FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / A ordem Chiroptera mostra-se como reservatÃrio para vÃrios agentes infecciosos, incluindo protozoÃrios, bactÃrias, vÃrus e fungos. A fim de investigar a a eco-epidemiologia de Histoplasma capsulatum no Nordeste do Brasil, foram capturados 83 morcegos em Ãreas urbanas e rurais no estado do CearÃ, em coletas diurnas e noturnas, durante o perÃodo de agosto de 2010 a marÃo de 2011. ApÃs eutanÃsia, fragmentos de baÃo, fÃgado e pulmÃo foram removidos, macerados e alÃquotas de 100μL foram semeadas em placas contendo Ãgar BHI modificado, as quais foram incubadas por atà seis semanas nas temperaturas de 28ÂC e 35ÂC. AlÃquotas remanescentes de cada material macerado foram estocadas a -20ÂC. Embora o fungo nÃo tenha sido isolado em nenhuma amostra, apÃs 21 dias de incubaÃÃo à 35ÂC foi observado o crescimento de uma colÃnia fÃngica sugestiva de Coccidioides spp. em amostra de pulmÃo da espÃcie Carollia perspicillata. Fragmentos de pulmÃo do morcego retirados do estoque a -20ÂC e analisados ao microscÃpio Ãptico revelaram estruturas esfÃricas semelhantes a forma parasitÃria do fungo. A colÃnia foi investigada por meio do teste de reversÃo in vivo em modelo murino, com observaÃÃo dos animais inoculados por atà quatro semanas. A identificaÃÃo molecular das culturas foi realizada por reaÃÃo de PCR especÃfica para C. posadasii, empregando os oligonucleotÃdeos Coi9-R e Coi9-F. Por fim, amostras de macerados dos pulmÃes, baÃo e fÃgado foram investigadas quanto à presenÃa de anticorpos ou antÃgenos especÃficos para C. posadasii, bem como quanto à presenÃa de anticorpos anti-Histoplasma, por meio da tÃcnica de imunodifusÃo. EsfÃrulas caracterÃsticas de Coccidioides spp. foram visualizadas em amostras de pulmÃo dos camundongos infectados experimentalmente. AnÃlise molecular das culturas isoladas de pulmÃo de C. perspicillata, bem como dos ÃrgÃos dos camundongos, mostraram banda de aproximadamente 630 pb, caracterÃstica de C. posadasii. Por meio de reaÃÃo de imunodifusÃo, foram detectados dois animais reagentes para antÃgenos de Coccidioides. Os animais pertenciam Ãs espÃcies Glossophaga soricina e Desmodus rotundus e um animal da espÃcie G. soricina anticorpo-positivo para Coccidioides. NÃo foi observada presenÃa de anticorpos anti-Histoplasma em nenhuma das amostras. O presente estudo mostra o primeiro isolamento de C. posadasii em quirÃpteros. Adicionalmente, de forma inÃdita, detectou-se de antÃgenos e anticorpos especÃficos para C. posadasii nestes animais. Faz-se necessÃrio o estudo dos quirÃpteros na ecoepidemiologia do patÃgeno. / The order Chiroptera is shown as a reservoir for various infectious agents, including protozoan, bacteria, virus and fungi. To investigate the eco-epidemiological aspects of Histoplasma capsulatum in Northeast Brazil, 83 bats were captured in urban and rural areas in CearÃ, collected in day and night, during the period August 2010 to March 2011. After euthanasia, fragments of sleen, liver and lung were removed, macerated and 100 μL aliquots were plated on agar containing modified BHI, which were incubated for up to six weeks at temperatures of 28 ÂC and 35 ÂC. Aliquots of each remaing macerated material stored at -20 ÂC. Although the fungus was not isolated in any samples, after 21 days at 35 ÂC was observed the growth of a fungal colony suggestive of Coccidioides spp. in lung samples of the species Carollia perspicillata. Fragments of the bet lung removed from storage at -20 ÂC and analyzed by optical microscopy revealed spherical structures similar to the shape of the parasitic fungus. The colonies were investigated by means of the reversion in vivo in a murine model, with observation of the animals incoculated up to four weeks. The molecular identification of cultures was performed by PCR specific for C. posadasii, using the oligonucleotides Coi9-R and Coi9-F. Finally, samples of macerated lung, spleen and liver were investigated for the presence of antibodies or antigens specific for C. posadasii, as well as the presence of anti-Histoplasma, by immunodiffusion. Spherules of Coccidioides spp. features were visualized in lung samples of mice experimentally infected. Molecular analysis of cultures isolated from lungs of C. perpicillata, as well as organs of mice, showed approximately 630 pb band, characteristic of C. posadasii. By immunodiffusion reaction, two animals were detected reagents for Coccidioides antigens. The animals belonged to the species Glossophaga soricina and Desmodus rotundus and an animal of the species G. soricina antibody-positive for Coccidioides. There was no presence of anti-Histoplasma is any sample. The present study shows the first isolation of C. posadasii in bats. Additionally, in an unprecedented manner, we detected antigens and antibodies specific to C. posadasii these animals. Its is necessary to the study of bats in ecoepidemiology the pathogen.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:5017 |
| Date | 19 December 2011 |
| Creators | Kylvia Rocha de Castro e Silva |
| Contributors | Rossana de Aguiar Cordeiro, Josà JÃlio Costa Sidrim, Marcos FÃbio Gadelha Rocha |
| Publisher | Universidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em Microbiologia MÃdica, UFC, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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