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Previous issue date: 2013 / CNPq;FACEPE / Lectinas são proteínas ligadoras de carboidratos e com atividade hemaglutinante (AH).
Sementes de Moringa oleifera são utilizadas no tratamento de água e contêm uma lectina
solúvel em água (WSMoL) com atividade coagulante. O objetivo deste trabalho foi avaliar a
cinética de coagulação promovida por WSMoL através de medidas de absorbância (densidade
óptica) e variação de resistência elétrica na interface eletrodo-solução, na ausência e presença
de carboidratos e íons. Extrato aquoso (10%, p/v) de sementes foi fracionado com sulfato de
amônio (60% de saturação) e o precipitado foi aplicado em coluna de quitina equilibrada com
NaCl 0,15 M. WSMoL foi eluída com ácido acético 1,0 M e caracterizada quanto à massa
molecular nativa, perfil em SDS-PAGE e ponto isoelétrico (PI). A atividade coagulante foi
determinada empregando-se modelo de água turva com caolin a 1% em água de torneira. A
AH e atividade coagulante de WSMoL foram também avaliadas na presença de Nacetilglicosamina,
glicose e frutose em diferentes concentrações (25, 50, 100, 200 mM) e
soluções de sais de cálcio e magnésio (20 mM). WSMoL nativa apresentou massa molecular
59,4 kDa. Em SDS-PAGE, foram observados três peptídeos com aproximadamente 30, 20 e
10 kDa. O PI determinado para WSMoL nativa foi de 5,5. A AH de WSMoL foi inibida por
todos os carboidratos nas concentrações testadas (exceto frutose a 25 mM) e estimulada pelos
íons cálcio e magnésio. A atividade coagulante de WSMoL foi demonstrada por redução da
absorbância da solução de caolin e redução da resistência elétrica do meio aquoso em
presença da lectina. A incubação da lectina com carboidratos nas concentrações que inibiram
a AH ou com íons cálcio e magnésio promoveu a redução da atividade coagulante de
WSMoL, demonstrada pela baixa eficiência na redução da absorbância e resistência elétrica
do meio aquoso. A incubação com carboidratos na concentração de 200 mM aboliu a
atividade coagulante da lectina. Em conclusão: 1) WSMoL nativa é uma proteína aniônica
oligomérica; 2) a redução de absorbância e resistência elétrica promovida por WSMoL
provavelmente envolve desestabilização de partículas em suspensão, seguida da formação de
complexos entre WSMoL e as partículas; 3) a presença no meio aquoso de carboidratos
inibidores da AH de WSMoL resulta em diminuição da atividade coagulante; e 4) cátions
Ca2+ e Mg2+ estimularam a AH mas prejudicaram a atividade coagulante de WSMoL.
Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/13096 |
Date | 31 January 2013 |
Creators | Moura, Kézia Santana de |
Contributors | Paiva, Patrícia Maria Guedes, Oliveira, Maria Danielly Lima de |
Publisher | Universidade Federal de Pernambuco |
Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
Language | Breton |
Detected Language | Portuguese |
Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
Rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
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