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Previous issue date: 2005 / A atividade larvicida do Bacillus sphaericus depende da ligação da toxina
binária (Bin) com um receptor específico presente no epitélio intestinal de
larvas de culicídeos. Este trabalho descreve a clonagem e sequenciamento
do gene deste receptor em larvas de Culex quinquefasciatus de uma
colônia susceptível (CqSF) e de uma resistente (CqRL1/2362) ao Bs, para
elucidar o mecanismo molecular da resistência. Ensaios de afinidade in
vitro mostraram que uma proteína de 60 kDa é o receptor da toxina na
colônia CqSF e nenhuma molécula funcional foi observada em preparações
da colônia CqRL1/2362. O sequenciamento do gene obtido da colônia
CqSF mostrou uma seqüência de 1925 pb composta por regiões 5 e
3´não traduzidas, sequência codificadora e íntron. A respectiva sequência
do gene para a colônia CqRL1/2362 mostrou uma deleção de 19
nucleotídeos, geradora de uma mudança na fase de leitura de 28
aminoácidos e de um códon de terminação da tradução prematuro. A
presença deste códon prematuro pode desestabilizar o respectivo mRNA, e
impedir sua tradução, bem como leva a síntese de uma proteína truncada
sem a âncora GPI necessária a sua localização na membrana epitelial. Em
ambos os casos a ausência do receptor no epitélio intestinal seria a causa
da resistência. Neste trabalho foi produzida ainda uma proteína
recombinante do receptor de 45 kDa que mostrou funcionalidade,
demonstrando que o sítio de ligação está localizado na porção N-terminal
da molécula. Anticorpos obtidos contra esta proteína recombinante
demonstraram ser uma ótima ferramenta de detecção do receptor nativo
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/6658 |
| Date | January 2005 |
| Creators | Patrícia Romão Pompilio de Melo, Tatiany |
| Contributors | Pompílio de Melo Neto, Osvaldo |
| Publisher | Universidade Federal de Pernambuco |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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