20 svenska barn diagnostiseras årligen med barntumören neuroblastom (NB). Läkemedelsresistens och intratumoral heterogenitet försvårar behandlingen och 50-60% av hög-risk NB-patienter drabbas av återfall. Subpopulationer av resistenta celler har identifierats i hög-risk NB-cellinjer, vilket belyser behovet av nya behandlingsalternativ. Dessa celler har visats vara känsliga mot antimetaboliter, som är S-fas specifika läkemedel. Syftet med detta projekt är att utvärdera antimetaboliter som singelbehan-dling eller i kombination med kemoterapi som en ny behandlingsmetod i resistenta NB-celler. Cellvia-bilitiet, cellåterväxt efter långtidsbehandling och cellcykelarrest samt cellcykelns förlopp analyserades på en panel bestående av de fem TP53-muterade ultra-högrisk NB-cellinjerna Kelly, SK-N-DZ, SK-N-AS, BE(2)-C och SK-N-FI. Läkemedlena som utvärderades var kemoterapierna doxorubicin (doxo) och cisplatin samt antimetaboliterna cytarabine (Ara-C), gemcitabine, 5-fluorouracil (5-FU) och hy-droxyurea (HU). Resultaten indikerar att Kelly och SK-N-FI var de cellinjer som var mest känsliga mot kombinationer av doxo tillsammans med antimetaboliter. Detta styrktes ytterligare av analysen av cellcykelarrest som visade att dessa cellinjer föredrar att arrestera i S-fas. Cellinjerna SK-N-DZ, SK-N-AS och BE(2)-C var mindre känsliga mot kombinationsbehandlingarna och visade preferens för att arrestera i andra faser av cellcykeln. Eftersom cellinjerna visade variationer i cellcykelarrest så föreslår vi en utvärdering av trippelkombinationer med läkemedel som är G2/M-fas specifika för att ytterligare eliminera resistenta subpopulationer. / Every year, 20 Swedish children are diagnosed with the pediatric tumor neuroblastoma (NB). Therapy resistance and intratumor heterogeneities complicate treatment of NB and ultimately, 50-60% of high- risk NB patients relapse. Subpopulations of resistant cells have been identified in high-risk NB cell lines, which elucidates the need for novel treatment options. These cells have been suggested to be sensitive to the S-phase specific drugs antimetabolites. The objective of this project is to evaluate antimetabolites as monotherapy and in combination with chemotherapy as a novel treatment option in high-risk NB. Analyses of cell viability, cell regrowth following long-term treatment, and cell cycle progression and mitotic arrest were performed in a panel of five TP53 mutated ultra-high risk NB cell lines, Kelly, SK- N-DZ, SK-N-AS, BE(2)-C, and SK-N-FI. The evaluated drugs were the chemotherapies doxorubicin (doxo) and cisplatin, and the antimetabolites cytarabine (Ara-C), gemcitabine, 5-fluorouracil (5-FU), and hydroxyurea (HU). Obtained results indicated that out of the tested cell lines, Kelly and SK-N-FI are the most sensitive to combinations of doxo with antimetabolites. This was further corroborated via analysis of cell cycle progression and mitotic arrest which demonstrated that Kelly and SK-N-FI have a preference for S-phase arrest. Cell lines SK-N-DZ, SK-N-AS, and BE(2)-C were less sensitive to combination treatments and showed preference for arrest in other phases of the cell cycle. Since resistant cell lines show variations in mitotic arrest, we suggest evaluating triple combinations with targeted treatments for G2/M-phase, in order to further eliminate resistant subpopulations.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:UPSALLA1/oai:DiVA.org:kth-314519 |
| Date | January 2022 |
| Creators | Lundström, Maja |
| Publisher | KTH, Proteinvetenskap |
| Source Sets | DiVA Archive at Upsalla University |
| Language | English |
| Detected Language | Swedish |
| Type | Student thesis, info:eu-repo/semantics/bachelorThesis, text |
| Format | application/pdf |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | TRITA-CBH-GRU ; 2022:193 |
Page generated in 0.0018 seconds