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Disrupção endócrina em testículos de Poecilia reticulata causada pelo herbicida glifosato / Endocrine disruption in testis of Poecilia reticulata caused by the herbicide glyphosate

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Previous issue date: 2013-02-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Xenobiotics pesticides are widely used in crops or even gardening throughout the world with purpose of a broad spectrum pest control, herbicides with glyphosate (N- phosphonomethyl glycine) as an active ingredient stands out amongst that group. The glyphosate (GLI) participates in a unique metabolic pathway during the synthesis of amino acids in plants, although, in animals it was thought to be harmless. However, literature indicates toxicity from commercial solutions, but few studies done with pure GLI. Moreover, to verify toxic potential of GLI, experiments done using Nuclear Magnetic Resonance (NMR). Furthermore, the test tanks were examined the presence of GLI for a period of 96 hours. It is because the GLI, during the metabolism of prokaryotes, converts to Aminomethylphosphonic acid (AMPA). The results showed the absence of AMPA at 96 hours of exposure, whereas, any changes were attributed to GLI in these animals. Primarily, the dose of CL50-96h for the experimental animal, Poecilia reticulata (guppy), was determined. It estimated at 68.51 ± 2.2 mg/L for males and at 70.56 ± 2.96 mg/L for females. The lethal dose calculated according to the recommended guidelines from the Organisation for Economic Co-operation and Development (OECD). During these tests the animals in the experimental group (EG) exposed at concentrations of 50, 55, 60.5, 66.5 and 73.2 mg/L showed swimming changes (17.5% - lethargy, 11.1 % - irregular swimming and 45.9% - hypoxia). Respiratory changes (8.3% - swam to the tank surface, 1.8% - hypo oxygenated) and changes in color pattern, such as loss of intensity of the hues orange, red, blue, and assuming a dull coloration (14.3%) in all EG. Subsequently, male’s guppy treated with sublethal doses of pure GLI in concentrations of 17.13 mg/L (25% CL50), 34.26 mg/L (50% CL50) and 51.39 mg/L (75% CL50) as per 203 guidelines of the OECD. After euthanasia, by descerebration, the male animals were dissected and the testicles fixed in buffered paraformaldehyde, sectioned in 2.0 μm slices by an ultramicrotome and placed in histoResin®. The sections stained with hematoxylin and toluidine blue/Floxine B, then photographed under light microscope. The program Image-Pro Plus provided the images, which analyzed by the program Statistica 7.0. Consequently, the data reviewed that GLI has toxic potential. It has the potential to: cause testicular regression - morphometric measures decrease, reduce the number of the spermatic compartments, reduce the gonad index (Igs) and promote histopathology which may lead to reduction or loss of function. Thus, characterizing a process of demasculinization, which indicates endocrine disruption. / Agrotóxicos são xenobióticos utilizados largamente nos lavouras ou mesmo em jardinagem em todo mundo para o controle de pragas agrícolas, e entre eles destacam-se os herbicidas a base de Glifosato (N-fosfonometil-glicina). O Glifosato (GLI) participa de uma rota metabólica exclusiva na síntese de aminoácidos nas plantas e foi considerado inofensivo aos animais. Contudo, há relatos na literatura que indicam a toxicidade das soluções comerciais à base de GLI, mas poucos abordam a atividade do GLI puro. Dessa maneira, para se verificar o potencial toxico do GLI, primeiramente, experimentos com Ressonância Magnética Nuclear (RMN) foram realizados para verificar a presença de GLI nos aquários testes pelo tempo de 96h. Isso foi feito porque o GLI pode ser convertido a ácido aminometil fosfônico (AMPA) pelo metabolismo de procariotos. Os resultados demonstraram ausência de AMPA até 96h de exposição e dessa forma foi atribuído ao GLI qualquer alteração presente nos animais testes. Depois foi determinado o valor da CL50-96h para o animal experimental Poecilia reticulata (guarú). Essa foi estimada em 68,51 ± 2,2 mg/L para machos e 70,56 ± 2,96 mg/L para fêmeas. Os testes de toxicidade letal para o cálculo da CL50-96h foram feitos de acordo com as recomendações do guia 203 da Organização para cooperação e desenvolvimento do comércio (OECD). Durante esses testes os animais do grupo experimental (GE) expostos nas concentrações de 50; 55; 60,5; 66,5 e 73,2 mg/L apresentaram alterações comportamentais como distúrbios natatórios (17,5% – letargia; 11,1% – natação irregular e 45,9% – hipoatividade), respiratórios (8,3% – nado na superfície do aquário; 1,8% – hipóxia) e alterações no padrão da coloração (14,3%) como perda da intensidade das matizes laranja, vermelha e azul e dos tons acetinados em todos os GE. Posteriormente guarús machos foram tratados com doses subletais do GLI puro nas concentrações de 17,13 mg/L (25% da CL50), 34,26 mg/L (50% da CL50) e de 51,39 mg/L (75% da CL50) conforme o guia 203 da OECD. Após a eutanásia por descerebração, os animais foram dissecados e os testículos foram fixados em paraformaldeído tamponado, inclusos em historresina e seccionados a 2,0 μm em ultramicrótomo. Os cortes foram corados com Azul de toluidina e hematoxilina/floxina e posteriormente fotografados em fotomicroscópio. As imagens forneceram dados obtidos pelo programa Image Pro-Plus que foram analisados pelo programa Statistica 7.0. Foi demonstrado que o GLI apresenta potencial tóxico para o guarú por causar regressão testicular pela redução das medidas morfométricas, redução do número de compartimentos espermáticos, redução do Índice gonadossomático (Igs) e por promover histopatologias que podem levar a diminuição ou a perda da funcionalidade do testículo. Tal processo caracteriza a desmasculinização, um indicativo de disrupção endócrina.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.bc.ufg.br:tede/3846
Date25 February 2013
CreatorsPires, Fernando Santiago
ContributorsSabóia-Morais, Simone Maria Teixeira de, Lião, Luciano Morais, Sabóia-Morais, Simone Maria Teixeira de, Angelini, Ronaldo, Costa, Renata Mazaro e
PublisherUniversidade Federal de Goiás, Programa de Pós-graduação em Biologia (ICB), UFG, Brasil, Instituto de Ciências Biológicas - ICB (RG)
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguageEnglish
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFG, instname:Universidade Federal de Goiás, instacron:UFG
Rightshttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/, info:eu-repo/semantics/openAccess
Relation6883982777473437920, 600, 600, 600, 600, -3872772117827373404, 3962143990328052072, 2075167498588264571

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