejo, Vanessa Justiniano [UNESP] 30 July 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-05-14T16:53:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-07-30Bitstream added on 2015-05-14T16:59:07Z : No. of bitstreams: 1 000828989.pdf: 1077462 bytes, checksum: ad94a8164b9e30d6a8c7bf2ba8b96849 (MD5) / A cicatrização da pele é o objetivo de estudos e pesquisas, devido ao seu interesse clínico, científico e econômico, principalmente devido à grande freqüência de feridas causadas por lesões em cavalos. A cura da ferida é um fenômeno fisiológico que se inicia a partir da perda da integridade da pele, gerando uma solução de continuidade que atinge as camadas subjacentes em diversos graus e depende de uma série de reações químicas (BERTONE,1989). Vários fatores influenciam a cicatrização após lesão traumática ou cirúrgica. Feridas abaixo do jarrete ou joelho nos eqüinos são um problema, mesmo em animais sadios. Contudo esta dificuldade não ocorre na parte superior do corpo, isto pode ser explicado ao baixo suprimento sanguíneo, baixa oxigenação, temperaturas mais baixas e um desequilíbrio de fatores de crescimento (DYSON, 1997). É essencial na reparação tecidual uma fonte rica em fatores de crescimento. As plaquetas atuam na hemostase, cicatrização de feridas, reepitelização, liberadora de diversos fatores de crescimento que estimulam a angiogênese, promotores de crescimento e proliferação de fibroblastos que por sua vez proporciona um aumento na síntese de colágeno, sendo o PRP uma fonte natural e segura, pois é plasma do próprio animal (DYSON, 1997). Esse trabalho tem como objetivo a avaliação de eqüinos induzidos com uma solução de continuidade, ferida, na face dorsal da região metacarpiana dos membros torácicos, onde foram utilizados 6 animais da espécie eqüina, SRD, tendo como tratamento o uso de plasma rico em plaqueta (PRP) centrifugado e solução fisiológica. Os animais serão avaliados por parâmetros clínicos, morfométricos, avaliações histopatológicas e imunoistoquímicas durante 30 dias / The healing of the skin is the purpose of study and research, due to its clinical, scientific and economic interest, mainly due to the high frequency of wounds caused by injuries in horses. The wound healing is a physiological phenomenon which starts from the loss of skin integrity, generating a continuous flow that reaches the underlying layers to different degrees and depends on a series of chemical reactions (Bertone, 1989). Several factors influence healing after traumatic or surgical injury. Wounds below the knee or hock in horses are a problem, even in healthy animals. However, this difficulty does not occur in the upper part of the body, this can be explained by low blood supply low oxygenation, lower temperatures and an imbalance of growth (DYSON, 1997) factors. It is essential in tissue repair a rich source of growth factors. Platelets act in hemostasis, wound healing, re-epithelialization, releasing several growth factors that stimulate angiogenesis, growth promoters and proliferation of fibroblasts which in turn provides an increase in collagen synthesis, the PRP being a natural source and secure because it is the animal's own plasma (DYSON, 1997). This study aims to evaluate horses induced with a solution of continuity, wound on the dorsal surface of the metacarpal region of the forelimb, where 6 animals of the equine species, SRD were used, with treatment as the use of platelet rich plasma (PRP) saline and centrifuged. The animals will be evaluated by clinical, morphometric, histopathological and immunohistochemical reviews for 30 days

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